蛋白质技术

【求助】关于明胶酶实验http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=6725370&sty=1&tpg=26&age=0【求助】western problemhttp://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=6725679&sty=1&tpg=26&age=0【求助】包涵体洗涤及离子交换纯化问题http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=67 ...

摘要：本文主要是针对Western bloting的原理及操作进行了简单的阐述，Western印迹法是利用抗原抗体的免疫反应，先将蛋白通过SDS-PAGE电泳分离开来，然后再利用电场力的作用将胶上的蛋白转移到固相载体（NC膜）上，然后再加抗体形成抗原抗体复合物，利用发光或显色原理将结果显示到膜或底片上。同时对Western bloting在实际操作中应注意的细节问题进行了归纳以及与其它免疫技术就抗体检测方面进行了比 ...

蛋白质功能预测一、根据序列预测功能的一般过程如果序列重叠群(contig)包含有蛋白质编码区，则接下来的分析任务是确定表达产物——蛋白质的功能。蛋白质的许多特性可直接从序列上分析获得，如疏水性，它可以用于预测序列是否跨膜螺旋(transmenbrane helix)或是前导序列(leader sequence)。但是，总的来说，我们根据序列预测蛋白质功能的唯一方法是通过数据库搜寻，比较该蛋白是否与已知功能的蛋白质相似。有2 ...

Pubmed上以proteome，proteomics，protein（s），peptide（s）为关键词进行杂志搜索，摘选的大部分与蛋白组学和肽组学相关杂志 应该是比较全的 但不排除有遗漏或错误的地方，请大家补充或指正。基本上都列有杂志的简要信息 影响因子（07年） 链接等 应该是有比较大的实用价值的（对文献查找，投稿等）。 觉得好的话 请大家顶一顶，投投票！:D

狭义来讲，提取指制备物与细胞固体成分或其它结合成分的分离，由固相转入液相或从细胞内生理状态转入外界特定溶液环境的过程，即分离前期被提取物从破碎的细胞中释放出来的过程。如果被提取物程固相或与固体结合，提取时由固相转入液相，常称为固液萃取；如果被提取物已经呈液相存在，提取时由一液相转入转入另一互不相溶的液相，这种方法称为液液萃取。　　广义来讲，提取又可称为抽提或萃取，贯穿在整个分离纯化过程中，如核酸制备中用氯仿或苯酚反 ...

一、原理细菌体中含有大量蛋白质，具有不同的电荷和分子量。强阴离子去污剂SDS与某一还原剂并用，通过加热使蛋白质解离，大量的SDS结合蛋白质，使其带相同密度的负电荷，在聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）上，不同蛋白质的迁移率仅取决于分子量。采用考马斯亮兰快速染色，可及时观察电泳分离效果。因而根据预计表达蛋白的分子量，可筛选阳性表达的重组体。二、试剂准备1、30%储备胶溶液：丙烯酰胺（Acr）29.0g，亚甲双丙烯酰胺（Bis）1 ...

几篇文献中脂肪组织蛋白质提取方法如下,与各位感兴趣的朋友分享1）Proteomics 2004, 4, 438–441Improved resolution of the human adipose tissue proteome at alkaline and wide range pH by the addition of hydroxyethyl disulfideSamples (from ten unaffected women) were cut into small pieces and frozen at 2757C until n ...

转至于http://www.51protocol.com/pro/WesternBlotting/20071031/38742_2.html初涉WB，与大家一起学习：）样品处理　　由于蛋白酶抑制剂可影响蛋白定量，且新鲜蛋白很少降解，故可不加，如加按建议比例即可。提取磷酸化的蛋白还需加Na3VO4 0.1mM及NaF 25mM）。　　注意SDS终浓度勿超过10%。对于心脏，肌肉等碎屑较多的组织可用5%的SDS，肝肾等组织2%即可。培养的细胞（定性） ...

Molecular Biology Second EditionMcGraw-Hill Science | undefined*N~I_0072345179_~V_Second_Edition_~F_2002_~V_PDF_~V_880_pages_~V_144_MBMolecular_Biology~E_by_Robert_Weaver~E_is_designed_for_an_introductory_course_in_molecular_biology._The_text_is_geared_not_only_toward_presenting_concepts_of_molecular_biolog_...

整理蛋白版2006年04月无人应助帖如下， 请广大战友积极应助，加分从优！！！蛋白质组学讨论区【求助】大哥哥姐姐，该网站的关于PMF\PST等介绍，放在哪啊？我在该网站看到这些技术的详细介绍，但当时忘保存，我找了精华贴总汇，没找到，能告诉我在哪放着http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=5874150&sty=1&tpg=5&age=0【求助】请问如何解释鉴定出的蛋白质分子量/等电点大多数都有 ...

虽然20个标准氨基酸的结构、名称和简写表示随处可见，但是我一直没有找到一份满意的。而且很多是网页形式的，想打印出来随时参考时，还得编辑一下，比较繁琐。这次提供的pdf文档，是直接编辑好的，可以直接打印参考，而且只有1页。最难得的是，文档中对氨基酸的性质和分类做的很好，而且有很精到的注解。就用这个做参考吧！http://www.accessexcellence.org/RC/VL/GG/garland_PDFs/Panel_2 ...

标题：Protein-Protein Interactions--Methods and Applications内容：研究蛋白质相互作用的各种方法和应用格式：PDF大小：10Mb（最小不要小于500kb）语种：英文简介：2004年的humana press出版的,为目前有关蛋白质相互作用的方法总结下面是该书的目录Protein–Protein Interactions ：Methods and Applications March 2004Part I. ...

哺乳动物跨膜蛋白承担各种生物功能，在疾病的发生、发展过程中扮演重要角色。膜蛋白的蛋白质组学分析是被大家看好的辨识新的药物靶标和/或疾病的生物学标记的好方法，并已得到广泛应用。然而膜蛋白通过许多疏水氨基酸残基锚定在膜结构里面，很难溶解在水性缓冲液系统中。为了制备膜蛋白样品，传统的方法是采用“去污剂＋机械处理”的操作方法获取膜蛋白，用于增溶的去污剂有离子型（如SDS）和非离子型的（如Triton?-X）等，前者会使多数蛋 ...

我是第一次进行核蛋白提取，从文献上查到细胞裂解液和细胞核裂解液的配方如下细胞裂解液A液配方为：1 10mmol/L的Hepes（PH 7.9）2 10mmol/L KCl3 1.5mmol/L MgCl24 0.2%Igepal5 0.5mmo/L EDTA6 0.1mmol/L EGTA7 1mmol/L DTT8 0.25mmol/L PMSF配置细胞核裂解液B液方案：1 20mmol/L的Hepe（PH 7.9）2 420mmol/L NaCl3 1.5mmol/L MgCl24 2%Igepal5 0.5m ...

整理蛋白版06年2月无人应助贴如下:蛋白质连接的问题http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=5458496&sty=1&tpg=19&age=0dystrophin和dystrophin genehttp://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=5458022&sty=1&tpg=19&age=0等电聚焦的临床应用（主要在检验医学中的）http://www.dxy.c ...

蛋白质组学精彩PPT历经三年收集整理的，吐血推荐！！在 www.mofile.com里,2.5MAn Introduction to Proteomics.ppt提取玛: 0260240113321679 2005-09-07986KStandards for Proteomics Data .ppt提取玛 3483467556627497 2005-09-07 17:45768.5KQuantitative ProteomicsICAT labeling.ppt提取玛 65 ...

1.Principles of Genetics ,Tamarin,7th_Edition.我从网上找来的，绝对可以下载，非常感谢上传者，也感谢首发者。下载时不可以用任何下载工具，不然下载不了的。http://rapidshare.com/files/5709290/Principles_of_Genetics__Tamarin__7th_Edition.pdf2.Working with Molecular Genetics(with soluti ...

这本书学校图书馆可借的只有一本中文版，另外实验室还有一本。比较贵，中文版售价是198RMB英文版的价格就更贵了，希望需要的同学尽快下载。提供两种格式的英文版和一种格式的中文版。英文名称：GENES VIII中文版名称：基因八本书适用于分子生物学、分子遗传学及相关课程，是从事生物遗传学、生物化学、细胞生物学、基础医学等专业人员进行科学研究的重要参考书。20年前Benjamin Lewin 的Genes一书从根本上改变了当时分 ...

:)刚才在精华版看到一些朋友问到在用MALDI测得肽段分子量后怎么进行数据库搜索的问题，觉得有必要给新手们详细阐明一下，所以贴出了我自己硕士毕业论文中的相关部分与大家共享，也请高手批评指正。我的样品种属是小鼠，我举例的这个SPOT没有鉴定出来，呵呵。2．蛋白斑点PRO2Fig.9 peptide mass fingerprint(PMF) of PRO2 digested by trypsin利用MASCOT程序进行检索输入肽段质量数为：9 ...

（一）第一向等电聚焦1. 从冰箱中取-20℃冷冻保存的水化上样缓冲液（I）（不含DTT，不含Bio-Lyte）一小管（1ml/管），置室温溶解。2. 在小管中加入0.01g DTT， Bio-Lyte 4-6、5-7各2.5ml，充分混匀。3. 从小管中取出400ml水化上样缓冲液，加入100ml样品，充分混匀。4. 从冰箱中取-20℃冷冻保存的IPG预制胶条（17cm pH 4-7），室温中放置10分钟。5. 沿着聚焦盘或水化盘中槽的边缘至左而右线性加入样品。在槽两端各1 ...