生物化学技术

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相关专题 一、实验目的1.熟悉溶菌酶的功能、分布以及作用特性。2.掌握溶菌酶的提取及活力测定方法。二、实验原理溶菌酶又称胞壁质酶或N-乙酰胞壁质聚糖水解酶，是一种碱性糖苷水解酶，能作用于细菌细胞壁的粘多糖，具有杀菌等作用，广泛应用于医学临床。溶菌酶存在于植物浆及动物(蛋清、血浆、淋巴液和鼻粘膜等处)组织中，其中鸡蛋清中含量较为丰富，且鸡蛋清取 ...

相关专题 一、目的：谷物是人类特别是发展中国家人民的主要蛋白质来源，谷物中蛋白质含量是衡量其品质和营养价值的最重要的指标。培育高蛋白谷物品种，是广大育种工作者的奋斗目标。对现有谷物进行评价、利用，对大批原始材料（种质资源）及育成品系进行品质筛选，都需要测定种子蛋白质含量。测定种子蛋白质含量的方法很多，一般可分为间接方法和直接方法两大类。凯氏定 ...

相关专题 一、目的酶是生物细胞产生的以蛋白质为主要成分的生物催化剂。酶催化生物体内各种化学反应有条不紊的高效进行。酶促反应动力学研究各种因素对反应速度的影响，包括底物浓度、酶浓度、抑制剂的种类和浓度、pH 和温度等。最基本的动力学关系是底物浓度对酶促反应速度的影响。在无抑制剂的最简情况下，米一曼方程正确地描述了这种动力学关系：反应速度v 和底 ...

相关专题 一、目的蛋白质分子有单链、双链和寡聚蛋白等组成形式，组成蛋白质分子的单条肽链又称亚基。通过对天然蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳和变性蛋白的SDS 一聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱的比较，可以研究种子蛋白质分子组成和结构。另外，SDS 一聚丙烯酰胺凝胶电泳是测定亚基分子质量的好方法。通过本实验，学习SDS 一聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理、技术和实际应用 ...

相关专题 一、目的氨基酸是蛋白质的基本结构单位。构成蛋白质的氨基酸共20 种，其中Lys、Phe、Trp 、val、Leu、Ile、The、Met 等8 种是人体的必需氨基酸，必需由蛋白类食物供给。不同食品的蛋白质含量不同，氨基酸组成也有差异，其必需氨基酸的含量是否平衡，对营养品质有很大影响。氨基酸组成分析又是蛋白质顺序分析的重要组成部分，因 ...

相关专题 一、实验目的 脂肪广泛存在于油料植物种子和果实中，测定脂肪的含量，可以鉴别其品质的优劣，也是油料作物选种和种质资源调查的常规测定项目。 二、实验原理 在了解了实验目的之后，关于这个实验有以下几个问题需要大家思考： 1.种子成分很复杂，脂肪的提取如何进行？ 2.什么是粗脂肪？ （答：脂肪不溶于水，易溶于有机溶剂（如石油醚）。利用这一特 ...

相关专题 一、目的学习和掌握35-二硝基水杨酸（DNS）法测定纤维素酶活力的原理和方法，了解纤维素酶的作用特性。二、原理纤维素酶是一种多组分酶，包括C1 酶、CX 酶和¦Â-葡萄糖苷酶三种主要组分。其中C1酶的作用是将天然纤维素水解成无定形纤维素，CX 酶的作用是将无定形纤维素继续水解成纤维寡糖，¦Â-葡萄糖苷酶的作用是将纤维寡糖水解成葡萄糖 ...

相关专题 一、目的掌握醋酸纤维素薄膜电泳法分离带电颗粒原理；观察核苷酸类物质的紫外吸收现象。二、原理带电粒子在电场中向着与其自身带相反电荷的电极移动的现象，称为电泳。控制电泳条件（如pH 等），使混合试样中的不同组分带有不同的净电荷，各组分在电场中移动的速度或方向各不相同，从而达到分离各组分的目的，这就是电泳分析法。以醋酸纤维素薄膜作支持物进 ...

相关专题 一、目的同工酶是指能催化同一种化学反应，但其酶蛋白本身的分子结构组成却有所不同的一组酶。研究表明，植物在发育过程中，所含同工酶的种类和比例都不相同，它们与植物的遗传、生长发育、代谢调节及抗性等都有一定关系，因此作为基因表达的产物，测定同工酶谱是认识基因存在和表达的一种工具，在植物的种群、发育及杂交遗传的研究中有重要的意义。过氧化物酶 ...

相关专题 梯度凝胶电泳也通常采用聚丙烯酰胺凝胶，但不是在单一浓度（孔径）的凝胶上进行，而是形成梯度凝胶。从凝胶顶部到底部丙烯酰胺的浓度呈梯度变化，如通常顶部凝胶浓度为5％，底部凝胶浓度为25％。凝胶梯度是通过梯度混合器形成的，高浓度的丙烯酰胺溶液首先加入到玻璃平板中，而后溶液浓度呈梯度下降，因此在凝胶的顶部孔径较大，而在凝胶的底部孔径较小。梯 ...

相关专题 原理 同普通电泳。普通电泳的电压一般为2V/cm~20V/cm，电泳时间需1小时至数小时。电泳时间越长，扩散越严重。对于一些小分子的物质如核苷酸、氨基酸、多肽等，在常压电泳中，往往达不到分离的目的。高压电泳则能使分子量相近的物质充分地进行分离。在高压电泳中，电压可达到50V/cm～200V/cm，高压电源达1 500V～1 0000 ...

相关专题 原理 转移电泳是将经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离出的蛋白质谱直接转移到硝酸纤维膜上，而形成固定相，并同时排除各种干扰物质，保持其天然构象和生物学活性，完成在凝胶中难以进行的各种生物试验。 材料 1．琼脂糖 2．丙烯酰胺 3．甲叉双丙烯酰胺 4．十二烷基磺酸钠（SDS） 5．硝酸纤维膜滤纸 孔径0.45μm 6．琼脂糖凝胶电泳缓冲液 0.8 ...

相关专题 二维聚丙烯酰胺凝胶电泳技术结合了等电聚焦技术（根据蛋白质等电点进行分离）以及SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳技术（根据蛋白质的大小进行分离）。这两项技术结合形成的二维电泳是分离分析蛋白质最有效的一种电泳手段。 通常第一维电泳是等电聚焦，在细管中（φ1～3 mm）中加入含有两性电解质、8M的脲以及非离子型去污剂的聚丙烯酰胺凝胶进行等电聚焦， ...

相关专题 原理 圆盘电泳即聚丙烯酰胺凝胶电泳。它是利用丙烯酰胺和双丙烯酰胺在催化剂的作用下聚合成大分子的凝胶物。它同时兼有分子筛和电泳效应。当样品通过凝胶进行电泳时，便可以根据其样品中各分子的电荷和分子量的不同而泳动出不同的区带。由于聚丙烯酰胺凝胶化学性质较琼脂稳定，很少带有侧基，在电泳过程中，吸附作用与电渗作用均小，所以该技术的分辨率均高于 ...

相关专题 醋酸纤维膜电泳是一项简便而又迅速的方法。它的优点是：①电泳区带分离清楚，比琼脂平板电泳分辨率高；②可以定量；③样品用量少，只需要几微升即可。 （一）材料与试剂 1．pH8.6离子强度0.05巴比妥缓冲液 2．0.5％氨基黑染色液 3．透明液： 冰醋酸 3 份 95％乙醇 ...

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