蛋白质技术

1.Fix gel in 50% methanol for greater than 1 hour rinse gel in dH2O 3 times 5 minutes each place back in 50% methanol for 1 hour. 2.Stain gel in 100 mls of stain solution for 30 minutes 3.Rinse gel i ...

SDS-PAGE: gel electrophoresis of proteinsTECHNIQUE is to set up gel plates before you mix the gel mixes.Use the THIN spacers and choose a comb--number of wells varies.Make both resolving gel and stack ...

1.Rinse gel on glass plate briefly with distilled water. 2.Wash gel in fresh 50% ETOH-12% HAcwith shaking3 times1 hour each.(Fix IEF gel ON in 10% TCA). 3.Wash gel four times with 10% ETOH-5% HAc for ...

NuPAGE Gels A gel electrophoresis system used for SDS-PAGE protein analysis.The gels are made up of Bis-Tris-HCl (pH 6.4)polyacrylamide and are intended for denaturing conditions only. NuPAGE Electrop ...

我们做蛋白质电泳的人都知道，银染色很灵敏，有很强的说服力，但通常胶背景较深，不易扫描。在这里介绍一下低背景的蛋白质银染方法。 Step Reagent Time/min Fix 50%EtOH 12%HAC 0.1%HCHO 38%H2O 60 Rinse 50% EtOH 5 min 3 times Sensitive 0.02% Na2S2O3 1 min Rinse Double disti ...

Invitrogen提供了大量的涵盖面广的蛋白分离预制胶，包括不同的成分，百分比浓度和格式。使用合适的胶百分比浓度，缓冲系统，上样孔格式以及胶的厚度，对于获得最好的结果非常重要。以下提供了帮助你选择适合你应用的正确凝胶的信息。 E-PAGE™ 96 High-Throughput System是整合的、无缓冲液系统，设计用来检测和分析大量的蛋白样品，时间仅仅需要14分钟。 NuPA ...

凝胶干燥时遇到的主要问题是凝胶的变形和破裂。将凝胶放在Whatman 3MM滤纸上可防止干燥凝胶变形，但凝胶是否破裂取决于凝胶的厚度和干燥器的质量，因此，应尽量使用薄胶并使凝胶干燥器处于良好状态，使其真空压力波动极少。 (1)试剂与配制：固定液：冰醋酸:甲醇:水（10:20:70） (2)电泳后的凝胶用5～10倍体积固定液在室温下固定，酸性固定液扩散后可使凝胶中的溴酚蓝变黄。蓝色全部消 ...

电泳是在溶剂中通过电场转移带电分子，任何带电的离子或者基团放置在电场中都将会迁移。除非在它们的等电点，大多数生物聚合物在任何pH值时都带有净电荷，它们将会以与电荷密度成比例的方式移动。分子在电场中的迁移取决于电场的强度、净电荷、分子的大小和形状、离子强度、粘度和分子移动介质的温度。作为一种分析工具，电泳简单、快速，并且具有高灵敏度。用来研究单一、带电荷的分子的特性，也用来作为一种分离技术。 支持 ...

1. Introduction SDS-PAGE (Section 2.2) is probably the most commonly used gel electrophoretic system for analyzing proteins. However it should be stressed that this method separates denatured protein. ...

电泳法 电泳法是指带电荷的供试品（蛋白质、核苷酸等）在惰性支持介质（如纸、醋酸纤维素、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等）中，于电场的作用下，向其对应的电极方向按各自的速度进行泳动，使组分分离成狭窄的区带，用适宜的检测方法记录其电泳区带图谱或计算其含量(%)的方法。 各电泳法，除另有规定外，照下述方法操作。 第一法 纸电泳法 1.仪器装置 包括电泳室及直流电源两部分。 常用的水平式电泳室装置如图，包括 ...

Choose a protein standard MultiMark® ...

一、试验目的 了解并掌握垂直板凝胶电泳的使用方法。 二、实验原理 聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳是以聚丙烯酰胺凝胶做支持物的一种区带电泳，由于此种凝胶具有分子筛的性质，所以本法对样品的分离作用，不仅决定于样品中各组分所带净电荷的多少，也与分子的大小有关。其次，聚丙烯酰胺凝胶电泳还有一种独特的浓缩效应，即在电泳开始阶段，由于不连续pH 梯度的作用，将样品压缩成一条狭窄区带，从而提高了分离效果。 聚丙烯酰胺 ...

一、目的 蛋白质分子有单链、双链和寡聚蛋白等组成形式，组成蛋白质分子的单条肽链又称亚基。通过对天然蛋白的聚丙烯酰胺凝胶电泳和变性蛋白的SDS 一聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱的比较，可以研究种子蛋白质分子组成和结构。另外，SDS 一聚丙烯酰胺凝胶电泳是测定亚基分子质量的好方法。通过本实验，学习SDS 一聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理、技术和实际应用。 二、原理 用十二烷基硫酸钠（SDS）和还原剂（琉基乙醇或二硫 ...

电泳是指带电颗粒在电场的作用下发生迁移的过程。许多重要的生物分子，如氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等都具有可电离基团，它们在某个特定的pH值下可以带正电或负电，在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷极性相反的电极方向移动。电泳技术就是利用在电场的作用下，由于待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小、形状等性质的差异，使带电分子产生不同的迁移速度，从而对样品进行分离、鉴定或提纯的技术 ...

一、目的 1、了解聚丙烯酰胺凝胶电泳原理 2、了解聚丙烯酰胺凝胶的制作过程 3、了解过氧化物酶同工酶电泳过程 二、实验原理： 1、电泳原理及影响电泳的主要因素 带电粒子在电场中向与其自身带相反电荷的电极移动，这种现象称为电泳。用电泳技术分离、分析蛋白质、酶、核酸等生物大分子，有较高的分辨率，目前已成为生物科学研究中必不可少的手段之一。带电离子在电场中的泳动速度（1）和迁移率（泳动度）（2） ...

一、植物组织蛋白质提取方法 1、根据样品重量（1g样品加入3.5ml提取液，可根据材料不同适当加入），准备提取液放在冰上。　　2、把样品放在研钵中用液氮研磨，研磨后加入提取液中在冰上静置（3～4小时）。　　3、用离心机离心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃。　　4、提取上清夜，样品制备完成。 蛋白质提取液：300ml　　1、1Mtris-HCl（PH8） 45ml　　2、 ...

一、实验目的 了解等电聚焦的原理。通过蛋白质等电点的测定，掌握聚丙烯酰胺凝胶垂直管式等电聚焦电泳技术。 二、实验原理 等电聚焦（Isoelectric focusing，简称IEF）是六十年代中期出现的新技术。近年来等电聚焦技术有了新的进展，已迅速发展成为一门成熟的近代生化实验技术。目前等电聚焦技术已可以分辨等电点（pI）只差0.001pH单位的生物分子。由于其分辨力高，重复性好，样品容量大，操作 ...

Sample Buffers: Dehydrating Solution 30% Methanol-2.5% glycerol Linear Acrylamide make up a 3% solution in distilled water (stir overnight). Use 1.2 ml/12 mls gradient ...

一、目的 同工酶是指能催化同一种化学反应， 但其酶蛋白本身的分子结构组成却有所不同的一组 酶。它们是 DNA编码的遗传信息表达的结果。最近的研究表明，同工酶与生物的遗传、生 长发、代谢调节及抗性等都有一定的关系。因此，测定同工酶在理论上和实践上都有重要的 意义。用聚丙烯酰胺凝胶电泳测定同工酶，方法简便、灵敏度高，重现性强，测定结果便于 观察、记录和保存。 过氧化物酶是植物体内普遍存在的、活性较高 ...

This is a method for the separation and identification of proteins in a sample by displacement in 2 dimensions oriented at right angles to one another. This allows the sample to separate over a lar ...