RNA实验技术

小小学药者 因为实验室以前没做过干扰试验，所以对这块不是很懂。请大家帮我推荐下 哪家合成的比较好，价格也适当的 谢谢哈！另外甲基化的siRNA适用于哪类干扰呢？呵呵 不太懂问题如果很幼稚 不要笑话哦。。。。呵呵 谢谢bioenw 百恩维生物 www.biowit.combaby_susan 甲基化的siRNA，你是指2‘甲氧化学修饰吗，这个主要是保证siRNA转染进细胞或注射动物体内比较稳定小小学药者 baby_susan wrote:甲基化的siRNA，你 ...

悬崖上的牛仔 请教各位，这个microRNA 在该细胞内本身就有，只是表达不稳定，有什么方法可以让这个microRNA 持续表达呢？holywater 表达不稳定也是一种机制，我觉得去研究为啥不稳定更好一些，只是个人意见俄！yz2003can 将microRNA克隆到慢病毒载体，包装病毒，构建稳转microRNA细胞系。本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号 ...

taijiwu 最近比较关注miRNA Sponge（海绵体），不知哪位高手做过啊，能否介绍一下使用方法，比如是否需要转染试剂或载体，那种较好，海绵体的用量多少等等，在CNKI理搜了一下，没发现这方面的文献，国内是不是用的少啊。zhujoker 其实我自己也做了不少这方面的工作，但是后来发现还是买比较省时省事。因为最重要的是我们耗不起这个时间。到现在我已经摸索了1年多了，还是没有找到一个合适的能够有效地载体。taijiwu 这个 ...

大漠判官 循环microRNA是潜在的疾病标志物已经是共识了。现在已经有研究发现细胞间通过microRNA传递信息，即A细胞通过“旁分泌”的方式释放microRNA影响B细胞的功能。我突发奇想，循环microRNA会不会参与疾病的发病，从而具有治疗价值呢？比如，将microRNA mimics或者inhibitor直接注射到动物体内，能否发挥治疗作用呢？换句话说，就是降低或者增高循环中某种microRNA的水平，能否 ...

曾经在水一方 请教各位大侠，如何查找融合基因的mRNA序列？比如说PML/RARA，可以利用Map viewer 分别查出PML和RARA的mRNA序列，然后在融合位点拼接吗？有什么可用的方法，请大家帮我推荐一下。谢谢了bingbing6612 这是问题吗？学过分子生物学的都知道曾经在水一方 让您见笑了。还请您不吝赐教。本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号 ...

64249087 菜鸟求助：已知靶基因，怎样筛选相关的miRNA?lide658 可以通过一些生物信息学数据库先找到与之可能作用的miRNA，然后根据种子序列结合的程度以及其他参数进行选择，比较常用的是targetScan.当然还有很多，最好是选择在多个预测软件都能预测到的miRNA，在或者就是针对靶基因进行处理后，做miRNA芯片，这样针对性更强，但费用较高。64249087 谢谢了！elvayal 理论上,是所有的已知基因 ...

marker2007 心肌组织很难拿到，请问采用检测血液中MicroRNA水平来替代心脏组织的MicroRNA水平检测吗？谢谢！woxingwosu 肯定不行的，两者不一样。marker2007 楼上版主您好，我已检测2对心脏病患者的全血MicroRNA,结果发现hsa-miR-21与hsa-miR-26b在2次实验中均升高近2倍，面对这样的结果，我有点茫然，1）不知道分析hsa-miR-21与hsa-miR-26b的功能，二者 ...

syn2767 请教各位师兄，小弟想研究肿瘤中lncRNA-即长非编码RNA的情况，请问开始用什么方法，用芯片筛选吗，多谢freecell "研究肿瘤中lncRNA-即长非编码RNA的情况", 研究什么情况？wlh0369 我觉得应该先将lncRNA从总RNA中分离出来，再进行下一步研究yaoyao82986 你好，看到你发的这篇帖子是今年年初的，我现在也遇到和你相似的问题，请问你当时是怎么解决的？如何筛选出的lncRNA？非常感谢 ...

qingyu2010 我是分子菜鸟一只。。。查基因序列的时候发现有些基因有两个polyA，这是为啥呢？望各位师兄师姐解惑啊~苍山暮雪 基因序列没polyA吧，A尾巴是在RNA加工中添加的吧qingyu2010 呃。。。我说的是polyA signal。。。苍山暮雪 有些基因有多个polyA位点的，通过不同剪接方式产生不同的蛋白，大鼠降钙素基因神马的就是这样本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你， ...

霍一刀hxs 各位战友，谁知道哪些网站或者软件可以预测RNA的二级结构？谢谢。吴佰霖 Mfold这个网站霍一刀hxs 吴佰霖 wrote:Mfold这个网站谢谢。投你一票。本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

gaoyongxin 请问谁有mir-21在癌症术后升高的文献或者其他miRNA升高的相关文献zhidan1728 我看到过miRNA21在癌症方法的综述，也看到过其在心血管方法的文献，不过你可以在pubmed上搜搜，应该就找得到。gaoyongxin 这一方面的文章我也看了很多 都是miR-21术后下调的 没有看到过上调的 但是我现在需要的是上调的文献的支持 其他miRNA术后上调的也可以dnazyme Upregulation of mi ...

zitong1983 如题，近期可能研究某基因3’-UTR对mRNA稳定性的影响，有没有软件或者在线工具可以预测与3‘-UTR结合的protein？谢谢freecell 参考此文： http://www.springerlink.com/content/q877h6000762p0h2/#section=794249&page=1zitong1983 freecell wrote:参考此文： http://www.springerlink.com/ ...

caoyu19841026 请问哪位做过大鼠活体内行RNA干扰（最好是针对血管内皮），具体步骤是？有没有好的公司可以推荐？谢谢。我的邮箱是caoyu1379934@sina.comfreecell 自己检索一下。此类文献汗牛充栋： http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/16725144caoyu19841026 谢谢指点！本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都 ...

douermm :)战友们好，我最近想做RNAi的实验，目的是使胃癌细胞的一个相关基因沉默，然后看干扰后的细胞耐药性的大小。想请教该用什么方法合成siRNA最合适？像我这样的实验是不是应该稳定转染呢？我现在对于合成途径很迷惑，化学合成一般的公司都是两千左右；体外转录书上说比较便宜，但是我不知道何得到模板及体外转录都需要具体做什么 还有相应的钱数；也考虑用质粒载体，那个质粒是怎么得到的呢，需要怎么做呢。是不是用不同的方法 ...

waterbeijing 请问能从网上在线查到人或鼠的内源性siRNA表达谱吗，多谢版主zhujoker留言:人或鼠的内源性siRNA表达谱 是你自创的吧？是什么意思啊？问问题怎么也不表述清楚？waterbeijing sorry, I mean whether there is some database or any research detecting expression profiles of endogenous siRNAs (endogenous-small-inte ...

AlloY 用什么办法能预测出来呢？谢谢!shilei5794749 UCSC genome browser - genes and gene predication tracks - sno/miRNA trackDescriptionThis track displays positions of four different types of RNA in the human genome:precursor forms of microRNAs (pre-miRNAs)C/D box small nucleolar RNAs (C/D b ...

紫石榴 最近在研究心肌缺血对某microRNA的调控，有文献报道在原代细胞中随时间下调，我用的是H9c2心肌细胞系做的，想做个验证，顺便找最佳干预点。考虑经费问题，所以先用RT-PCR的方法做趋势，再上real time。我是提取总RNA，定量后（量和纯度都还好），用过茎环引物逆转录，再PCR电泳的，但做出的结果与设想趋势不符，且重复性很差，不知道哪里不对。麻烦高手指导下。版主zhujoker留言:RT-PCR这种半定量是不 ...

cxm_7910 我是第一次作RNA干扰。我用1640培养基培养贴壁细胞，但RNA干扰试剂说明书上说最好用OPTI-MEMI低血清培养基来稀释siRNA和脂质体。请问可以用1640稀释吗？干扰后什么时候测mRNA和蛋白含量？谢谢！霍一刀hxs 最好用OPTI-MEM。瞬时转染，一般48小时之后检测。teagerxl 用1640无血清转染也可，刚开始做可以做一个时间梯度。mRNA和protein不同步。cxm_7910 谢谢！本文 ...

sahalafeisha 我要做心血管方面的实验，想要构建microRNA过表达和反义核酸病毒载体，请问用腺病毒还是慢病毒，二者之间有什么区别。谢放各位高手！song333 most people use lentivirus,lenti is RNA virus, can integrate into host genome for long term assay; can infect into nondividing cells; high efficiency; easy to make virus.zhuj ...

jian_an1 园内有没有人知道 MiRNA表达谱的数据库.谢谢了zhujoker http://www.ebi.ac.uk/这个网站有。请仔细查找。artneer http://www.ebi.ac.uk/gxa/我最近刚好在做方面的工作希望能多多交流啊本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming