生物化学技术

Contributor: Suprya JayadevDate: May 25 1993 Reagents: Lysis buffer25 mM Tris-HCl pH 7.45 mM EDTA1 mM ATP20 µg/ml CLAP1 mM PMSF Buffer A10 mM MgCl20.2 M Tris-HCl pH 7.40.2 % Triton X-100 Buffer ...

Contributor: Suprya JayadevDate: Oct. 20 1994 Reagents:2N methanolic NaOH 2N HCl-------------------------------------------------------------------------------- Protocol: Bligh & Dyer extraction 1 ...

OBJECTIVE: Method for incorporating proteins into liposomes for liposome swelling assay or as an alternative antigen presentation method. REAGENTS: Dioleoyl Phosphatidyl Choline Buffer of choice / dis ...

1) Prepare a C-18 reverse phase prep-sep cartridge by washing with: a) 10 ml of methanol b) 20 ml of chloroform-methanol (2:1) c) 10 ml of methanol d) 10 ml of methanol-1.6 M sodium acetate (1:1) 2) A ...

胆固醇是环戊烷多氢菲的衍生物，它不仅参与血浆蛋白的组成，而且也是细胞的必要结构成分，还可以转化成胆汁酸盐、肾上腺皮质激素和维生素D等。胆固醇在体内以游离胆固醇及胆固醇酯两种形式存在，统称总胆固醇。总胆固醇的测定有化学比色法和酶学方法两类。本实验采用前一方法。 胆固醇及其酯在硫酸作用下与邻苯二甲醛产生紫红色物质，此物质在550nm波长处有最大吸收，可用比色法作总胆固醇的定量测定。胆固醇含量在400m ...

一、目的 脂肪广泛存在于许多植物的种子和果实中，测定脂肪的含量，可以作为鉴别其品质优劣的一个指标。脂肪含量的测定有很多方法，如抽提法、酸水解法、比重法、折射法、电测和核磁共振法等。目前国内外普遍采用抽提法，其中索氏抽提法（Soxhlet extractor method）是公认的经典方法，也是我国粮油分折首选的标准方法。通过本实验的学习掌握索氏抽提法测定粗脂肪含量的原理和操作方法。 二、原&nbs ...

脂类测定标准化十分重要。心脑血管病的临床和流行病学研究，高脂血症的诊断或治疗过程中血脂变化的监测，以及冠心病危险性的估计都需要准确、精密和实验间可比的测定结果。 一、国外标准化工作的回顾和现状 早在1958年，美国疾病控制与预防中心(CDC)即提出脂类［胆固醇(chol)和甘油三酯(TG)］测定的标准化计划，并和世界卫生组织(WHO)合作，对美国和国际实验室进行脂类测定的质量评价。当时有800多 ...

脂蛋白和脂质测定方法学评价血浆脂蛋白和脂质测定是临床生化检验的常规测定项目，其临床意义主要是：早期发现与诊断高脂蛋白血症；协助诊断动脉粥样硬化症；评价动脉粥样硬化疾患如冠心病和脑梗塞等危险度；监测评价饮食与药物治疗效果。 一、血浆脂蛋白测定 1、超速离心分离纯化法超速离心法是根据血浆中各种脂蛋白的比重（密度）的差异，在强大离心力作用下进行分离纯化的一种方法。血浆在不同密度盐溶液中经过超速离心，各种 ...

脂蛋白和脂质测定方法学评价血浆脂蛋白和脂质测定是临床生化检验的常规测定项目，其临床意义主要是：早期发现与诊断高脂蛋白血症；协助诊断动脉粥样硬化症；评价动脉粥样硬化疾患如冠心病和脑梗塞等危险度；监测评价饮食与药物治疗效果。 详细内容请下载： ...

REFERENCES: Nikaido and Roseenberg (1983) J.Bact 153: 241-252; Yoshimura et al. (1983) J.Bact 258: 2308-2314. METHOD: 1、6.2 ?moles of lipid (ideally egg phophatidylcholine or dipalmitoyl phosphorylcho ...

Preparation of chambers: Immediately after use rinse with distilled water a couple of times and then with 70% or 100% ethanol (can repeat this rinsing) then invert the cells and let them air-dried. Th ...

食品中的脂类主要包括脂肪（甘油三酯）和一些类脂质，如脂肪酸、脂、糖脂和固醇类k食物中的脂类 95％是甘油三酯，5％是其他脂类。人体贮存的脂类中，甘油三酯高达 99％。脂类的共同特点是具有脂溶性，不仅易溶解于有机溶剂，还可溶解其他脂溶性物质如脂溶性维生素等。人类膳食脂肪主要来源于动物的脂肪组织和肉类以及植物的种子。动物脂肪相对饱和脂肪酸和单个不饱和脂肪酸多，而多不饱和脂肪酸含量较少。植物油主要不饱和 ...

脂肪和类脂（磷脂、糖脂、固醇脂等）统称为脂类。它是构成人体组织的正常成分，不溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶剂中。在化学组成上，脂类属于脂肪酸的酯或与这些酯有关的物质。脂类的主要功能是氧化供能。 脂肪主要存积于脂肪组织中，并以油滴状的微粒存在脂肪细胞浆内。 在病理检验中，脂类染色法最常用以证明脂肪变性，脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。脂类染色使用最广泛的染料是苏丹染料，最常用的有苏丹Ⅲ，苏丹Ⅳ，苏 ...

一、脂类概述 脂类物质在人体中占有相当大的部分，通常它们在人体内以两种形式存在，第一种为脂肪，主要为中性脂肪，储存的部位如皮下，大网膜，肌间肾周围组织等部位，另外一种为结构脂肪，如磷脂，胆固醇等它们与蛋白，糖类结合在一起存在于细胞内，构成细胞的组成成分。 1、单纯脂质：由脂肪酸各醇化合的酯，如中性脂肪，油及蜡等，苏丹染料可染为黑色或红色。 2、复合物质，脂肪酸的酯经水解后生成醇类，脂肪酸，磷酸和含 ...

问：小试的时候用预装柱摸索好的纯化方法：缓冲液（1）：上样平衡缓冲液，PBS+0.8M 硫酸铵缓冲液（2）：清洗杂蛋白缓冲液，PBS+0.3M 硫酸铵缓冲液（3）：Tris-HCl pH9.0 0.1Mphenyl FF（high sub）疏水柱，收率与蛋白质性质都可以达到要求。在放大时候，就发现用Tris-HCl pH9.0 0.1M洗脱不下来我的目的蛋白，然后我改成用水洗脱，可以洗脱下我的蛋白 ...

问：目前我正在做正丁醇部位的分离，好难啊现在接了许多流份，在合并一些流份之后，发现有些上面漂了一层白色的物质，有点像蜡状，问了下同学说是可能是油脂类的东西，但是我觉得正丁醇部位的东西怎么会含有这类东西呢？有谁见过类似的情况啊？帮忙分析下，谢谢诸位了！另有一个问题，我想请教一下，得到的样品不纯，有哪些纯化方法呀？ 答：萃取不完全有可能出现少量的油脂。你提到流份，那就不是油脂，我也碰到过，应该是样品 ...

问：我要检测ER的膜蛋白，从心脏组织中提取，采用了超速离心的方法，具体就是首先组织匀浆，20000G离心15分钟，取上清，再100000G离心，得到的沉淀应该是还有ER的，但是我试了不同的buffer去重悬，效果都不是很好，甚至2X的电泳buffer(含有1%SDS)都无法使得沉淀充分的溶解，可以看到有一块状的，几乎不可溶解，我开始是觉得离心力太大部好溶解了。后来换了一种方法，组织匀浆之后， 65 ...

问：最近萃取的脂类用正己烷定容好后放冰箱（ependorff管中），结果溶剂都挥发掉了，请问大家我再次用溶剂溶解一下，里面的脂类含量会改变吗？ 答：朋友你指的是浓度改变吧？也就是质量发生变化。我配过的溶液放冰箱都会发生改变，时间越长变化越大！你要是指多种成分的百分比发生改变那就用你挥发光的样重新定容，用封口膜封口，测下它的稳定性！呵呵要是稳定就恭喜你拉，萃取完不用浓缩就自己挥发，呵呵工艺不错，就是 ...

一、实验目的 脂肪广泛存在于油料植物种子和果实中，测定脂肪的含量，可以鉴别其品质的优劣，也是油料作物选种和种质资源调查的常规测定项目。 二、实验原理 在了解了实验目的之后，关于这个实验有以下几个问题需要大家思考： 1、种子成分很复杂，脂肪的提取如何进行？ 2、什么是粗脂肪？ （答：脂肪不溶于水，易溶于有机溶剂（如石油醚）。利用这一特性，选用有机溶剂直接浸提出样品中的脂肪进行测定。提取物 ...

以米糠油的提取为例，米糠油富含甾醇牗磷脂牘，具有较高的营养价值。通过超临界CO2萃取，从米糠中可以提取油脂和磷脂，降低游离脂肪酸的含量，得到色泽清淡的油脂产品。 方法：将5克米糠放入分提器中，超临界CO2的压力通过限流器控制在7000～9000psi，温度为70℃～100℃，调节其温度和压力使超临界CO2通入分提器，反应时间为90min，反应结束时，提取出的米糠油及磷脂通入收集器，回收超临界CO ...