Polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) is a quick and sensitive method for analyzing the composition of mixtures of proteins. Since the early 1970s, this method has become a routine and frequently used analytical procedure in all protein chemistry laboratories, and as such, biology ...
The technique of in vitro protein synthesis involves the translation of messenger RNA (mRNA) in a cell-free extract to yield polypeptide products. Both prokaryotic and eukaryotic systems have been developed, but for this experiment only a eukaryotic system will be considered. In 1973, Rob ...
Living cells contain two forms of nucleic acid-deoxyribonucleic acid (DNA) and ribonucleic acid (RNA). It has been known for a number of years that RNA molecules are involved in the expression of the genetic material (DNA) and are, in fact, the initial products of gene expression that go on to direct pro ...
The general features of isopycnic centrifugation of DNA and the separation of main-band from satellite DNAs in solutions of cesium chloride are discussed in the preceeding chapter. This chapter describes a modification of the procedure that enhances the separation of specific DNA sequ ...
In order to study the organization and properties of DNA, it is necessary to extract it from cells and purify it from the proteins with which it is usually associated. Cells of plants and animals contain from 1 to 100 pg of DNA per nucleus. This does not sound like a lot until one realizes that is represents 100–10,0 ...
The exercise in this chapter is designed for students in the early years of an undergraduate course who have just been introduced to the basic concepts of genetic engineering in theory and would like to supplement their knowledge with practical experience. Many DNA manipulations, however, m ...
养了很久的细胞，有一些经验和体会总结一下，和大家分享一下。关于如何把细胞养的形态很好更漂亮。1.不同的细胞，喜欢的环境是不一样的。这个不仅仅是说培养基的不同，还有就是细胞生长的空间密度问题。有一些细胞是数量多一点比较好生长，生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以 ...
转自丁香园铁杆站友hjdd原创。养了很久的细胞，有一些经验和体会总结一下，和大家分享一下。关于如何把细胞养的形态很好更漂亮。1. 不同的细胞，喜欢的环境是不一样的。这个不仅仅是说培养基的不同，还有就是细胞生长的空间密度问题。有一些细胞是数量多一点比较好生长，生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长 ...
相关专题 Nature methods发布2013最受关注技术成果：单细胞测序 2013年已走到尽头。Nature Methods回首这一年，最受关注影响最广泛的技术成果是：单细胞测序(single-Cell sequencing)。 相关文章发表于2013年12月30日的《Nature Methods》杂志上。 在题为“Method of the Year 2013”的重要评论文章中，作者指出每个细胞都是独一无二的，它占据着特定的空间位置，在它的复制基因组中 ...
什么是自噬？ 细胞自噬(autophagy or autophagocytosis)：又称为Ⅱ型细胞死亡，是细胞在自噬相关基因(autophagyrelated gene，Atg)的调控下利用溶酶体降解自身受损的细胞器和大分子物质的过程。 比利时科学家Christian de Duve在上世纪50年代经过电镜察看到自噬体（autophagosome）构造，并且在196 ...
肿瘤异质性是恶性肿瘤的特征之一，指的是肿瘤在生长过程中，经多次分裂增殖，子细胞呈现出分子生物学或基因方面的改变，从而使肿瘤的生长速度、侵袭能力、对药物的敏感性、预后等各方面产生差异。简言之同一肿瘤中可以存在很多不同的基因型或者亚型的细胞。因此同一种肿瘤在不同的个体身上可表现出不一样的治疗效果及预后，甚至同一个体身上的肿瘤细胞也存在不同的特性和差异。 近期，来自加州大学欧文分校、生物 ...
演讲内容： 细胞培养耗材表面的选择 主讲人： 周智优——赛默飞NUNC & nalgene 细胞培养产品支持 主讲人简介： 毕业于暨南大学遗传学专业，获得理学硕士学位。期间主要研究内容为sFGFR2c胞外段对肺纤维化的抑制作用，研究成果发表在Molecular medicine。2011年7月加入赛默飞公司 担任细胞培养耗材产品支持至今。 PPT ...
相关专题 斯隆 - 凯特林癌症研究所研发一种新技术，可以将iPSC(诱导多功能干细胞)转化成为老化的神经细胞。这一技术可以用来建立帕金森症模型。相关文章发表于2013年12月05日的《Cell Stem Cell》杂志上。 Cell子刊：科学家新研发一种技术快速将iPSC转化成为老化神经细胞 早老蛋白progerin是早老症中的关键蛋白， ...
由于现在国内的细胞库资料不是很充足，而且比较零散，包括建株时的技术层面不一，没有比较严格统一的操作规范，所以在遇到比较重要的实验项目时，一般都比较倾向于购买国外的细胞株，但购买国外细胞株需要考虑的因素有如下几点： 1、细胞株的生物等级，由于有些细胞株及菌株属于管制品，所以从国外购货比较麻烦。 2、在购买国外细胞株时，需交待国外加比较多的干冰(一般在13公斤以上，采用比 ...
2013年诺贝尔奖揭晓，美国、德国3位科学家James E. Rothman Randy W. Schekman和Thomas C. Südhof因 "发现细胞内的主要运输系统--囊泡运输的调节机制"，荣获2013年诺贝尔生理学或医学奖。这一奖项的授予，无疑将囊泡的研究推向了新的高潮。 Exosome来源于晚期核内体(也称为多囊泡体)的囊泡，是由活 ...
一、 细胞培养基的概念和原理 细胞培养基是人工模拟细胞在体内生长的营养环境，是提供细胞营养和促进细胞生长增殖的物质基础。培养液或培养基的含义几乎相同，英文都是medium。当它是粉剂时，倾向性地称为培养基，而将粉剂配成液体后，多称为培养液。培养液中常常补加血清、抗生素等成分。培养基主要包括天然细胞培养基、合成细胞培养基和无血清细胞培养基等。 天然细胞培养基是人们早期采用的细胞培养基 ...
演讲内容 细胞培养关键技术 1. 细胞培养类型与培养基选择，培养基关键成分和条件确定； 2. 细胞培养表面对于细胞培养的支持； 3. 外环境对于细胞培养的影响（温度/CO2浓度）和污染控制； 4. 细胞培养技术发展。 主讲人 赛默飞培养箱产品经理 陈钺 博士 主讲人简介 陈钺博士，赛默飞培养箱产品经理，毕业于清华大学生物系，获得生物学博士学位。 ...
高通量细胞筛选技术(high2throughput cell-based screening technology) 是以高通量方式研究基因功能最有效的方法之一。通常基因功能的初步筛选在96 孔或384 孔板上进行通过基因转染将候选基因导入细胞或直接将基因表达产物加入细胞培养液中。筛选测定方法基于要研究的生物学或医学问题例如要研究抗血管生成活性选用内皮细胞进行细胞生长、分化、迁移和粘附等分析测定; ...
基因疫苗指的是DNA疫苗，即将编码外源性抗原的基因插入到含真核表达系统的质粒上，然后将质粒直接导入人或动物体内，让其在宿主细胞中表达抗原蛋白，诱导机体产生免疫应答。抗原基因在一定时限内的持续表达，不断刺激机体免疫系统，使之达到防病的目的。
PCR反应条件为温度、时间和循环次数。 温度与时间的设置： 基于PCR原理三步骤而设置变性-退火-延伸三个温度点。在标准反应中采用三温度点法，双链DNA在90～95℃变性，再迅速冷却至40 ～60℃，引物退火并结合到靶序列上，然后快速升温至70～75℃，在Taq DNA 聚合酶的作用下，使引物链沿模板延伸。对于较短靶基因(长度为100～300bp时)可采用二温度点法， 除变性温度外、退火与延伸温 ...
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