RNA实验技术

yolanda0818 一边文章刚确定的miRNA启动子，我能用吗，用再验证吗.MBC的文章freecell 应该 需要先验证，再引用。zhujoker 这个我认为得看你要怎么做这个实验了，如果仅仅做miRNAs的生物学或者说是其下游的研究，我想大可不必验证之类的。但是你要做miRNAs的调控的话，我认为你应该是需要验证，但是这样的话会增加的你的实验的难道以及花费，并且如果你不能从其他方面进行论证说明的话你的文章以后也不会 ...

rainbubu 谢谢大家？急切需要答案freecell 这些东西自己那么急于要为什么不能亲自动手，Google搜索一下呢？一个理想的基因组DNA文库应具备下列条件：重组克隆的总数不宜过大，以减轻筛选工作的压力载体的装载量最好大于基因的长度，避免基因被分隔克隆克隆与克隆之间必须存在足够长度的重叠区域，以利克隆排序克隆片段易于从载体分子上完整卸下重组克隆能稳定保存、扩增、筛选参考:www.dlujpk.com/gene/ ...

麻果果 我想对某一序列的基因进行沉默，在知道DNA 序列号的情况下，能否设计出针对mRNA的siRNA序列？是生物合成的还是化学合成的转染效率要好一些，用什么样的转染载体教实惠？lalala_2004 提交你的基因，找专门的公司搞定，他们有现成的siRNA库。威斯腾 有的文献是用化学合成的，这样比较快，但是都是瞬时转染，载体比较好的目前是病毒载体。可以和我联系，我的邮箱是sc-western@163.comzhujoker 其实si ...

myskite 网站预测了某个microRNA有两个不同的靶基因，而且，这两个基因都已证实与某一种疾病相关，并两基因间存在相互调控机制。我应该如何设计实验呢？zhujoker 这个说起来很简单啊，但是操作起来是比较麻烦的。首先我还是建议你先用生物信息学软件，多用几个预测一下，因为需要实验验证是比较麻烦的事情。如果可以我建议你分为以下几步来验证你的实验：1.首先构建miRNAs表达质粒！构建质粒注意事项请参考丁香园相应 ...

yinfengzhizi 请问克隆测序出新的microRNA分子，如何知道它的hairpin precursor sequences？freecell try this:http://microrna.sanger.ac.uk/sequences/help/submit.shtmlyinfengzhizi freecell wrote:try this:http://microrna.sanger.ac.uk/sequences/help/submit ...

轩竹 请教：miRNA原位杂交中寡核苷酸Tm值的计算？有没有哪位同仁知道LNA修饰的寡核苷酸探针的Tm值应该怎么计算？我看到有些文献上说每增加一个LNA Tm值增加1-8°C，范围太大了，有没有有关的计算公式？急求！！！邮箱地址:xuanzhu1985@sina.commomo8208 帮您顶！帮您顶！轩竹 Post is deletedhp69813031 有一个网站可以计算，我以前还用过，但是我找了半天都没有找到，你自己在找找看。freec ...

jiliki 那里能够检查线粒体tRNA赖氨酸基因上发生1个A8344G突变，该基因与MERRF（伴破碎红纤维的肌阵挛性癫痫）相关。谢谢，有人知道的吗？slytjiaofei 可以咨询一下温州医学院遗传教研室，他们那里专门做线粒体疾病的。jiliki 谢谢啊，问问看baiyongheng http://zjmglab.org/本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师 ...

lily18902 初学MicroRNA/RNAi,看些哪方面的书或是质料好些？谢谢各位！freecell 建议先用micrRNA/RNAi在CNKI搜索，看些中文综述，熟悉了怎么回事后，再看英文综述。另外： “质料“应该是”资料“， 东北人好像都发成“质料” 8D路得自己走 哈哈！同意先看中文综述啊！zywm008 《生物化学实验》 ，《生物化学和分子生物学实验指南》很少谈及microRNA的。-----版主文献是要看的，但是如果完全是刚刚接触我建议最好 ...

kunyushan 遇到一个问题，请达人帮助解答一下，以解心中疑惑。如有人已验证A基因在某种细胞是B微RNA的靶点，若在我的目的细胞系中，用B微RNA模拟或抑制物进行研究，并进一步检测A基因在mRNA及蛋白水平的改变，请问这是否有意义？因未见到这样的文献，故请教。SHIIHS 我认为miRNA对基因是多对一的作用模式，所以不一定有会有mRNA及蛋白水平的改变。如果你验证末改变，可能说明还有别的miRNA对这个mRNA ...

heartknot2001 向经常看文章的站友们问一个问题。针对Bcl2的抗凋亡作用，谁看过其上游是否有什么转录调控因子可以控制Bcl2表达的文章？或者是有，但是文章并没有充分证明，仅仅是提示可能而已？还是它不受调控呢？能回答的详细些吗？或者你手头就有这样的文章，能发给我看一下吗？我的邮箱：heartknot2001@yahoo.com.cn谢谢你的帮助freecell http://scholar.google.ie/sc ...

路得自己走 microRNA功能研究策略最近查了点关于miR功能（抑制）研究方面的文献，先说两句，抛砖引玉吧！1.细胞或在体水平应用AMO抑制miR功能。这是人工合成一段与成熟miR互补的序列与其结合，抑制其作用。优点：作用明确；操作简单。缺点：作用时间有待延长。2.基于转基因的KD：优点：作用稳定。可用于转基因动物。缺点：设计制作麻烦。（1）“反义序列”的应用：利用慢病毒合成一段成熟miR互补序列，对目标miR进行抑制。作用相 ...

zhang666fengg 急需Src siRNA干扰Src过程以及Src与NEDD4-1在胶质瘤信号转导方面的相关图片，谢谢doctormy Src siRNA干扰过程：Small interfering siRNA duplexes for Src was obtained from Dharmacon (Lafayette, CO). A scrambled sequence was used as a negative control. Transfection of siRNAswas performed ...

tanbo110 1：Mda-7/IL-24基因是不是就是MDA-7翻译后得IL-24蛋白啊？2：MDA-D-74基因我查了GENBANK为什么查不到呢？HUMO的我看了最近看了篇 Cloning and characterization of SARI (suppressor of AP-1, Regulated by IFN).的问题hanyanyan1015 我也查不到，到底能不能查到啊。freecell The melanoma differentiation-asso ...

skybjp123 各位大哥大嫂，小弟最近在找寻 cathepsin K B L S 的相关转录因子，不知道有哪些呀？哪位牛人可否赐教，谢谢啦～～还有就是sp1是什么？兔子的sp1的基因序列怎么查不到啊？也请赐教～～谢谢～～skybjp123 另外还有就是：转录因子是怎么测定含量的？用荧光定量PCR技术可以吗？可信吗？happytears 1、转录因子可以先用相关软件预测，如TFbind TFsearch TFfact2、Sp1转录因子是参与真核细胞转录的高 ...

shelb352 我在课题中对一个转录因子的研究主要是研究转录因子及受到其调控的下游基因的功能研究，那用什么方法能发现调控这个转录因子基因表达的上游基因？是否能用酵母双杂交方法（了解不是很清楚）哪位高手能否帮忙回答一下，谢谢。shelb352 有谁能否帮忙回答一下？doge 首先声明，不是高手，仅发表个人拙见一般来说，可以找到与此转录因子同源的转录因子，看看是否在类似的信号通路上，以此来推断调控这个转录因子的上游蛋白，包 ...

小长 近一两年，microRNA作为肿瘤生物标记的文献层出不穷。microRNA真的能准确地诊断早期癌症吗？这样的诊断成本有多高？诊断要花费多长的时间？3年内会不会有一天，microRNA真的成为临床上诊断早期癌症的常规手段？要知道，目前早期癌症都是可以治疗的。癌症治疗的困难只在于，当诊断出癌症的时候，病人已经是晚期了。3年内，人类能战胜癌症吗？大家讨论一下microRNA在癌症诊断上的前景吧。有意思的话题，1分鼓励 ...

icexue82 请问 poly (IC) 这种双链RNA 的长度是多少bp啊我以前好像在哪里看过，说poly（IC）是长度不等的片段，不知道是不是，现在找不到那篇文献了，请了解的各位帮忙，给个确定的答案。因为我想用同位素标记poly (IC)，做个EMSA，所以如果poly (IC)长度不均一的话，那我做出来的结果不是有很多条带？icexue82 请大家帮个忙啊，难道没有人知道么？decrest 据我所知，poly（IC）是人工合成的长度不一的双链D ...

赵敏 我自己有课题,想开展 miRNA方面的工作,需要学习一下,可以考虑去做博士后，大家知道，给推荐几位!eagledfy 南开杨荣存做得还不错，但人品不咋地。zhongnannan911 北京军事医学科学院放射所 郑晓飞研究员zxyapple 陈润生院士本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴师兄微信号：shixiongcoming

huxiaopenga 急！！！谢谢fzybb2003 我也准备做这样的课题，问过生物公司说要5-6万，请做过的战友也来说一下，申请经费的时候心里比较有数。gzlabtong 我以前在的公司就是专门做RNA干扰的，从设计SIRNA到包出该片段的病毒大概要30000左右，你自己要买一抗和该基因的克隆，做功能学实验，如果你要做动物实验还要考虑动物的费用。大概跟楼上的兄弟差不多bioyoung 构建载体4~5k病毒包装1.5~2w这是 ...

桂花树 已购买了Cell signaling 公司siRNA Kit，试剂盒含有已合成的目标基因siRNA序列，最近要将siRNA通过试剂盒提供的转染试剂转入人的肿瘤细胞，在实验中怎样防止siRNA降解。zgfwindman 全部的东西都用无酶的就好了zhongkui 关键是要有钱，有钱就可以买一次性的无污染试剂和用品。有钱就可以独占一个操作台或操作间，等等等等，嘿嘿：）桂花树 RNA干扰实验所用的培养板、枪头、EP管等是否要用DEPC ...