PCR技术

1自从1985 年Karny Mullis 发明了聚合酶链式反应以来，PCR 技术已成为分子生物学研究中使用最多、最广泛的手段之一，而引物设计是PCR 技术中至关重要的一环。使用不合适的PCR 引物容易导致实验失败：表现为扩增出目的带之外的多条带（如形成引物二聚体带），不出带或出带很弱，等等。现在PCR 引物设计大都通过计算机软件进行。可以直接提交模板序列到特定网页，得到设计好的引物，也可以在本地计算机上运行引物设计专业软件。一般来说，专 ...

丁香园是一个非营利的学术科技网站，其今后发展定位是公益性学术科技类型网站，我们在“独立，非营利，纯学术”的思想指导下来建立和发展丁香园，主要目的是希望继传统知识交流平台（报纸，杂志，期刊等）之后，利用现在成熟和发达的互联网，使之成为一个承载和传播先进科技思想的新平台。这个平台与传统知识交流平台相比，具有如下特点：获取信息速度快，范围广，信息量大，互动性强，成本低。这几个特性是传统知识交流平台所不具备的。目前由于对互联网 ...

我作RT-PCR, 这个引物实在是设计不好，是TOPO II ALPHA其mRNA如下：1 aggttcaagt ggagctctcc taaccgacgc gcgtctgtgg agaagcggct tggtcggggg61 tggtctcgtg gggtcctgcc tgtttagtcg ctttcagggt tcttgagccc cttcacgacc121 gtcaccatgg aagtgtcacc attgcagcct gtaaatgaaa atatgcaagt caacaa ...

老板给定了一课题，希望能通过定量PCR来检测一病原真菌对药剂的抗药性。该病原真菌的抗药性由其β-维管蛋白基因的881位的点突变引起。该菌抗药性β-维管蛋白基因序列为：ATGCGTGAGATTGTGAGTGTTTTCCTCTGACCTCTAACTTCAAGCTGTTGCATGCGTTGAGCTTGTGTTTTGTGCCCTTGATTGTACCCCGCCGGGCGGTGGCAGCTCAACAACAATGCA ...

刚刚接触RT-PCR实验,现在遇到一些问题.特向各位高人请教.我做的是关于大鼠erg,mink,KvLQT的基因表达,引物是老板按照文献给的,源自于Circulation(2000;101:2007-2014),作者是日本人.非常困惑的是没有GENEBANK的NO,对于这些引物我非常想核对,但是无从谈起.硬着头皮做了,可是发现跑出的条带不对头,与Marker比较都大了许多,erg大约是900左右,这是不是就是所谓的基因 ...

因工作需要，想查一下最原始的有关PCR论文，在PubMed上，用（“Polymerase chain reaction”）搜索了1984-1987年的论文，结果有11篇，其中最早的在1986年发表，共3篇，具体如下：9: Saiki RK, Bugawan TL, Horn GT, Mullis KB, Erlich HA. Related Articles, LinksAnalysis of enzymatically amplified beta-globin and HLA-DQ alpha DNA with ...

PCR技术概论聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点；能在一个试管内将所要研究的目的基因或某一DNA片段于数小时内扩增至十万乃至百万倍,使肉眼能直接观察和判断；可从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的DNA供分析研究和检测鉴定。过去几天几星期才能做到的事情，用PCR几小时便 ...

一、 分子生物学Promega: Promega 公司是分子生物学研究工具的经典品牌，已有接近30年的历史，是生命科学这个朝阳产业中的“老字号”。该公司所特有的萤光素酶生物发光技术，灵敏度高，信号/背景比率低，在基础研究和药物筛选领域内得到广泛的应用和认可。应用范围涉及报告基因检测；细胞学活力、细胞毒作用、细胞凋亡检测；蛋白酶、蛋白激酶、核受体检测，以及描述药物先导物的吸收、分布、代谢、排泄等特征性参数的一系列检测方法。Prome ...

深圳市生科源技术有限公司PCR项目客户问题手册（载录）1．何谓PCR？PCR是多聚酶链式反应(Polymerase ChainReaction) 缩写，是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。是一种选择性体外扩增DNA或Rundefined*段的方法，能使极少量的基因组DNA或RNA样品中的特定基因片段，在短短几小时内扩增上百万倍。2．实时荧光PCR和普通PCR的区别？普通PCR技术：对反应的终产物进行半定量分析或定性分析。实时荧光 ...

荧光PCR原理http://www.dxy.cn:8080/bbs/upload/2005/10/21/32745781.docPCR技术http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=1372243&sty=3&keywords=pcrPCR动画http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/3318653_1.htmlRT-PCR 实验步骤http://www.dxy. ...

PCR引物设计的11条黄金法则1.引物最好在模板cDNA的保守区内设计。DNA序列的保守区是通过物种间相似序列的比较确定的。在NCBI上搜索不同物种的同一基因，通过序列分析软件（比如DNAman）比对（Alignment），各基因相同的序列就是该基因的保守区。2.引物长度一般在15~30碱基之间。引物长度（primer length）常用的是18-27 bp，但不应大于38，因为过长会导致其延伸温度大于74℃，不适于Taq DNA ...

前一段时间贴出一段基因想请大家帮忙设计引物，可惜大家都太忙。我自力更生，学着设计了一下，不知怎么样，希望各位赐教！！！基因序列：1 gtattaaagg gaccggagcg gggcagttcc cgacgccgca gcgctcgctt tcccttccct61 cctctctggc cctccctcct cccacccact ggctccctcc cccagcgctc tccagtttct121 gtgccccagg agctacgcga cagtcttcca ...

我要对大鼠的IL-18RβmRNA进行RT-PCR现设计了如下两条引物：引物对1：扩增区域 1～522 退火温度59℃。F1ATGCTTAAATCCAGATGTGGCGR1CCCATAAAACAGGGCTACCTCC引物对2：扩增区域600～1113 退火温度58℃F2AGGCTTGTACGTGTGCGATTACR2TTCAATCCAGTGCCAGTAGAGC请各位高手帮我分析分析这两对引物怎样，替我指点指点！谢谢！以下 ...

我想用RT-PCR扩增出某种纤毛虫的制动抗原基因的全长cds通过ncbi查到它的全长cds为(1329bp):ATGAAATATAATATTTTATTAATTTTAATTATTTCTTTATTTATTAATGA ATTAAGAGCTGTTCCATGTCCTGAT GGTACTTAGACTCAAGCTGGATTGA CTGATGTAGGTGCTGCTGATCTTGGTACTTGTGTTAATTG CAGACCTAAT TT ...

--------------------------------------------------------------------------------虽然长了些, 但耐心看完,应该对你的问题有所帮助各位战友 我们来聊聊PCR ：）PCR可以说是目前分子生物学实验中应用最为广泛的一种技术。从最初的在几个水浴锅里把试管放来放去，到现在各种先进的PCR仪， 到REAL TIME PCR。 设备是越来越先进，方法是越来越多，但基本的原理还是那套。然而实际操作中，仍然有很多的问题让人头疼。正好看到有人建议来个PC ...

直接PCR方法使PCR可以直接从样本开始，为DNA扩增带来前所未有的便捷。未经DNA纯化而直接使用微量原始样本做模板，为PCR实验节省大量的时间和成本。优势：无需进行昂贵又费时的DNA抽提；样品需求量小；实验方案简便，手动操作步骤少；实验时间极短；已对多种样本类型进行测试；强劲的热启动DNA聚合酶保证特异性和高产量。适用于各类植物样本的高效PCR测试样本：叶片（拟南芥、玉米、水稻、棉花、烟草、葡萄藤）种子（苹果、胡萝卜 ...

PCR技术简史　　PCR的最早设想 核酸研究已有100多年的历史，本世纪60年代末、70年代初人们致力于研究基因的体外分离技术，Korana于1971年最早提出核酸体外扩增的设想："经过DNA变性，与合适的引物杂交，用DNA聚合酶延伸引物，并不断重复该过程便可克隆tRNA基因"。　　PCR的实现 1985年美国PE-Cetus公司人类遗传研究室的Mullis 等发明了具有划时代意义的聚合酶链反应。其原理类似于DNA的体内复制，只是在 ...

大家好，Fluidigm BioMark 系统通过集成流体通路（Integrated Fluidic Circuit, IFC），将上万个微小管道、控制阀门集成到微板上，形成纳升（nL）量级的反应仓，不需特别移液器，就可以同时进行多达近万个常规qPCR (传统Taqman 或其他) 实验。操作简单，既有传统qPCR可定量之好处，又有基因芯片高通量耗材少之优点，能大幅提高实验效率及准确度。· 单个细胞基因表达( Single Cell Gene Expression): ...

1: AF075241. Sus scrofa prepro... LinksLOCUS AF075241 451 bp mRNA linear MAM 17-MAY-2000DEFINITION Sus scrofa prepro-orexin mRNA, complete cds.ACCESSION AF075241VERSION AF075241.1 GI:3328338KEYWORDS .SOURCE Sus scrofa (pig)ORGANISM Sus scrofaEukaryota; Metazoa; Cho ...

这是我设计的P53基因引物blast结果,请教高手这引物可用吗?Distribution of 104 Blast Hits on the Query Sequence--------------------------------------------------------------------------------Score ESequences producing significant alignments: (bits) Valuegi|51475426|ref|XM_496493.1| PREDICTED: Homo sapiens s ...