RNA实验技术

lantianshi 在网上查到转录起始位点通常为一个嘌呤，就是说不是一个A就是一个G。而记着好像分子生物学上曾经给过序列特征，是ANTA(G)....,有确切了解这个序列特征的同学或者老师吗？请解答一下！lmnsmu 转录起始位点是指合成RNA的第一个核苷酸所对应的模板序列，RNA的第一位即5'-端总是GTP或ATP，GTP更常见。那么转录起始位点应该是C或T序列，但是不是所有的C或T是起始位点，一般是存在于特征性序列中 ...

恋梅时节 http://www.mirbase.org/lide658 你想问什么问题啊？是具体的使用方法吗？你要查找什么？恋梅时节 lide658 wrote:你想问什么问题啊？是具体的使用方法吗？你要查找什么？miRBase的用途，最好详细点的；如果没有，能不能给我解答下，用miRBase找靶基因的方法？nicolewendyyang 网站上写的还是比较清楚的吧，自己看说不定比在网上问更加容易哦雨水占 请问楼主miRBase怎么预测靶 ...

heroyl 本人已知某基因的部分片段，想问下高人能否不做race，直接和基因组序列对比得到其全长！吴佰霖 直接和基因组序列对比得到其全长,是种分析做到实验时候,还需扩增出来zjubell RACE是一种方法，一般是基因未知的情况下，用此方法得到基因全序列。如果你能通过部分序列进行比对获得全序列，那说明库里已经有全序列在了，那你做此有何意义呢？如果以前没人测过全序列，你知道某部分序列，那可以通过RACE的方法获得全序列，然 ...

bobbymm shRNA要做连接的时候发现 annealing buffer 没有了。可以用 PCR buffer代替不？zhujoker 就用普通的去离子水就可以了，没有那么复杂。不要想当然得使用PCR buffer。bobbymm 用的是TAKARA的PCR BUFFER ，连接的还不错。已经送去测序了。谢谢回复。本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongco ...

yeselanshan 本人正进行RNA干扰筛选实验，筛选模型已构建成功，但shRNA文库构建一直没有成功，导致实验受阻。哪位达人能否提供siRNA文库或shRNA文库帮助，接受有偿提供。谢谢各位。willion1985 www.sirna.cnxujian2004265 再打广告，封！本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcomi ...

perpetuity_love 请问有谁正在做RNAa的研究，麻烦留个言，我想了解一下国内这方面的研究进展。zhujoker 在Pubmed里面使用RNAa搜索一下不就什么都搞定了？freecell http://www.plosone.org/article/info%3Adoi%2F10.1371%2Fjournal.pone.0008848# What is RNAa?RNAa or RNA activation is a novel small RNA-media ...

piaoxue2320 哪位大虾survivin的vector，能否借我一点。实验急需。万分感谢。还有谁用过survivin的siRNA效果比较好的，可以告诉我哪家公司的吗？谢谢了。zitong1983 表达质粒免费赠送倒无所谓，siRNA也要蹭别人的有点为难别人啊，这东西不便宜啊shutaozheng_824 嗯，siRNA合成价格蛮高的！上海吉玛（**~B公司专项做目的基因的siRNA的！蛮不错的！参照网页：http://www ...

wcqworld 请教各位老师：假设我想研究一类因子（配体）是如何作用于细胞膜上的两个受体并诱导细胞发生功能变化的，请问的是，构建完两个受体的RNAI载体，通过分组后转染，分别进行单一受体基因的抑制和两种基因的抑制，那么是否会获得好的效果，干扰只是影响新蛋白的合成，原来形成的在膜上的蛋白不是还存在，会存在多久？这样是不是不可行啊，长效表达载体构建后离体在在体试验分别要处理多长时间后才能进行效果检测啊！ylhuang ...

fanghuan1986 肝病患者外周血中怎么能检测到肝组织中的人端粒酶逆转录酶（hTERT）mRNA和甲胎蛋白mRNA 呢？本人认为转录水平应该发生在肝细胞中的，外周血中应该检测不到转录水平。恳请给予指教，不胜感激。woxingwosu 现在的研究已经表明了人的外周血中确实存在DNA和mRNA（Circulating DNA or RNA），一些癌症的患者（肝癌，肠癌，乳腺癌等等）的外周血中的一些mRNA含量有所增加，从而可以用来作 ...

leo_tao_jesus 本人想做关于microRNA方面的研究，现在刚刚入门，请大家帮帮忙分享下手头的文献。。十分感谢！zhujoker http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/?term=let-7中文的吧你就在万方里面找吧，很多的！leo_tao_jesus 谢谢啦~~恋梅时节 cell的一篇关于let-7家族对RAs的调控，希望对你有帮助！本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验 ...

yunasha1986 我想咨询一下你们公司能不能帮助检测人类细胞的microRNA表达谱，我有正常的大肠癌HT-29细胞，以及RNA干扰后的HT-29细胞，我想检测对比下两类细胞microRNA表达谱的变化情况，特别需要包含miR-183,miR-1224-3p,miR-1184,miR-1205,miR-1207-5p,miR-486-3p,miR-423-5p,miR198,miR-455-3p,miR-214,miR-922 ...

light666 miRNA序列比较短小，用探针检测时设计难度比较大，因而许多文章都推荐使用MGB探针。但是不是一定要用MGB探针呢？毕竟MGB比较贵，普通TaqMan探针虽然也不便宜，但比MGB已经便宜不少了。light666 看了不少文章，用的都是 Taqman MicroRNA assays。请问高手们，这个东西里面的TaqMan探针是MGB的吗？谢谢bluesteven 是的，里面的就是Taqman-MGB，我们以前用过，要是 ...

qinbingsx 各位大侠，本人想让目标microRNA在细胞中过表达，以前看到的好像大都是用mimic，看到有帖子说表达前体实验效果较好，我想请问一下质粒过表达的microRNA前体是转入细胞内后再生成成熟的目的microRNA吗？这种microRNA前体那一家公司可以买到啊？请赐教，非常感谢！freecell 可以咨询ambion公司，专门做RNA的。willion1985 锐博生物本文由丁香园论坛提供，想了解更 ...

wxf09211230016 准备做microRNA，请问各位高手，microRNA提取、标记到定量PCR哪个公司的试剂比较好呀？刚刚接触，请大家多多指教,先谢过了。zhujoker ABI的，做实验之前自己查查好吗？wxf09211230016 恩，谢谢了bluesteven NOVLAND的你可以咨询下，价格上比较有优势，也有全套的提取和检测本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都 ...

2004seedfive 各位仁兄！提取植物的miRNA哪家公司的试剂盒提取的质量好谢谢freecell 做核酸提取，Qiagen比较专业；其中做RNA的话，Ambion自称RNA技术公司，相对比较可靠。艾博思 2004seedfive wrote:各位仁兄！提取植物的miRNA哪家公司的试剂盒提取的质量好谢谢Ambion现在的ABI,invitrogen。Qiagen的在纯化这块不错，但是miRNA的认可度不高。blues ...

myskite 如何提取血清中的miR？提取前血清如何保存？freecell http://www.google.com/#sclient=psy&num=10&hl=en&q=serum+microrna&aq=f&aqi=g2&aql=&oq=serum+microrna&gs_rfai=&pbx=1&fp=280187d6f0589da0happyli85 做测序的话建议TRIZOL，做PCR的话建议用过滤柱的方法。TRIZOL 用INVI ...

willion1985 miRNA功能动物实验方法willion1985 antagomir动物实验方案，做miRNA缺失性研究，大家觉得如何？freecell This paper plus its references are helpful for this study.http://www.nature.com/nmeth/journal/v6/n1/full/nmeth0109-37.htmlfunds 本实验室为上海高校科研室，现对外开放可代做miRNA ...

xunyi09 各位师兄师姐，我准备做个干扰的实验，请问shRNA、siRNA和miRNA三者之间做干扰哪个更好些？这个实验下来经费多少啊？刚入门，望多指教呀！！:)freecell 各有优缺点。经费据估计，最少10K。wst207 10k 啊 不算多willion1985 siRNA 简单方便clion007 xunyi09 wrote:各位师兄师姐，我准备做个干扰的实验，请问shRNA、siRNA和miRNA三者之间做干扰哪个更好些？这个实验下来 ...

myskite 同一张组织切片能同时做microRNA 原位杂交和某基因的原位杂交以及免疫组化吗？zhujoker 不行，一般使用连续切片来达到你的这种研究目的。myskite 哦，谢谢myskite microRNA探针用生物素标记还是荧光标记，还要做某基因的免疫组化myskite 做microRNA的原位杂交，公司说，地高辛比较常用，那么，如果我还要做目的基因的原位杂交，是不是，也要用地高辛标记啊？组化用荧光标记行吗？没做过原位 ...

haiya116 请教一下，看文献的时候发现MicroRAN有时也叫miRNA，不知道和mRNA有没有区别？是不是指同样的RNA？谢谢！zhujoker mRNA，为 messenger RNA 的简称，或称为信使RNA。mRNA是由DNA经由转录而来，带着相应的遗传讯息，为下一步转译成蛋白质提供所需的讯息。在细胞中，mRNA从合成到被降解，经过了数个步骤。在转录的过程中，第二型RNA聚合酶（RNA polymerase II）从DNA中复 ...