细胞技术

1、称体重：2、腹腔内注射苯巴比妥钠50ｍｇ/kg将大鼠处死用酒精严格消毒大鼠下颌至全腹皮肤及鼠毛剪开下颌至中腹部皮肤打开腹腔推开肝脏并分离出肝及膈肌间的下腔静脉并给予切开放血。3、肺血管灌洗：分离并部分横断切开气管插入连接有10ｍｌ注射器(内装ｐＨ7.0ＰＢＳ)的灌洗管并用细线加以固定在固定的离心段剪断气管剪开肋骨并打开胸腔将肺和心脏提出胸腔。用20号针(另一端连接20ｍｌ的注射器) ...

1、称体重：2、腹腔内注射苯巴比妥钠50ｍｇ/kg将大鼠处死用酒精严格消毒大鼠下颌至全腹皮肤及鼠毛剪开下颌至中腹部皮肤打开腹腔推开肝脏并分离出肝及膈肌间的下腔静脉并给予切开放血。3、肺血管灌洗：分离并部分横断切开气管插入连接有10ｍｌ注射器(内装ｐＨ7.0ＰＢＳ)的灌洗管并用细线加以固定在固定的离心段剪断气管剪开肋骨并打开胸腔将肺和心脏提出胸腔。用20号针(另一端连接20ｍｌ的注射器) ...

COLLAGENCollagen may be used to coat glass coverslips for the growth of epithelial endothelial and muscle cells neurons PC12 and CHO cell lines. Type I collagen is most often used for coating substrat ...

细胞培养中常见的污染情况总结如下:常见的污染如下：1、细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况，是否在高压灭菌时放气时间足够，压力足够！尤其是和储存培养液接触的移液管等物品，连续两次污染的话有可能造成储存液污染，一定要注意！下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象！可在培养液中加相应的抗生素 ...

细胞培养中常见的污染情况总结如下:常见的污染如下：1、细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况，是否在高压灭菌时放气时间足够，压力足够！尤其是和储存培养液接触的移液管等物品，连续两次污染的话有可能造成储存液污染，一定要注意！下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象！可在培养液中加相应的抗生素 ...

Digging through the literature I've compiled a list of possible markers for various cell types which I'll publish here for the benefit of any scientists who use anonymous blogs as their preferred info ...

Digging through the literature I've compiled a list of possible markers for various cell types which I'll publish here for the benefit of any scientists who use anonymous blogs as their preferred info ...

基本原理NK 细胞克隆来源于NK 细胞，该细胞的分离方法参见第一节之四。这些NK 细胞与经γ射线照射的饲养细胞苓而获得的NK 细胞克隆。试剂和材料● 植物血凝素（PHA）母液为100μg/ml● 重组IL－2（rIL－2）母液为105u/ml，分装小瓶（0．5ml/瓶），置－20℃长期保存，或置4℃下短期存放。应避免反复冻融，IL－2 不能用滤器过滤除菌处理。● 培养基1.接种培养液：RPMI16 ...

基本原理NK 细胞克隆来源于NK 细胞，该细胞的分离方法参见第一节之四。这些NK 细胞与经γ射线照射的饲养细胞苓而获得的NK 细胞克隆。试剂和材料● 植物血凝素（PHA）母液为100μg/ml● 重组IL－2（rIL－2）母液为105u/ml，分装小瓶（0．5ml/瓶），置－20℃长期保存，或置4℃下短期存放。应避免反复冻融，IL－2 不能用滤器过滤除菌处理。● 培养基1.接种培养液：RPMI16 ...

可溶性抗原与相应抗体在半固体琼脂凝胶内扩散，二者相遇，在比例合适处形成白色沉淀。双向琼脂扩散试验（Doubleimmunodiffusiontest） 抗原和抗体加到琼脂板上相对应的孔中，两者各自向四周扩散，如两者相对应，浓度比例合适，则经一定时间后，在抗原、抗体孔之间出现清晰致密的白色沉淀线。每一抗原与其相对应抗体只能形成一条沉淀线，若同时含有若干对抗原抗体系统，因其扩散速度的不同，可在琼脂 ...

可溶性抗原与相应抗体在半固体琼脂凝胶内扩散，二者相遇，在比例合适处形成白色沉淀。单向琼脂扩散试验（Single immunodiffusion test）―人血清中IgG、IgA、IgM的测定。 单向琼脂扩散试验是一种定量试验，将抗体混合于琼脂内，倾注于玻片或平皿上，凝固后在琼脂上打孔，再将抗原标本加入孔内，经过一定的时间，在孔的周围出现抗原抗体复合物形成的沉淀环，环的大小与抗原含量和扩散时 ...

可溶性抗原与相应抗体在半固体琼脂凝胶内扩散，二者相遇，在比例合适处形成白色沉淀。单向琼脂扩散试验（Single immunodiffusion test）―人血清中IgG、IgA、IgM的测定。 单向琼脂扩散试验是一种定量试验，将抗体混合于琼脂内，倾注于玻片或平皿上，凝固后在琼脂上打孔，再将抗原标本加入孔内，经过一定的时间，在孔的周围出现抗原抗体复合物形成的沉淀环，环的大小与抗原含量和扩散时 ...

细胞克隆，是将一个单细胞从细胞群中分离出来单独培养，使之重新繁衍成一个新的单一细胞群的培养技术。未经克隆化的细胞具有异质性，经过克隆得到的是均一细胞集团。这里仅介绍T细胞与NK 细胞的克隆方法。基本原理用限度稀释克隆形成法制备T 细胞克隆时，并非依赖细胞 的特性，而是将T 细胞在细胞培养板上稀释到统计学的浓度，即从理论值上达到每孔1 个细胞，其中加入IL－2 和PHA 可增强细胞的生长，而加入的同 ...

1） 瘤细胞培养（无特殊要求）骨髓瘤细胞呈悬浮或轻微附着形式生长，如附着性生长的细胞多时，用吸管轻轻吹打或轻轻叩击培养容器即可分离下来。通常要维持细胞于指数生长期（细胞培养时间为15~20小时），每3~5天取细胞0.2~1ml移入到10ml新培养液中，其最大细胞密度不能超过5×105~106/ml。一般使用含有高糖的DMEM培养液，并补加有pH的稳定剂HEPES。2）免疫小鼠和脾细胞的制备免疫：取 ...

1） 瘤细胞培养（无特殊要求）骨髓瘤细胞呈悬浮或轻微附着形式生长，如附着性生长的细胞多时，用吸管轻轻吹打或轻轻叩击培养容器即可分离下来。通常要维持细胞于指数生长期（细胞培养时间为15~20小时），每3~5天取细胞0.2~1ml移入到10ml新培养液中，其最大细胞密度不能超过5×105~106/ml。一般使用含有高糖的DMEM培养液，并补加有pH的稳定剂HEPES。2）免疫小鼠和脾细胞的制备免疫：取 ...

1 血清一定需要加热灭活　　人们通常通过在56°C加热30分钟的办法，来灭活血清中的补体，以及其中可能的微生物（比如支原体）的污染。加热灭活带来的问题是，血清中的氨基酸、维生素和生长因子等也会不同程度的被破坏。　　Triglia and Linscott 的研究发现（1），胎牛血清中的补体含量很低，即使在未稀释的胎牛血清中，也观察不到溶血现象。另外37°C的加热能够有效灭活补体。所以对胎牛血清而言 ...

1 血清一定需要加热灭活　　人们通常通过在56°C加热30分钟的办法，来灭活血清中的补体，以及其中可能的微生物（比如支原体）的污染。加热灭活带来的问题是，血清中的氨基酸、维生素和生长因子等也会不同程度的被破坏。　　Triglia and Linscott 的研究发现（1），胎牛血清中的补体含量很低，即使在未稀释的胎牛血清中，也观察不到溶血现象。另外37°C的加热能够有效灭活补体。所以对胎牛血清而言 ...

问：在培养细胞取材做其他检测时，为了各个培养瓶中的细胞的齐同性，常须通过同步而实现。具体方法不明，好象是用维持培养液（含较低浓度培养血清），而不是用生长培养液。答：1.细胞同步化是指为研究细胞周期的不同阶段的生化特征必须获得细胞周期一致性的细胞.因此你首先看看是否需要用同步化的细胞2.细胞同步化分为自然同步化和人工同步化二种方法前者由于细胞群体受多种条件限制对结果有很大影响，所以一般都采取后者.3 ...

问：在培养细胞取材做其他检测时，为了各个培养瓶中的细胞的齐同性，常须通过同步而实现。具体方法不明，好象是用维持培养液（含较低浓度培养血清），而不是用生长培养液。答：1.细胞同步化是指为研究细胞周期的不同阶段的生化特征必须获得细胞周期一致性的细胞.因此你首先看看是否需要用同步化的细胞2.细胞同步化分为自然同步化和人工同步化二种方法前者由于细胞群体受多种条件限制对结果有很大影响，所以一般都采取后者.3 ...

我养了快半年的大鼠气道平滑肌细胞，有一点体会，特发上来和各位战友交流一下，互相进步。壹．器械显微器械：眼科剪一把，直弯眼科镊各一把，细结镊一把，手术刀一把，针头诺干杀老鼠器械：手术剪一把，大镊子一把，弯眼科镊一把，组织钳一把，50ml烧杯一个（锡纸包好）另外：10ml离心管两个，培养皿两个，10ml的瓶子三个，小滤器两个，硅胶板一块，培养瓶盖子诺干贰。试剂D-HANKS液250ml，双抗2ml ...