生物化学技术

本文介绍了紫外分光光度法测定核酸含量的原理和操作方法。

量子点具有传统荧光染料和镧系配合物无法比拟的荧光特性：宽的激发光谱、窄的发射光谱、更长的寿命等。本文概述了量子点的光学特性和制备方法，并着重介绍了其作为荧光标记物在生物学中的应用。

纳米技术的一个重要目标是复杂、三维纳米结构的可编程自我组装。以DNA为构造单元，合成方法已经发展到了可生成二维设计机构和某些三维结构的阶段。Douglas等人介绍了对脚手架式DNA折纸方法的一种优化，新方法能够生成有或多或少的任何所期望形式的三维目标，尺度达到10到100纳米，并且对各种不同的DNA螺旋之位置的控制也达到了令人印象深刻的程度。这种合成方法涉及排列成褶皱链及组装成蜂巢状三维结构的DNA螺旋。各种不同的DNA链通过磷酸基团连接在一起。这种方法能够生成组装速度慢的复杂目标，但它也为组装具有纳米尺度特征的定制器件提供了一个途径，如研究人员已经用这种方法构建出了形状像方螺帽、十字槽和线框二十面体的目标。

在分析工作中，洗涤玻璃仪器不仅是一项必须做的实验前的准备工作，也是一项技术性的工作。仪器洗涤是否符合要求，对检验结果的准确和精密度均有影响。不同的分析工作有不同的仪器洗净要求，我们以一般定量化学分析为主介绍仪器的洗涤方法。

30%丙烯酰胺溶液：将29g丙烯酰胺和1g NN'-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的水中。加热至37℃溶解之，补加水至终体积为100ml.用滤器（0.45μm孔径）过滤除菌，查证该溶液的pH值应不大于7.0置棕色瓶中保存于室温。丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收，其作用具累积性。称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面 ...

过氧化氢酶属于血红蛋白酶，含有铁，它能催化过氧化氢分解为水和分子氧，在此过程中起传递电子的作用，过氧化氢则既是氧化剂又是还原剂。

糖在浓硫酸作用下，可经脱水反应生成糠醛或羟甲基糠醛，生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物，在一定范围内，颜色的深浅与糖的含量成正比，故可用于糖的定量测定。该法的特点是几乎可以测定所有的碳水化合物，不但可以测定戊糖与己糖，而且可以测所有寡糖类和多糖，共中包括淀粉、纤维素等（因为反应液中的浓硫酸可以把多糖水解成单糖而发生反应），所以用蒽酮法测出的碳水化合物含量，实际上是溶液中全部可溶性碳水化合物总量，在没有必要细致划分各种碳水化合物的情况下，用蒽酮法可以一次测出总量，省去许多麻烦，因此，有特殊的应用价值。但在测定水溶性碳水化合物时，因与蒽酮试剂发生反应而增加了测定误差。此外，不同的糖类与蒽酮试剂的显色深度不同，果糖显色最深，葡萄糖次之，半乳糖、甘露糖较浅，五碳糖显色更浅，故测定糖的混合物时，常因不同糖类的比例不同造成误差，但测定单一糖类时，则可避免此种误差。

淀粉一般都是直链淀粉和支链淀粉的混合物。直链淀粉和支链淀粉含量和比例因植物种类而不同，决定着谷物种子的出饭率和食味品质，并影响着谷物的贮藏加工。通过本实验学习掌握双波长测定谷物中直链淀粉和支链淀粉的含量。

非蛋白质氮的测定

问：本人想合成一端核苷酸，我需要很大的量，但我不知到是不是公司给我合成后，拿回来我自己再扩增，还是公司直接合成我所需要的量？ 答：首先的是要明确你合成这段核苷酸的用途。如果是单链引物，用2OD也即是公司合成的量就足够了。是双链则另当别论。 ...

问：寡核苷酸合成有什么原则吗？根据MRNA上的碱基序列，合成的反义寡核苷酸是否每个碱基都要和mRNA严格对应？比如下面的例子(中华系列杂志上一篇文章发表的)：根据下面序列 5 ATG CTG CTG CGC TCG AAG CC 3其合成的寡核苷酸如下：AS-ODN 5'- GGC TTC GAG CGC AGC AGC AT-3' NS-ODN 5'- TCA GCT AGC GAG GCT G ...

问：合成小肽时活化羧基是用活化酯法好还是酰卤法好呢想？ 答：楼上的兄弟是做液相合成的吧？一般活化脂用的是DIC，DCC，类的东西哦，但是它门容易形成沉淀，让后处理不容易分离，很麻烦，一般用酰卤的方法比较好，再说你是做的小肽，肽的序列3-10个都好用的。希望你实验顺利！ ...

问：我要合成四段长约10aa的肽来做免疫动物(兔子)，获得抗体(多抗)，想问一下在多少纯度合适？多少合成量合适？不胜感激！ 答：合成越长越好，纯度越高越好，量越大越好。不过太长了不容易合成，纯度更难以掌握。容易操作应该是指肽合成量大后，使用起来更宽裕一些，不至于太紧张。类似帖子以前也有，搜索一下吧。 答：合成长约10aa的肽有点短了，建议合成15aa的肽。纯度90%以上足可以了。合成多少量，取决于 ...

问：想合成一个12肽和22肽作为检测抗原检测猪血清中的抗体。考虑到不好直接包被，欲与载体偶联。请教用什么载体合适？合成肽是否需要加特殊氨基？ 答：12肽和22肽未必很难包被到板子上，你可以先尝试一下直接包被，检测一下。我们试过很多更小得肽，6肽，能够直接包被到板子上做实验得比例还是很大的。另外多肽得包被除了跟你多肽得大小有关系以外，还和你多肽得亲水性和暴露情况有一定得联系。如果确实包被不上，建议 ...

问：我手上有一15氨基酸的合成肽，要和BSA耦联，用于制备抗体，想用戊二醛法或用EDC/DCC法，但是我这合成肽中间的9个氨基酸是抗原表位，并且有含羧基的Asp和含氨基地Lys，用戊二醛法或用EDC/DCC法和BSA耦联会不会影响抗原性？还有没有更好的方法？希望各位赐教。 答：会影响。戊二醛法或用EDC/DCC法利用的是氨基酸残基的羧和氨基，尤其是赖氨酸的氨基。你的15氨基酸的合成肽内有巯基吗？如 ...

问：我现在合成一个小肽！有谁知道哪儿能查到比较系统的资料吗？或有谁知道应看那些书啊！我不只应怎样确定量的多少，还有具体用那种方法最好！ 多长的肽？ 准备用Fmoc？设备准备的如何？ 答：书的话，可以看看这本，Fmoc固相合成介绍的非常系统：Fmoc Solid Phase Peptide Synthesis ...

利用寡核苷酸自动合成仪，可很简单地合成制备寡核苷酸探针（如15～50bp），类探针具有以下优点：①短的探针比长探针杂交速度快，特异性强。②可以在短时间内大量制备。③在合成中进行标记制成探针。④可合成单链探针，避免了用双链DNA探针在杂交中自我复性，提高杂交效率。⑤寡核苷酸探针可以检测小DNA片段，在严格的杂交条件下，可用于检测在序列中单碱基对的错配。 因此，寡核苷酸探针的研究，对于提高核酸杂交技术 ...

问：哪位知道根据32P 结合至合成肽的量计算AM PK 活力的具体步骤啊？我做的是骨骼肌，知道需要多少含量的骨骼肌，麻烦把详细的步骤告知，谢谢。 答：AMPK是一个蛋白激酶（protein kinase）吗？合成肽就是这个激酶的底物吧？如果是这样的话，您可以参看PKC激酶的测定protocol，很多公司比如sigma都有。（请参看附件，上面有详细的介绍和计算公式）。至于操作过程，简单的说，就是在 ...

黄惟庆、陈常德85版多肽合成，中国第一本多肽合成的专著。请下载： ...

倘若要将两种模拟肽段A和B（两者的氨基酸序列已知且已制备成功）合成一种新的嵌合肽，其多肽合成策略是否应该选用“固相合成法”中的以下策略：在固相载体上进行片段组合，即把一个个纯制过的保护多肽片段按次序接到固定在载体上的一个多肽片段上，从而得到需要的多肽。 也有文献提示，只需把A和B共轭联合在一起便可以到嵌合肽C（因为嵌合肽C仅仅是A和B的单纯连接，而并不改变A和B的序列）.倘 ...