蛋白质技术

Protein Targeting Protocols（Second Edition）Publisher: Humana PressNumber Of Pages: 558Publication Date: 2007-03-30 ISBN / ASIN: 1588297020EAN: 9781588297020Binding: HardcoverManufacturer: Humana PressStudio: Humana Press----------------------------------------------------- ...

喷血推荐blue sliver胶体考染法！我做了2D的三块平行胶，一个一般考染，一个blue sliver，一个银染（如图从左到右），我想不用我多解释什么了吧？！！愿意喷血向大家汇报这种染色方法的初步尝试结果和经验！！一、先讲讲本版对这种染色方法的提出和进一步讨论过程：1、siashq大侠在“请教：2DE考染的困惑”http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=1253068&sty=1&tpg=2& ...

由于是新手，且前次在实验间隙整理，时间仓促，有诸多不足，现重新整理如下：SDS-PAGE前两条Marker样品弥撒原因SDS-PAGE电泳中溴酚兰指示带弥散的问题电泳时蛋白条带弥散蛋白质跑不到分离胶中SDS-PAGE怎么跑不出带？蛋白条带丢失的原因电泳快速脱色及染色从sds胶里面回收蛋白的几个相关问题SDS-PAGE电泳后可以回收再复性吗？用什么方法保存二维电泳SDS胶？SDS聚丙烯酰胺凝胶的干燥保存方法等电 ...

【兴趣小组】《Guide to Protein Purification, 2nd Edition》读书笔记（二）http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=16631165&sty=1&tpg=1&age=0下载千本书不如好好读一本书，承蒙FreeCell版主提供的资源，《Guide to Protein Purification, 2nd Edition》Methods in Enzymology, Volume 463http://www. ...

论坛里发的都是关于细胞的免疫共沉淀的实验方法,这是我做组织时用到的方法,希望能给大家有点帮助实验方法如下:第一步：制备组织裂解物1. 把组织剪切成细小的碎片。2. 融解Western及IP细胞裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。3. 按照每20毫克组织加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当 ...

1 蛋白质含量测定法2 WESTERN PROTOCOL3 Western免疫印迹（Western Blot）4 蛋白质沉淀法5 蛋白质提取的方法总汇 1 蛋白质含量测定法本实验的目的是学会各种蛋白质含量的测定方法。了解各种测定方法的基本原理和优缺点。蛋白质含量测定法，是生物化学研究中最常用、最基本的分析方法之一。目前常用的有四种古老的经典方法，即定氮法，双缩尿法（Biuret法）、Folin－酚试剂法（Lowry法）和紫外吸收法。另外还有一种近十 ...

我有个提议：我们做双向电泳的的人不妨在此留下联系方式，以便以后大家交流经验，共同进步。斑竹语:现在整理一下大家的联系方式是：happyf jordanjie@163.com.dyz2002 szwjie@sohu.compengkp pengkp@yahoo.com.cnyglky yglky@sohu.commutongfeige guog@mail.tmmu.com.cnflyingheart liuzy87@sohu.com菊开那夜 dre ...

~ ~ ~ ~ ~ 蛋 白 版 一 周 无 人 应 助 帖 ~ ~ ~ ~ ~ 1. 本帖仅每周更新本楼一周无人应助帖和每月更新2楼一月无人应助帖，既往帖请于跟帖中寻找。2. 原则上自发帖之日起超出3天无人应助（本人顶帖亦算作应助）则归入无人应助帖，应助战友请于原帖后发帖应助,应助48h后自认为应该加分而未能加分的战友可到积分申诉区给出应助链接以便加分。3. 非整理员跟帖者一律删除。如有良策或纠错或其他可pm整理者，我们将专辟4楼用于回应。4. 已应助帖不代表求助已经解决，鼓励战友继续积极应助，加分机会与尚 ...

又开始新的一年了…………首先代表蛋白版全体版主祝愿广大战友工作顺利，学习好好，生活美满……经过了几年的努力，丁香园越来越繁荣，丁香园的战友越来越多，我们来这里的意义也就越来越大。作为丁香园的超级大版之一，蛋白质技术讨论版欢迎越来越多的战友来到这里说出您的疑问，贡献您的知识。您来这里得到帮助了，您是幸福的，同样，如果您来这里给与帮助了，您也一样是快乐的。在此新年到来之际，蛋白质技术讨论版征集蛋白版热心战友，目的在于能够在 ...

这是园子里各位战友的经验或者困惑，希望对大家在研究和工作中有一定的帮助。蛋白表达？http://www.dxy.cn/bbs/thread/109985蛋白表达http://www.dxy.cn/bbs/thread/518317原核表达？http://www.dxy.cn/bbs/thread/111135基础表达？http://www.dxy.cn/bbs/thread/218210蛋白表达http://www.dxy.cn/bbs/t ...

本篇虽然是《蛋白质纯化武器》系列中的第三篇，但它属于全体战友，属于伟大的互联网。系列前两篇分别为：蛋白质纯化武器－设备篇http://protein.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=15120322&sty=1&tpg=1&age=-1蛋白质纯化武器－工艺篇http://protein.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=15298689&sty=1&tpg=1&age=-1与前两篇为本 ...

一.通过Email在论坛索取资料的管理1、对提供资料者，我们表示感谢，希望您遵守以下规定：1）认真介绍自己拥有的资源；2）资料不涉及版权等法律问题；3）提供资料时注明：“不接受回帖索取，感兴趣者请直接给我的Email信箱：abc@dxy.cn来信索取”2、对于索取资料者，希望您遵守以下规定：1）保证不将在丁香园免费获得的任何资源用于商业目的2）不回帖子索取资料，而是通过Email向作者联系，保持学术论坛的氛围。此规定自即 ...

喜欢转贴的，请注明来自中国生命科学第一网：丁香园。根据自己体会和蛋白版的既往精华帖子，总结了没有发现蛋白质表达的原因，或者蛋白质不表达的原因，欢迎大家拍砖。1.载体构建错误。 这个屡见不鲜，很多克隆新人经常弄错读码框。比如Qiagen的pQE系列载体，其克隆位点常有一两个碱基的区别；另外有些酶产生粘端有些酶产生平端，这些都容易导致读码框错误，从而表达不出来。2.宿主菌选择不当。不同的宿主菌其基因型是不一样的。有些经过特 ...

1． Oligo 6是目前使用最为广泛的一款引物设计软件，除了可以简单快捷地完成各种引物和探针的设计与分析外，还具有很多其他同类软件所不具有的高级功能： a) 已知一个PCR引物的序列，搜寻和设计另一个引物的序列。b) 按照不同的物种对MM子的偏好性设计简并引物。 c) 对环型DNA片段，设计反向PCR引物。d) 设计多重PCR引物。e) 为LCR反应设计探针，以检测某个突变是否出现。f) 分析和评价用其他途径设计的引物是否合理。 g) 同源序列查找，并根据同源区 ...

很遗憾，dxyprotein@163.com 邮箱已经由于不正当使用遭禁用：http://www.dxy.cn/bbs/thread/3590569http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=3705030&sty=3&age=0&tpg=1&ppg=3请需要下面资料的朋友耐心等待，我们将将以下资料上传到老赵FTP，请以后直接从老赵航母下载，具体使用参照老赵航母规则，谢谢理解！邮箱中具有的资料：pi ...

鉴于原核表达的两大热门系统，his tag系统和gst系统，从园子里归纳出以下帖子，以方便大家参考。这是关于his tag的讨论贴蛋白纯化高手请指点（his）http://www.dxy.cn/bbs/thread/276543请问哪位做过6-His蛋白？http://www.dxy.cn/bbs/thread/36760his融合表达问题！再问载体！http://www.dxy.cn/bbs/thread/633019his-tag标签 ...

原核表达研究者关心的10个问题 (3)pET 是目前应用最为广泛的原核表达系统，已经成功地在大肠杆菌中表达了各种各样的异源蛋白。经pET系统过与使用过和正在使用这个系统的科学家的交流，我们发现了一些在使用pET系统的过程中以及原核表达中的一些常见问题。在此，我们选取了其中一些比较有代表性的问题，附上我们的建议改进方案，并期待和你一起分享成功的喜悦。7. 如果IPTG诱导后细胞停止了生长，是不是表示细胞死了？T7 RNA聚合酶 ...

这个protocol应该可以满足大部分人的需求。我孤陋寡闻，因需要检测可以溶于两种不同去污剂的蛋白，看到一篇文献里蛋白提取方法，完全被折服了。太强悍了，蛋白还可以这样提。我以前一直以为裂解液裂解后，沉淀里面没有蛋白了，现在才发现沉淀里还含有大量不溶于裂解液里去污剂的蛋白。故将这个protocol发出来供我和一样的新手学习。我以前是裂解细胞，离心，测浓度，然后直接往整管里加loading buffer，再离心取上清，看 ...

膜分离是在20世纪初出现，20世纪60年代后迅速崛起的一门分离新技术。膜分离技术由于兼有分离、浓缩、纯化和精制的功能，又有高效、节能、环保、分子级过滤及过滤过程简单、易于控制等特征，因此，目前已广泛应用于食品、医药、生物、环保等各个领域。康宁生命科学的过滤、超滤产品在生物医学及制药研究领域有着及其广泛的应用，适合药品及生物制品的澄清、分离、纯化和浓缩等各个环节。本人有多年的膜过滤技术经验，受丁香园和Corning（康宁 ...

不是我自己整理的，但是我觉得很不错转载 from ccebbs友情建议：crtl+F 先搜索你所需要的资源，不然眼睛都花了前面是书名，后面是共享邮箱名1 Kirk-Othmer Encyclopedia of Chemical... 2006.01.15 16:30 14082.65Kb hwzgj-chem,hwzgj-chem2 dragen2 01关节镜下使用..　2006.01.01 11:49　10845.83Kb ang6166303 01关节镜下使用..　2006.01.01 11:49　1 ...