细胞技术

在上周的《自然—细胞生物学》网络版上，一篇论文指出，一种确保有足够量的细胞以补充内肠的信号也控制了另外一种类型的细胞，这种细胞是身体防御细菌感染需要的。科学家已经知道，Wnt信号控制着内脏中细胞的周转，该系统的过度反应会导致肠肿瘤。Hans Clevers和同事的新发现向以阻断Wnt信号为目标的癌症治疗方法提出了警告，因为这可能会负面地影响这些细菌防御细胞的可获得性。 Wnt信号对维持肠内未 ...

7月25日，复旦大学对外发布了一项基因研究领域里的重大成果，他们发现了破解基因“天书”的密码，这项具有“里程碑”意义的研究将在8月12日刊登在国际生物界权威杂志《细胞》的封面上。如果说人们现在为长不高而烦恼，为过早衰老的容颜而神伤，为遭受疾病折磨的老年而担忧，那么这一切都将会因为这个新的基因解读方法而有所改变。　　破解基因天书的密码被称为“PB转座因子”。复旦的科学家通过3年的研究发现，这种源于飞 ...

1975年英国科学家Milstein和Kohler所发明， 并获得1984年诺贝尔医学奖。它是将产生抗体的单个B淋巴细胞同肿瘤细胞杂交， 获得既能产生抗体， 又能无限增殖将杂种细胞，并以此生产抗体的技术。其原理是: B淋巴细胞能够产生抗体， 但在体外不能进行无限分裂; 而瘤细胞虽然可以在体外进行无限传代， 但不能产生抗体。将这两种细胞融合后得到的杂交瘤细胞具有两种亲本细胞的特性。

通过将体细胞核转移到已经去核的卵母细胞中，我们得到了好些哺乳动物的克隆，如绵羊、小鼠、牛、山羊、猪、兔、猫、骡、马和大鼠等。但这项技术在狗身上一直没有实现，因为狗的卵母细胞在体外很难诱导成熟。这里，我们有篇利用转移成体皮肤细胞核到卵母细胞（已经在体内成熟）中成功克隆两条阿富汗猎犬的报道。结合由狗基因组计划得到的详细资料，这项通过体细胞核转移得到克隆狗的技术，将有助于我们理解遗传因素和环境因子在不同 ...

在显微镜下， 用显微操作装置对细胞进行解剖手术和微量注射的技术属显微操作技术。显微操作仪是在显微镜下对细胞进行显微操作的装置，可用于细胞核移植、基因注入、染色体微切和胚胎切割等手术。

将细胞内的酶与底物相互作用， 再将酶反应的产物作为反应物质，在酶的作用部位进行捕捉，使其在显微镜下具有可见性。这种在酶作用下产生反应产物， 经捕捉反应来间接证明酶定位的反应称为酶的细胞化学反应。酶的细胞化学反应包括两个反应: 第一反应是酶作用于底物的反应， 称酶反应，形成的产物称为初级反应产物;第二反应是捕捉剂与初级反应产物的作用，称捕捉反应，产生最终反应产物：┌─────────酶的细胞化学反应 ...

植物受创伤后，在伤面新生的组织称为愈伤组织。其原因是由于受创伤的刺激后，伤面附近的生活组织恢复了分裂机能，加速增生而将伤面愈合。在植物组织培养中的愈伤组织是指植物细胞在组织培养过程中形成的无一定结构的组织团块，在适宜的条件下，愈伤组织可再分化，形成芽、根，再生成植株。

原代培养是指直接从机体取下细胞、组织和器官后立即进行培养。因此，较为严格地说是指成功传代之前的培养，此时的细胞保持原有细胞的基本性质，如果是正常细胞，仍然保留二倍体数。但实际上，通常把第一代至第十代以内的培养细胞统称为原代细胞培养。最常用的原代培养有组织块培养和分散细胞培养。组织块培养是将剪碎的组织块直接移植在培养瓶壁上，加入培养基后进行培养。分散培养则是将组织块用机械法或化学法使细胞分散。如欲从 ...

细胞工程技术是细胞生物学与遗传学的交叉领域，主要利用细胞生物学的原理和方法，结合工程学的技术手段，按照人们预先的设计，有计划地改变或创造细胞遗传性的技术。包括体外大量培养和繁殖细胞，或获得细胞产品、或利用细胞体本身。主要内容包括：细胞融合、细胞生物反应器、染色体转移、细胞器移植、基因转移、细胞及组织培养。

在冰冻断裂技术的基础上发展起来的更复杂的复型技术。如果将冰冻断裂的样品的温度稍微升高，让样品中的冰在真空中升华，而在表面上浮雕出细胞膜的超微结构。当大量的冰升华之后，对浮雕表面进行铂-碳复型，并在腐蚀性溶液中除去生物材料， 复型经重蒸水多次清洗后，置于载网上作电镜观察。

扫描隧道显微镜使用电子学的方法，用一个金属针尖在在样品表面扫描。当针尖和样品表面距离很近时(1nm以下)， 针尖和样品表面之间会产生电压。当针尖沿X和Y方向在样品表面扫描时，就会在针尖和样品表面第一层电子之间产生电子隧道。该显微镜设计的沿Z字形扫描， 可保持电流的恒定。因此，针尖的移动是隧道电流的作用，并且可以反映在荧光幕上。连续的扫描可以建立起原子级分辨率的表面像。与电子显微镜或 X线衍射技术研 ...

先将生物样品在液氮中(-196℃)进行快速冷冻，防止形成冰晶。然后将冷冻的样品迅速转移到冷冻装置中，并迅速抽成真空。在真空条件下，用冰刀横切冰冻样品，使样品内层被分开露出两个表面。如用冰刀切开细胞膜时，分开的两个面分别称为P面(protoplasmic face)和E面(exoplasmic face)，P面是靠近细胞质一面的半层膜，而E面则是靠近细胞外基质面的半层膜，可清楚地观察到镶嵌蛋白。

BD™ Cytometric Bead Array（CBA） 虽然液相蛋白定量检测的技术很多，但是大多数的技术仅能对样本进行单一指标的检测。检测多个指标时则需要提供大量的样本分批检测，操作繁琐。且各指标间差异性较大。对于样本量较少或需要对比各指标的用户，传统的技术无法满足需要。为此，著名的流式抗体公司BD-Pharmingen开发了基于流式细胞仪的液相蛋白定量技术——CBA。 BD-P ...

l、4ml肝素抗凝血于离心管中，加入2ml RPMI 1640。2、混匀后沿管壁缓慢加到预置有4ml淋巴细胞分离液的液面上静置30min。3、1500rpm，15min，吸取白细胞层（第二层）于另一离心管中。4、加RPMI 1640 5ml洗涤白细胞两次。 5、将白细胞接种至1ml RPMI 1640培养基中，加入10μl环胞霉素和100μl的EBV（EB病毒）液，混匀。6、水浴摇床，40次/分， ...

名 称来 源耐 受 药 物Ig链H LP3/X63-Ag8(X63)BALB/C骨髓瘤MOPC-218-氮鸟嘌呤r1 　KP3/X63-Ag8.653(X63-Ag8.653)P3/X63-Ag88-氮鸟嘌呤－ －P3/NSI-1-Ag4-1(NS-1)P3/X63-Ag88-氮鸟嘌呤－ K（不分泌型）P3/X63-Ag8.Ul(P3Ul)（X63×BALB/C脾细胞）杂交瘤8-氮鸟嘌呤－ －SP ...

1、取材：材料主要来源于外科手术或活检瘤组织，取材时避免用坏死组织，要挑选瘤细胞集中和活力较好的部位，瘤性转移淋巴结或胸腹水是较好的培养材料。取材后尽快培养，因故不能立即培养者，可冻存。其培养方法及冻存方法同前述正常组织。2、成纤维细胞排除：在肿瘤组织中常混杂有一些成纤维细胞，培养时能与瘤细胞同时生长，并常压过癌细胞，导致癌细胞生长受阻以至消失，应仔细排除。排除方法常有：机械刮除法、反复贴壁法、消 ...

(一)原理 体外培养的原代细胞或细胞株要在体外持续地培养就必须传代，以便获得稳定的细胞株或得到大量的同种细胞，并维持细胞种的延续。培养的细胞形成单层汇合以后，由于密度过大生存空间不足而引起营养枯竭，将培养的细胞分散，从容器中取出，以1:2或l:3以上的比率转移到另外的容器中进行培养，即为传代培养。 细胞“一代”指从细胞接种到分离再培养的一段期间，与细胞世代或倍增不同。在一代中，细胞培增 ...

(一)原理 细胞培养(Cell culture)是模拟机体内生理条件，将细胞从机体中取出，在人工条件下使其生存、生长、繁殖和传代，进行细胞生命过程、细胞癌变、细胞工程等问题的研究。近年来，广泛地应用于分子生物学、遗传学、免疫学、肿瘤学、细胞工程等领域，发展成一种重要生物技术，并取得显著成就。由体内直接取出组织或细胞进行培养叫原代培养。原代培养细胞离体时间短，性状与体内相似，适用于研究。一般说来 ...

o 应如何避免细胞污染？细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和支原体。 主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。 严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之最好方法。o 如果细胞发生微生物污染时， 应如何处理？直接灭菌后丢弃之。o 支原体 (mycoplasma) 污染的细胞， 是否能以肉眼观察出异状？不能。 除极有经验 ...

　　线粒体在细胞凋亡的过程中起着枢纽作用，多种细胞凋亡刺激因子均可诱导不同的细胞发生凋亡，而线粒体跨膜电位的下降，被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件，它发生在细胞核凋亡特征（染色质浓缩、DNA断裂）出现之前，一旦线粒体DYmt崩溃，则细胞凋亡不可逆转。　　线粒体跨膜电位的存在，使一些亲脂性阳离子荧光染料如Rhodamine 123、3，3-Dihexyloxacarbocyanine i ...