蛋白质技术

蛋白定量是生物学实验不可缺少的一部分。为验证细胞裂解是否成功，或为了将多个样品进行平行实验比较或标准化保存，需对细胞裂解液进行蛋白定量；为了判定蛋白的产量，需对纯化好的蛋白进行定量；为了将纯化好的蛋白用生物素或者报告酶进行标记，同样需首先对蛋白样品进行定量，以保证标记反应在适当的化学浓度下进行。现今有很多商品化的蛋白定量试剂盒，如BCA定量试剂盒等，操作起来，简便快捷。当然也有不少实验室，还是采用传统的方法进行 ...

蛋白质复性史晋辉(天津大学化工学院生物化工系，天津 300072)关键词：蛋白质复性；环糊精；分子伴侣重组DNA技术为大规模生产目标蛋白质提供了崭新的途径。但人们在分离纯化基因工程表达产物时却遇到了意想不到的困难：很多利用大肠杆菌为宿主细胞的外源基因表达产物如尿激酶、人胰岛素、人生长激素、白介素-6、人γ-干扰素等，不仅不能分泌到细胞外，反而在细胞内聚集成没有生物活性的直径约0.1～3.0μm的固体颗粒棗包含体［1］。这些 ...

整理蛋白版2006年05月无人应助帖如下， 请广大战友积极应助，加分从优！！！请广大战友应助后到加分申诉及积分返还区跟贴申诉，谢谢。蛋白质组学讨论区 【求助】如何主动聚焦 请教http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=6133724&sty=1&tpg=4&age=0【求助】求助http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=6206917&sty=1&tpg=3&age=0【 ...

整理了一下2006年1月份蛋白版的无人应助贴，以支持版主的工作.这个月可能很多高手回家了，感觉无人应助贴比较多啊！希望大家积极应助啊！已被锁、被扣分、标题为空以及不符合发贴格式的无人应助贴不在此列应助战友请到积分申诉区给出链接，谢谢尿蛋白电泳 SDS-PAGE技术http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=5252925&sty=1&tpg=46&age=0如何研究作用在某启动子的反式作 ...

一篇国家级优秀博士论文竟然是大多做假:0 :0 ◇◇新语丝(www.xys.org)(xys.dxiong.com)(xys.3322.org)(xys.xlogit.com)◇◇一篇国家级优秀博士论文竟然是大多做假　　拿起笔做刀枪　　偶然知道西南农业大学陈宗道教授指导，赵国华教授的博士论文在陈教授参加的一次全国性博士点抽查中以最高分被评为优秀博士论文，查阅后发现问题太多，继续查阅几位博导发表关于植物多糖方面的论文，发现都是一些假论文，其中 ...

以下是我收集的一些资料：蛋白质数据库SWISS-PROT或TrEMBLhttp://www.ebi.ac.uk/swissprot/http://www.expasy.ch/sprot/PIRhttp://www-nbrf.georgetown.edu/pir/PRFhttp://www.prf.or.jp/PDBSTRhttp://www.genome.ad.jp/dbget-bin/www bfind?pdbstr-todayProsit ...

大家讨论一下。这篇文章到底有多大意义？未名空间甚至猜想它有可能拿诺奖。《自然—细胞生物学》：贺福初小组发现重要新型蛋白质 可选择性地干扰抑癌基因，可能成为肿瘤防治新型靶向分子http://www.sciencenet.cn/htmlnews/2009/4/218492.html［科学网 郝成涛 王学健报道］日前，由军事医学科学院副院长、中国科学院院士贺福初领导的军事医学科学院放射与辐射医学研究所蛋白质组学国家重点实验室，在肿瘤研究 ...

翻译调控——连接基因组学和蛋白质组学的有效手段摘要：在细胞内，蛋白质水平和mRNA水平是不一致吻合的。对蛋白质合成的 调控不仅局限于转录过程，翻译阶段也有一部分调节作用，mRNA的水平不能完全代表蛋白质水平。应用蛋白质双向电泳等方法分离蛋白质存在许多缺点，因此，利用蔗糖密度梯度离心的方法研究在翻译过程中的蛋白质调控是有意义的。只有核糖体结合的mRNA才可以翻译成蛋白质，而游离的mRNA在翻译中不起作用。关键词 翻译调控 ...

一、原理考马斯亮蓝G-250（Coomassie G-250）是一种甲基取代的三苯基甲烷，分子中磺酸基的蓝色染料，在465nm处有最大吸收值。考马斯亮蓝G-250能与蛋白质通过范得华相互作用形成蛋白质—考马斯亮蓝复合物蓝色溶液，引起该染料的最大吸收λmax的位置发生红移，在595nm处有最大吸收值。由于蛋白质—考马斯亮蓝复合物在595nm处的光吸收远高于考马斯亮蓝在465nm处的光吸收，因此，可大大地提高蛋白质的测定 ...

整理蛋白版2006年09月无人应助帖如下， 请广大战友积极应助，加分从优！！！请广大战友应助后到加分申诉及积分返还区跟贴申诉，谢谢。蛋白质组学讨论区：【求助】我在用邻苯三酚法测定SOD活性时 加入酶液以后OD值变化速率反而大于邻苯三酚自氧化速率 这是怎么回事呀？http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=6963434&sty=1&tpg=4&age=0【求助】核酸酶使用温度http://www.dxy. ...

物理性质预测：Compute PI/MW http://expaxy.hcuge.ch/ch2d/pi-tool.html Peptidemass http://expaxy.hcuge.ch/sprot/peptide-mass.html TGREASE ftp://ftp.virginia.edu/pub/fasta/ SAPS http://ulrec3.unil.ch/software/SAPS_form.html基于组成的蛋白质识别预测AACompIde ...

今天，看到一些关于蛋白受体与配体的一些资料，捎整理了一下，放到这里，分享一下（刚刚学习到这，呵呵）。希望大家共同谈谈这方面的东东。受体与配体应该是信号传导中的概念吧！我不是很清楚。单细胞生物可通过反馈调节，适应环境的变化。而多细胞生物则是由各种细胞组成的细胞社会，除了反馈调节外，更有赖于细胞间的通讯与信号传导，以协调不同细胞的行为，如：①调节代谢，通过对代谢相关酶活性的调节，控制细胞的物质和能量代谢；②实现细胞功能，如肌 ...

目前网站运行资金缺口较大请各位战友鼎力支持用你和我的爱心，为我们的美好家园撑起一片晴朗的天空非常感谢！【公告】丁香园网站捐款计划书转自：http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=21&id=193347&sty=1&tpg=1&age=0一、丁香园网站现况简介及远景规划丁香园网站始建于2000年7月，现在使用的域名为http://www.dxy.cn，目前主要致力于医学、药学、生命科学等专业信息服务， ...

amazon ：This text takes the reader on a guided tour through the philosophical and physical foundations of protein isolation. Aimed at a student readership, it should also be very useful to life science researchers faced with the task of isolating a protein for the first time. The logic of the overall a ...

我在两处看到GST-融合蛋白表达的方法有些困惑（主要集中在前几步）希望大家讨论。1、 1）将带外源DNA的pGEX载体转化入感受态，LB/Amp生长12-15hr。2）挑克隆于2mlLB/Amp中3-5hr3）加入100mmol/L IPTG至终浓度0.1mmol/L诱导表达，继续3-5hr4）。。。5）。。。2、1）On the first day, transform E. coli strain DH5α with the pGEX2TK–ER fusion expression ve ...

什么是转录因子？l 转录因子（Transcription factor，TF）是一类能与特异性DNA序列结合并调节基因转录的调控蛋白。l 转录因子通常是细胞内信号通路的核心蛋白，是将外界刺激转化为基因表达变化的关键调控者。为什么要研究转录因子？l 人体的35000多个基因在不同的组织、不同的时间具有表达差异性，转录因子的调控起到重要的作用。l 2012年的诺贝尔生理学或医学奖得主山中伸弥，在小鼠成纤维细胞中表达Oct3/4、Sox ...

实验室常用有毒药品请大家使用时注意安全，取用有毒药品时戴手套，并注意再触碰其他无毒的物品时摘掉手套，以免污染。污染的手套如若立即再用，请有毒面向上并妥善放置。0.溴化乙锭（EB）：大家都比较熟悉了。具有强诱变致癌性，使用时一定要戴一次性手套，注意操作规范，不要随便触摸别的物品。。1.DEPC(焦碳酸二乙酯):闻起来香香甜甜的,可是害人不眨眼!一种强有力的蛋白质变性剂,而且怀疑是致癌剂.开瓶时将瓶子远离你,内压可导致溅泼.操 ...

下面这些网站希望能给你们带来方便。www.proteomeworks.bio-rad.com 蛋白质组研究技术、信息等。www.proteinpathways.com 从新药开发角度，发现新蛋白及新作用。www.proteome.med.umich.edu 可以找到蛋白质组研究相关企业、各种仪器来源、新闻等。www.proteome.co.uk 各种蛋白质组研究相关信息www.micromass.co.uk 介绍蛋白质鉴定的先进仪器http: ...

一般性网站生物谷 http://www.bioon.com中国生物论坛 www.biooo.com丁香园论坛 http://www.dxy.cn/bbs/西陆生物探索者 http://www.bioprober.xilubbs.com（西陆）全文数据库检索论坛 http://ttpp.xilubbs.com/21世纪生物论坛 http://www.bio21st.com/中国生物论坛 http://www.biooo.com/Bio-Engine论坛 www.bio-e ...

1 分离方法　　采取何种分离纯化方法要由所提取的组织材料、所要提取物质的性质决定。对蛋白质、多肽提取分离常用的方法包括：盐析法、超滤法、凝胶过滤法、等电点沉淀法、离子交换层析、亲和层析、吸附层析、逆流分溶、酶解法等。这些方法常常组合到一起对特定的物质进行分离纯化，同时上述这些方法也是蛋白、多肽类物质分析中常用的手段，如层析、叫泳等。　　1.1 高效液相色谱（HPLC）　　HPLC的出现为肽类物质的分离提供了有利的方法手段，因为蛋白质、多肽的HP ...