蛋白质技术

（一）第一向等电聚焦（用自制溶液）1. 从冰箱中取 -20 ℃冷冻保存的水化上样缓冲液（ I ）（不含 DTT ，不含 Bio-Lyte ）一小管（ 1ml/ 管），置室温溶解。2. 在小管中加入 0.01g DTT ， Bio-Lyte 按照如下表格 1ml 的量加，充分混匀。IPGpH RangeBio-Lyte Ampholyte(Stock)Range Conc.(w/v)Sample Solution VolumePer 1ml per 5ml per 50ml3-103-1040%5ul25ul250ul4-74-640%2.5 ...

1 van der waals volume, atom-name-is-C,.....http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=3994250&sty=1&tpg=65&age=02 【求教】请问分子量大小为65kDa的蛋白的Westernblot的反应条件如何？http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=4000123&sty=1&tpg=65&age=03哪里可以购买正常膀胱组织总 ...

蛋白质的检测与分析——Western blot 操作步骤一个基因表达终极结果是产生相应的蛋白质（或酶）。因此检测蛋白质是测定基因表达的主要标志，检测蛋白质的方法很多，除ELISA法外，也可用与检测DNA和RNA相类似的吸印方法。前两法有“南”和“北”之意，故本法遂被延伸称为Western（西）印迹法，该法能用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分辨出与专一抗血清结合的专一性蛋白质。将聚丙烯酰胺凝胶上分辨出的蛋白质转移到硝酸纤维素膜上并 ...

原核表达标准　　目前世界上， pET 系统已成为在大肠杆菌中蛋白表达的首选。该系统成功的一个主要原因是目标基因被克隆到不为大肠杆菌 RNA 聚合酶识别的 T7 启动子之下，因此在加入 T7 RNA 聚合酶之前几乎没有表达发生。克隆到 pET 载体的基因实际上是被关闭的，不会由于产生的蛋白对细胞有毒性而引起质粒不稳定。重组质粒转移到染色体上含有一拷贝由 lacUV5 控制的 T7 RNA 聚合酶基因的表达宿主中，并通过加入 IPTG 诱导表达；也可通过 l CE6 感染原始克隆宿主菌来提供 T7 RNA 聚 ...

1.Prepare gels (7.5%, 10% or 12%) according to the standard procedure. When preparing the running gel add gelatin stock solution (10 mg/ml in H2O) to get the gelatin concentration of 0.1% (1 mg/ml).2.Mix one part sample with one part Tris-Glycine SDS Sample Buffer (2x) and let stand 10 minutes at room temperat ...

序：在丁香园快四周岁的时候，特开此帖，让我们大家在一起畅谈《蛋白质技术讨论版 》的过去、现在、将来。在这里，让我们暂时忘记sds－page、忘记层析，质谱、忘记表达，纯化……在这里，让我们缅怀历史、展望未来，说说心里话……一切为了这一段难以割舍的丁香缘！前言：我总以为，人与人之间存在着一些神秘而美好的关联，网络如此之大、之广，在茫茫的人海之中，因为我们所学的专业，因为我们心中共同的追求，穿过许多的必然和偶然，走到一起。使我们相聚在 ...

一、名词解释1、 基因：能够表达和产生蛋白质和RNA的DNA序列，是决定遗传性状的功能单位。2、 基因组：细胞或生物体的一套完整单倍体的遗传物质的总和。3、 端粒：以线性染色体形式存在的真核基因组DNA末端都有一种特殊的结构叫端粒。该结构是一段DNA序列和蛋白质形成的一种复合体，仅在真核细胞染色体末端存在。4、 操纵子：是指数个功能上相关的结构基因串联在一起，构成信息区，连同其上游的调控区（包括启动子和操纵基因）以及下游的转录终止 ...

Protein–Protein Interactions ：Methods and Applications March 2004http://biomed.humanapress.com/BookTOC.pasp?isbn=1-59259-762-9&returntoisbn=Part I. OverviewStructural Basis of Protein–Protein InteractionsRobert C. LiddingtonQuantitative An ...

做了这么多的电泳一直都是闷着头做，今天突然意识到堆积胶和分离胶pH不同，不知为何。以下内容为转载。SDS－PAGE电泳的原理及浓缩胶浓缩样品的原理（甘氨酸的作用）SDS-PAGE（十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳）是目前最常用的分离蛋白质的电泳技术。下面就SDS-PAGE的基本原理做简单介绍。SDS－PAGE电泳的基本原理？SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，是在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进SDS， SDS能断裂分子内和分子间氢键 ...

常见蛋白质等电点参考值蛋白质 等电点鲑精蛋白 12.1鲱精蛋白 12.1鲟精蛋白 11.71胸腺组蛋白 10.8珠蛋白（人） 7.5卵白蛋白 4.71；4.59伴清蛋白 6.8，7.1血清白蛋白 4.7－4.9肌清蛋白 3.5肌浆蛋白 6.3β-乳球蛋白 5.1－5.3卵黄蛋白 4.8－5.0γ1—球蛋白（人） 5.8，6.6，7.3，8.2γ2—球蛋白（人） 5.2－5.5肌球蛋白A 5.1原肌球蛋白 5.9铁传递蛋白 3.4－3.5胎球蛋白 5.5－5.8血纤蛋白原 4.8α-眼晶体蛋白 6.0β-眼晶体蛋白 5.1花生球蛋白 3.9伴 ...

【蛋白质技术讨论版资源共享之一】5分共享 常用蛋白技术电子图书 【蛋白质技术讨论版资源共享之二】1分共享 常用蛋白技术电子图书 致各位战友的几点要求：1.请勿修改登陆密码。2.请勿对外传播本邮箱地址，以及登陆密码。3.请勿更改、删除其中的内容。4.有任何问题，请到丁香园蛋白技术讨论版相应板块讨论。5.为了避免由于访问量和下载量的原因导致信箱被锁的情况发生，请各位站友控制自己单位时间内的下载量。谢谢合作！以上几点请大家多多配合，共同 ...

下面是本论坛的关于蛋白质纯化的文章,整理如下:蛋白质复性后进一步纯化时，加入氯化钠即会出现沉淀，怎么办？http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/136508_0.html蛋白质纯化方案http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=1100586&sty=3&keywords=%B5%B0%B0%D7%D6%CA+%B4%BF%BB%AF蛋白质纯化、HPLC制 ...

格式：PDF大小：25.5Mb简介：作者：amersham biosciences公司出版社：amersham biosciences公司共 22册描述：非扫描版，可以用acrobat reader直接拷贝文字。1.Affinity Chromatography, Principles & Methods2.Antibody Purification Handbook3.Automated staining of polyacrylamide gels with Hoef ...

第一章 色谱法概论1第一节 色谱法发展简史1第二节 色谱法中的一些术语3第三节 色谱法的分类3一 、根据分离的原理不同进行分类3二 、根据流动相的不同进行分类4三 、根据支持物的装填方式分类5第四节 不同色谱法的应用范围5第五节 色谱图的一些术语6第二章 蛋白质液相色谱纯化概论6第一节 蛋白质纯化的一般目标和方法6第二节 液相色谱纯化前的预备工作7一 、样品的稳定性实验7二 、样品的预处理及保存7三 、评价每一纯化步骤：9第三节 蛋白质色谱纯化技术理论简介9一 、 ...

现如今对小肽的研究越来越重视，也发现小肽的确有很多独特的活性与功能，下面我就把丁香园里的有关小肽知识的贴子分类汇总如下，希望大家喜欢！小肽的分离纯化方法http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=542653&sty=3&keywords=%D0%A1%EB%C4http://www.dxy.cn/bbs/thread/545634http://www.dxy.cn/bbs/thread/5327 ...

一、样品的浓缩　　生物大分子在制备过程中由于过柱纯化而样品变得很稀，为了保存和鉴定的目的，往往需要进行浓缩。常用的浓缩方法的：减压加温蒸发浓缩通过降低液面压力使液体沸点降低，减压的真空度愈高，液体沸点降得愈低，蒸发愈快，此法适用于一些不耐热的生物大分子的浓缩。空气流动蒸发浓缩 空气的流动可使液体加速蒸发,铺成薄层的溶液，表面不断通过空气流；或将生物大分子溶液装入透析袋内置于冷室，用电扇对准吹风，使透过膜外的溶剂不沁蒸发，而 ...

浅谈分子伴侣与蛋白质折叠作者:贾小宇 本文对蛋白质折叠这一古老的领域的最新发展，尤其是分子伴侣的机理作了一番探讨，对一些新观点和新的实验事实作了介绍，并对一些实验实事作了一些思考，并提出了一些自己的看法。同时预测了结构生物学及技术手段的发展趋势。 生物大分子 分子伴侣 蛋白质的折叠 识别 结合生物大分子的结构与功能的研究是了解分子水平的先象的基础。没有对生物大分子的结构与功能的认识，就没有分子生物学。正如没有DNA双螺旋结构的发现 ...

大家好，我有2D分析软件PDquest8.0版 找了好多个网络硬盘，都没找到个免费的够大的空间让我上传，文件35M，下面是软件介绍，不知道大家能不能提供空间让我上传，好东西大家分享嘛！另外我还把2D实验手册上传到miss709@56.com密码123456，请大家去下吧。探索者系列之PDQuest“The Discovery Series”特点“The Discovery Series”系列软件具有如下共同的特点：PDQuest是B ...

蛋白质构象病周剑涛( 黄冈卫生学校生化教研室，湖北黄州 438000 )关键词：构象病；朊病毒；抑丝酶；β-淀粉样蛋白中图分类号：Q51；R373蛋白质结构生物学既从蛋白质一级结构序列，也从蛋白质空间结构及其动态变化去研究蛋白质的性质和功能。生物医学研究表明蛋白质空间构象发生异常变化会引起疾病发生，形成了蛋白质构象病(Protein conformational diseases)这一新的病理学概念。1. 蛋白质构象病及其分子构象病理学 ...

一直感觉园子里针对Western Blot实验的帖子很多，最近浏览了一下蛋白实验的论坛，看到还是有很多同学遇到各种各样的问题，我就把我们实验室比较成熟的Western Blot实验步骤整理了一下，也挂出来供大家参考一下，希望对您的实验有帮助。实验步骤：1.分别配制 5%浓缩胶和12%分离胶 12%分离胶10mL 5%积层胶6mLH2O 3.3mL H2O 4.20mL30% Acrylamide 4mL 30% Acrylamide 1mLpH8.8 Tris HCl（1. ...