蛋白质技术

electrophoresis of DNA Agarose Gel Electroporesis of DNA Making the gel:1. Place casting platform with well former sideways in gel stand where you wish to pour the gel (preferably in the 4'C cold ...

Alkaline agarose gel electrophoresis (Sambrook et al. 1989)Alkaline agarose gels can be used to determine the size and quality of first and second strand cDNA synthesis by reverse transciptase. You wi ...

1. Migration of marker dyes in native polyacrylamide non-denaturing gels Gel % Bromophenol blue (BP) Xylene cyanole (XC) 3.5 100 460 5.0 65 260 8.0 45 160 12.0 20 70 20. ...

1. Migration of marker dyes in native polyacrylamide non-denaturing gels Gel % Bromophenol blue (BP) Xylene cyanole (XC) 3.5 100 460 5.0 65 260 8.0 45 160 12.0 20 70 20. ...

Electrophoresis of PCR products with Life Technologies Sunrise gel apparatus Gel: In a 500 ml Pyrex® glass bottle add:Agarose: 3 gH2O270 mls10X TA30 mls Screw cap partially on. Microwave at high power ...

Standard neutral agarose electrophoresisStandard agarose gels can be prepared using either TBE or TAE running buffers. You will need: Either 10 x TBE or 10 x TAE buffers1 x TBE buffer - 89mM Tris 89mM ...

Did you know:When preparing agarose for electrophoresis it is best to sprinkle the agarose into room-temperature buffer swirl and let sit at least 1 min before microwaving. This allows the agarose to ...

If you see faint or no bands on the gel:There was insufficient quantity or concentration of DNA loaded on the gel. Increase the amount of DNA but don't exceed 50 ng/band.The DNA was degraded. Avoid n ...

10 Fun Facts for DNA Electrophoresis::Migration of DNA is retarded and band distortion can occur when too much buffer covers the gel. The slower migration results from a reduced voltage gradient acros ...

10 Fun Facts for DNA Electrophoresis::Migration of DNA is retarded and band distortion can occur when too much buffer covers the gel. The slower migration results from a reduced voltage gradient acros ...

胶回收一. 提高胶回收量的办法：1) 增加电泳时的上样量。2) 电泳缓冲液用新鲜配制的。3) 切胶时尽量只切有条带的胶，减小切胶体积：含目的片断很少的胶就不要要了，不然影响回收率。4) 把切的两块或多块胶融化后，无论多大的体积都用一个管子，转移到同一个柱子上。5) 溶胶时所加的溶液可多一点，这样更有利于DNA与膜的结合，不过一般不要多余750ul。6) 胶回收的关键是通过柱子的溶液的盐浓度、酸碱性 ...

胶回收一. 提高胶回收量的办法：1) 增加电泳时的上样量。2) 电泳缓冲液用新鲜配制的。3) 切胶时尽量只切有条带的胶，减小切胶体积：含目的片断很少的胶就不要要了，不然影响回收率。4) 把切的两块或多块胶融化后，无论多大的体积都用一个管子，转移到同一个柱子上。5) 溶胶时所加的溶液可多一点，这样更有利于DNA与膜的结合，不过一般不要多余750ul。6) 胶回收的关键是通过柱子的溶液的盐浓度、酸碱性 ...

试剂: 试样20μl DNA ladder 琼脂糖 TAE缓冲液 上样缓冲液含0.5μg/ml EB的电泳缓冲液50×TAE贮存液: Tris 242g冰乙酸 57.1ml0.5mol/LEDTA(pH 8.0) 100ml双蒸水&

实验原理一. DNA的限制性内切酶酶切分析限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上并切割双链DNA。它可分为三类:Ⅰ类和Ⅲ类酶在同一蛋白质分子中兼有切割和修饰(甲基化)作用且依赖于ATP的存在。Ⅰ类酶结合于识别位点并随机的切割识别位点不远处的DNA，而Ⅲ类酶在识别位点上切割DNA分子然后从底物上解离。Ⅱ类由两种酶组成: 一种为限制性内切核酸酶(限制酶 ...

缓冲液在电泳过程中的一个作用是维持合适的pH。电泳时正极与负极都会发生电解反应，正极发生的是氧化反应（4OH--4e-2H2O+O2)，负极发生的是还原反应（4H++4e-2H2)，长时间的电泳将使正极变酸，负极变碱。一个好的缓冲系统应有较强的缓冲能力，是溶液两极的pH保持基本不变。电泳缓冲液的另一个作用是使溶液具有一定的导电性，以利于DNA分子的迁移，例如，一般电泳缓冲液中应含有0.01-0. ...

IntroductionDenaturing polyacrylamid gel is very useful technique which has been used for various application of biology such as analysis of milk proteins various recombinant proteins and also used fo ...

一、电泳前准备准备内容作用1.刷干净电泳制胶的梳子，板子，槽子，蒸馏水洗净晾干防止不必要的重复污染，减少外来的污染。梳子干净有利于梳孔的形成。2.检查电泳槽，根据情况更换buffer排除电泳槽的电极接触不良，确保buffer的缓冲能力，减少污染。3.根据DNA的分离范围选择合适的胶浓度并记录达到较好的分离效果，防止样过快跑出胶或者是过慢浪费时间。4.计算agarose的用量和制胶 buffer的用 ...

不同的带电颗粒在同一电场中泳动的速度不同。常用泳动度（或迁移率）来表 示。泳动度是指带电 颗粒在单位电场强度下泳的速度。影响泳动度的主要因素有： 1、首先决定于带颗粒的性质，即颗粒所带净电荷的数量，大小及形状。　　一般说来，颗粒带净电荷多，直径小而接近于球形，则在电场中泳动速度快，反 之则慢。泳动度还与分子的形状，介质粘度，颗粒所带电荷有关，泳动度与颗表面电 荷成正比，与介质粘度及颗粒半径反比 ...

不同的带电颗粒在同一电场中泳动的速度不同。常用泳动度（或迁移率）来表 示。泳动度是指带电 颗粒在单位电场强度下泳的速度。影响泳动度的主要因素有： 1、首先决定于带颗粒的性质，即颗粒所带净电荷的数量，大小及形状。　　一般说来，颗粒带净电荷多，直径小而接近于球形，则在电场中泳动速度快，反 之则慢。泳动度还与分子的形状，介质粘度，颗粒所带电荷有关，泳动度与颗表面电 荷成正比，与介质粘度及颗粒半径反比 ...

等电点聚焦就是在电泳槽中放入载体两性电解质，当通以直流电时，两性电解质即形成一个由阳极到阴极逐步增加的pH梯度，当蛋白质放进此体系时，不同的蛋白质即移动到或聚焦于与其等电点相当的pH位置上，电聚焦的优点是：有很高的分辨率，可将等电点相差0.01-0.02pH单位的蛋白质分开；一般电泳由于受扩散作用的影响，随着时间和所走的距离加长，区带越走越宽，而电聚焦能抵消扩散作用，使区带越走越窄；由于这种电聚 ...