蛋白质技术

369_Electron_Microscopy_Methods_and_Protocols.rar375_In_Vitro_Transcription_and_Translation_Protocols_Second_Edition.rar380_Immunological_Tolerance_Methods_and_Protocols.rar379_Glycovirology_Protocols.rar367_Mass_ ...

重组蛋白在大肠杆菌（E. coli）高效表达时，往往以不溶的、无活性的蛋白聚集体，即包涵体(inclusion body)的形式存在于细胞内。必须从细胞内分离出包涵体，采用高浓度变性剂（如7.0mol/L盐酸胍、8.0mol/L脲）溶解包涵体，然后除去变性剂或降低变性剂的浓度，使包涵体蛋白得以复性，最后再用色谱法使目标蛋白质得到纯化。其中包涵体蛋白的复性和纯化是整个过程中的核心。目前重组蛋白生产中普遍存在的问题是：（1）复性效率低 ...

体外诊断用品申报资料项目1.新生物制品证书/生产申请表。2.研究工作总结。3.新体外诊断用品的名称，选题目的和依据，国内外有关的研究现状及生产使用情况综述及主要参考文献资料，专利检索资料。4.产品的研制报告：包括原材料的选择、制造，生产工艺过程的确定，成品质控标准的建立，成品性能评价(灵敏度,特异性精密度等)，与国内外同类产品进行比较等试验资料。5.连续生产三批产品的原始制造检定记录复印件，及中国药品生物制品检定所对这 ...

核酸、核苷酸的基本换算1．核酸的换算：(1)摩尔数与质量：1 μg 1,000bp DNA = 1.52 pmol1 μg pUC18/19 DNA (2,688bp) = 0.57 pmol1 μg pBR322 DNA (4,361bp) = 0.35 pmol1 μg SV40 DNA (5,243bp) = 0.29 pmol1 μg FX174 DNA (5,386bp) = 0.28 pmol1 μg M13mp18/19 DNA (7.250bp) = 0.21 pmol1 μg l phage DNA (48,502bp) = 0.03 pmol1 pmol 1,000bp DNA = 0.66 μg1 pmol pUC18/19 DNA (2 ...

20种氨基酸的结构与功能特点Glycine1. Gly存在于Pr中一般都有作用，因其容易destabilize Pr2. Contact point of α helices (prior to N-terminus, 因为易形成turn)3. C-cap of α helices4. Flattening of antiparallel β sheets5. Interior of parallel barrels6. Nucleotide binding motifs (GxGxxG)Proline1. 虽然疏水，但是经 ...

90年代初期开始实施的人类基因组计划，在经过各国科学家近10年的努力下，已经取得了巨大的成就。不仅完成了十余种模式生物（从大肠杆菌、酿酒酵母到线虫）基因组全序列的测定工作，还有望在2003年提前完成人类所有基因的全序列测定。那么，知道了人类的全部遗传MM即基因组序列，就可以任意控制人的生老病死吗？其实并不是这么简单。基因组学（genomics）虽然在基因活性和疾病的相关性方面为人类提供了有力根据,但实际上大部分 ...

包涵体复性常见问题分析1. 对于尿素和盐酸胍该怎么选择?尿素和盐酸胍属中强度变性剂，易经透析和超滤除去。它们对包涵体氢键有较强的可逆性变性作用，所需浓度尿素8-10M，盐酸胍6-8M。尿素溶解包涵体较盐酸胍慢而弱，溶解度为70-90%，尿素在作用时间较长或温度较高时会裂解形成氰酸盐，对重组蛋白质的氨基进行共价修饰，但用尿素溶解具有不电离，呈中性，成本低，蛋白质复性后除去不会造成大量蛋白质沉淀以及溶解的包涵体可选用多种色 ...

更多信息请上: http://www.gzjetway.com/productshow.asp?id=433&mnid=14839&classname=多肽定制&uppage=/product.asp多肽合成概述：　1963年，R.B.Merrifield［1］创立了将氨基酸的C末端固定在不溶性树脂上，然后在此树脂上依次缩合氨基酸，延长肽链、合成蛋白质的固相合成法，在固相法中，每步反应后只需简单地洗涤树脂，便可达到纯化目的.克服了经典 ...

蛋白质的双向电泳实验方法第一向（等电点聚焦，IEF）1）凝胶条的准备1．以帽凝胶端（2个校准环：4mm和10mm）朝下，将4根玻璃管插入两个凝胶灌注装置的每个托架中，这样玻璃管恰好站在两个分隔室之一的“充填船”上。从玻璃管顶端到玻璃管底端拉入PP线（小心，线不易移动），否则以后将不能用它们将胶溶液拉上来。2．溶解分离胶溶液和过硫酸铵溶液。必须监控凝胶溶液的温度，因为高温下（大于25℃）聚合作用太快。3．分离胶溶液除气4分钟 ...

1 背景和意义从生命活动的直接执行者——蛋白质的角度研究生命现象和规律（特别是疾病防治和病理研究）已成为研究生命科学的主要手段。而这些研究往往离不开对细胞、组织或器官中含有蛋白质种类和表达量的研究。对处不同时期、不同条件下蛋白质表达水平变化的研究，识别功能模块和路径，监控疾病的生物标志物，这些研究都需要对蛋白质进行鉴定和定量。生物质谱技术的出现和不断成熟为蛋白质差异表达分析提供了更可靠、动态范围更广的研究手段。基于 ...

电泳试剂⑴样品缓冲液（４×）：1mol/L Tris-HCl, 20%甘油，0.001%溴酚蓝(w/v), pH 6.8。⑵30％丙烯酰胺单体贮存液：29.2g丙烯酰胺(acrylamide), 0.8g N,N’-甲叉双丙烯酰胺(N,N’-methylenebisacrylamide), 加超纯水充分搅拌至完全溶解定容至100ml, 漏斗过滤后置于棕色瓶内4℃避光保存。⑶分离胶缓冲液（4×）：1.5mol/L Tris-HCl, pH9.10, 4℃保存。⑷浓缩胶缓冲液（8×）：1mol/L Tr ...

Pevzner教授 Do-It-Yourself 蛋白质组学课程Budding bioinformaticists in Pavel Pevzner's undergraduate research experiences class looked at the proteins found in a bacterium and worked backward to identify the genes that created them.The course was not for the faint of heart. Undergradua ...

要做肌浆网上的一蛋白，用RIPA试剂来从组织里提取；按它的说明如下：1.每100mg组织加入1mlRIPA和10ulPMSF（不能预先加到RIPA种，否则PMSF失效）。样本以玻璃匀浆器匀浆，埋在冰里，间或匀浆，避免起泡沫和发热，冰里匀浆；2.将样本转移到1.5ml离心管，4度高速离心30分钟。高速20000g低温离心。3.将上清小心转移到干净无菌离心管中，－20度保存。4.抽提的样本蛋白浓度可以用Lowry 法。空白对照采 ...

Peter Järver and Ülo Langel. The use of cell-penetrating peptides as a tool for gene regulation Drug Discovery Today (DDT). 2004, 9(9): 395-402.The use of cell-penetrating peptides as a tool for gene regulationA novel carrier system that originates from membrane shuttling proteins such as the D ...

http://www.bio.com/store/product.jhtml?id=prod2020003Protein ArraysMethods and ProtocolsEric Fung, ed.HardcoverPublished April 2004304 PagesISBN: 1-58829-255-XA diverse collection of unique methodologies to synthesize and construct protein arrays for b ...

1. itraq的原理是什么？Itraq的检测可以做这样的比喻，蛋白被打成肽段后，被平均的铺在了一个有384个孔的平板上，然后机器会从每个孔中选取浓度在前5名的蛋白进行鉴定和比对，所以，如果假设每个一个样本中有100个蛋白，他们的浓度均为1%，那么得到的结果就是蛋白的得分低，但是鉴定的蛋白数量会很多，可以达到90以上；如果一个样本中有100个蛋白，有3个蛋白的含量分别为30、20、10、其他的97钟蛋白为剩下的50%， ...

刚读到一片essay。觉得很有意思。”没有什么比生物医学研究令人更激动人心，或者说对社会更有利了。但具有讽刺意味的是，从来没有比现在更难成为一位生物医学研究工作者。“Jonathan W. Yewdell （他培养了至少13个PI）用这个开始了他对年轻科学家的指导。Biomedical research has never been more intellectually exciting or practically important to society. Iron ...

http://v.youku.com/v_show/id_XNzcxMjMzMjg=.html具体操作步骤:（一）实验原理 双缩脲法（Biuret法）和Folin—酚试剂法（Lowry法）的明显缺点和许多限制，促使科学家们去寻找更好的蛋白质溶液测定的方法。1976年由Bradford建立的考马斯亮兰法（Bradford法），是根据蛋白质与染料相结合的原理设计的。这种蛋白质测定法具有超过其他几种方法的突出优点，因而正在得到广泛的 ...

环肽的固相合成(由于图片不能发，如果哪位大虾有兴趣请与我联系索取，ccauyn2004@163.com,本文由本人亲自撰写，谢谢支持！！)摘要：环肽是一种较线性多肽更为稳定的具有多种生理功能和医药价值的环状多肽。固相合成或树脂合成是环肽化学合成中使用得最普遍的一种技术，主要是将线性肽链按照一定策略锚定在固相树脂上，然后进行链的延伸和环化并最后将目标环肽从树脂上脱下。固相合成主要包括头尾锚定型的合成策略和侧链锚定 ...

1、 水化上样缓冲液（ I ） :尿素 8M 4.805gCHAPS 4% 0.4gDTT 65mM 0.098g （现加）Bio-Lyte 0.2%(w/v) 50 m l （ 40% ）（现加）溴酚蓝 0.001% 10 m l （ 1% 溴酚蓝）MilliQ 水 定容至 10ml分装成 10 小管，每小管 1ml ， -20 ℃冰箱保存。2、水化上样缓冲液（ II ）:尿素 7M 4.2g硫脲 2M 1.52gCHAPS 4% 0.4gDTT 65mM 0.098g （现加）Bio-Lyte 0.2%(w/v) 50 m l （ 40% ）（现加）溴酚蓝 0.001% 10 m l （ 1% 溴酚蓝）MilliQ 水 定容至 10ml分装成 10 小管，每小管 1ml ， -20 ℃冰箱保存。3、水化上 ...