细胞技术

含有磷酸基团的脂称为磷脂是细胞膜中含量最丰富和最具特性的脂。动、植物细胞膜上都有磷脂 是膜脂的基本成分 约占膜脂的50%以上。磷脂分子的极性端是各种磷脂酰碱基 称作头部。它们多数通过甘油基团与非极性端相连。磷脂又分为两大类: 甘油磷脂和鞘磷脂。甘油磷脂包括磷脂酰乙醇胺、磷脂酰胆碱(卵磷脂)、磷脂酰肌醇等。磷脂分子的疏水端是两条长短不一的烃链 称为尾部 一般含有14～24个偶数碳原子。其中一条烃链常 ...

胆固醇存在于真核细胞膜中。胆固醇分子由三部分组成: 极性的头部、非极性的类固醇环结构和一个非极性的碳氢尾部。胆固醇的分子较其他膜脂要小 双亲媒性也较低。胆固醇的亲水头部朝向膜的外侧疏水的尾部埋在脂双层的中央。胆固醇分子是扁平和环状的对磷脂的脂肪酸尾部的运动具有干扰作用所以胆固醇对调节膜的流动性、加强膜的稳定性有重要作用。动物细胞膜胆固醇的含量较高有的占膜脂的50%大多数植物细胞和细菌细胞质膜中没有 ...

将少量的磷脂放在水溶液中它能够自我装配成脂双层的球状结构这种结构称为脂质体，所以脂质体是人工制备的连续脂双层的球形脂质小囊。脂质体可作为生物膜的研究模型，并可作为生物大分子(DNA分子)和药物的运载体，因此脂质体是研究膜脂与膜蛋白及其生物学性质的极好材料。在构建导弹人工脂质体时不仅要将被运载的分子或药物包入脂质体的内部水相同时要在脂质体的膜上做些修饰如插入抗体便于脂质体进入机体后寻靶。 ...

又称内在蛋白(intrinsic protein)、跨膜蛋白(transmembrane protein) 部分或全部镶嵌在细胞膜中或内外两侧，以非极性氨基酸与脂双分子层的非极性疏水区相互作用而结合在质膜上。实际上整合蛋白几乎都是完全穿过脂双层的蛋白亲水部分暴露在膜的一侧或两侧表面; 疏水区同脂双分子层的疏水尾部相互作用;整合蛋白所含疏水氨基酸的成分较高。跨膜蛋白可再分为单次跨膜、多次跨膜、多亚基 ...

又称附着蛋白((protein-attached)。这种蛋白完全外露在脂双层的内外两侧主要是通过非共价健附着在脂的极性头部 或整合蛋白亲水区的一侧 间接与膜结合。外周蛋白可用高盐或碱性pH条件分离。实际上有时外周蛋白与整合蛋白是难以区分的因为许多膜蛋白是由多亚基组成的其中有的亚基插入在脂双层有些亚基则是外周蛋白。外周蛋白为水溶性 占膜蛋白总量的20%～30% 在红细胞中占50% 如红细胞的血影蛋白 ...

又称脂连接蛋白(lipid-linked protein)通过共价健的方式同脂分子结合，位于脂双层的外侧。同脂的结合有两种方式，一种是蛋白质直接结合于脂双分子层，另一种方式是蛋白并不直接同脂结合，而是通过一个糖分子间接同脂结合。通过与糖的连接被锚定在膜脂上的蛋白质主要是通过短的寡糖与包埋在脂双层外叶中的糖基磷脂酰肌醇(glycosylphophatidylionositolGPI)相连而被锚定在质 ...

1935年James Danielli和Hugh Davson所提出，又称或三明治式模型。该模型认为膜的骨架是脂肪形成的脂双层结构脂双层的内外两侧都是由一层蛋白质包被即蛋白质-脂-蛋白质的三层结构内外两层的蛋白质层都非常薄。并且蛋白层是以非折叠、完全伸展的肽链形式包在脂双层的内外两侧。1954年对该模型进行了修改：膜上有一些二维伸展的孔孔的表面也是由蛋白质包被的这样使孔具有极性可提高水对膜的通透性 ...

959年J.D.Robertson所提出。主要是根据电子显微镜的观察，发现细胞膜是类似铁轨结构(“railroad track”) 两条暗线被一条明亮的带隔开显示暗---明---暗的三层，总厚度为7.5 nm，中间层为3.5 nm，内外两层各为2 nm。并推测:暗层是蛋白质 透明层是脂并建议将这种结构称为单位膜。单位膜模型是在片层结构模型的基础上发展起来的另一个重要模型。它与片层结构模型有许多相同 ...

1972年Singer 和Nicolson 总结了当时有关膜结构模型及各种研究新技术的成就，提出了流动镶嵌模型，认为球形膜蛋白分子以各种镶嵌形式与脂双分子层相结合 有的附在内外表面 有的全部或部分嵌入膜中 有的贯穿膜的全层 这些大多是功能蛋白。流动相嵌模型有两个主要特点。其一蛋白质不是伸展的片层而是以折叠的球形镶嵌在脂双层中蛋白质与膜脂的结合程度取决于膜蛋白中氨基酸的性质。第二个特点就是膜具有一定 ...

孔蛋白是存在于细菌质膜的外膜、线粒体和叶绿体的外膜上的通道蛋白它们允许较大的分子通过其中线粒体孔蛋白可通过的最大分子为6000道尔顿而叶绿体的孔蛋白则可通过相对分子质量在10000到13000之间的物质。孔蛋白是膜整合蛋白它的膜脂结合区与其他的跨膜蛋白不同不是α螺旋而是β折叠。 ...

一种制备电子显微镜样品的方法。将组织放在液氮中快速下冷冻，然后用冰刀使样品断裂分割，通过金属复形可进行电镜观察。

研究细胞膜蛋白分布不对称的一种方法。实验中首先要分离细胞膜然后用乳过氧化物酶进行膜蛋白标记。由于过氧化物酶的分子较大而不能透过细胞膜这样可以用于标记膜外表面的蛋白包括外周蛋白和整合蛋白的外部分。标记后分离膜蛋白电泳分离和放射自显影进行鉴定。若是要标记膜内侧的蛋白则需将膜置于低离子强度的溶液中以提高膜的通透性使乳过氧化物酶进入膜泡进行内侧蛋白的标记。 ...

又称侧向迁移。在同一单层内的脂分子经常互相换位 其速度相当快 有人推测磷脂以这种方式从细胞一端扩散到另一端只需1～2秒。这种运动始终保持脂分子在质膜中的排布方向，亲水的基团朝向膜表面，疏水的尾指向膜的内部。 ...

膜的流动镶嵌模型说明生物膜是一种动态的结构 具有膜脂的流动性(fluidity)和膜蛋白的运动性(mobility)。膜的流动性主要是由膜的双脂层的状态变化引起的。在生理条件下 膜脂多呈液晶态 温度下降至某点 则变为晶态。一定温度下 晶态又可溶解再变成液晶态。这种临界温度称为相变温度 在不同温度下发生的膜脂状态的改变称为相变(phase transition)。 ...

又称为翻转(flip-flop)。它是指脂分子从脂双层的一个层面翻转至另一个层面的运动。磷脂发生翻转运动时磷脂的亲水头部基团必须克服内部疏水区的阻力这在热力学上是不利的。但是有些细胞含有翻转酶(flipase)能够促使某些磷脂从膜脂的一叶翻转到另一叶，所以这些酶在维持膜脂的不对称分布中起重要作用。 ...

自发条件下或人工诱导下 两个不同基因型的细胞或原生质体融合形成一个杂种细胞。基本过程包括细胞融合导致异核体(heterokaryon)的形成 异核体通过细胞有丝分裂导致核的融合 形成单核的杂种细胞。有性生殖时发生正常的细胞融合 即由两个配子融合成一个合子。人、鼠细胞融合实验分三步进行∶首先用荧光染料标记抗体∶将小鼠的抗体与发绿色荧光的荧光素(fluorescin)结合 人的抗体与发红色荧光的罗丹明 ...

淋巴细胞通过产生抗体对外源蛋白进行应答抗体分子位于细胞质膜上。蛋白质能够在不同的动物中诱导产生抗体，如果将小鼠的抗体注入兔子中兔子将会产生抗小鼠抗体的抗体。可以从兔子的血液中分离这种抗体并将这种抗体共价连接到荧光染料上就可以通过荧光显微镜进行观察。当兔子的抗小鼠的抗体与小鼠的淋巴细胞混合时带有标记的抗体就会同小鼠淋巴细胞质膜上的抗体结合并分布在整个淋巴细胞的表面但很快就会成块或成斑。导致这种现象的 ...

研究膜流动性的一种方法。首先用荧光物质标记膜蛋白或膜脂 然后用激光束照射细胞表面某一区域 使被照射区域的荧光淬灭变暗形成一个漂白斑。由于膜的流动性漂白斑周围的荧光物质随着膜蛋白或膜脂的流动逐渐将漂白斑覆盖，使淬灭区域的亮度逐渐增加 最后恢复到与周围的荧光光强度相等。细胞膜蛋白的标记方法有很多种。可以用非特异性的染料如异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanateFITC)将细 ...

证明膜脂流动性的一种方法。在该技术中将一个含有不配对的电子基团(通常是硝基氧基团)加到磷脂的脂肪酸尾端，这就是所谓的自旋标记(spin-label )。当将这种脂暴露于外加磁场时，由于不配对电子基团的存在，它能够自旋产生顺磁场信号，这种共振能够被仪器检测获得共振谱。如果被标记的脂位于脂双层，根据共振谱就可以判断膜脂的流动性。

这种运输主要是细胞与环境间的物质交换包括细胞对营养物质的吸收、原材料的摄取和代谢废物的排除及产物的分泌。如细胞从血液中吸收葡萄糖以及细胞质膜上的离子泵将Na 泵出、将K 泵入细胞都属于这种运输范畴。 ...