在基础科研领域,mRNA、IncRNA、circRNA、miRNA是科研界的宠儿,吸引着无数科研狗们前仆后继。打开pubmed搜索RNA的文章,许多篇都有RNA荧光原位杂交(RNA-FISH)的身影,然而受限于实验仪器,技术或者经费的影响,对于一些硕博生们,RNA-FISH始终如那海市蜃楼,可望而不及。没关系,今天科研狗小助手带你手把手做RNA-FISH。一、原理荧光原位杂交(fluorescence in situ hybrid ...
提到单细胞测序,相信各位小伙伴们都很熟悉,真是又爱又恨的一个技术啊,爱它既能帮助我们解决很多科研问题,同时也是对它的价格暗暗咬牙;大家莫慌,今天小编就给大家一个神器——单细胞混样测序,让大家用小经费就能轻轻松松发表5分左右的文章。单细胞Mix(混样)测序产品是基于10x Genomics和BD Rhapsody平台,利用寡核苷酸偶联的抗体孵育不同的样本,为不同的样本标记上不同的标签,然后将多个样本混合在一起,按照单一样本 ...
样本RNA提取、去除残留DNA及RNA质检后,我们需要决定是否以及如何去富集感兴趣的RNA。总RNA中含有大量的核糖体 RNA (rRNA),约占总RNA 80 – 98%的比例。对绝大多数 RNA-Seq 应用来说,需要去除 rRNA 或富集mRNA,以将测序资源集中在转录组所需的部分并节省成本。除核糖体 RNA 外,样本还可能含有其他丰富的转录本,例如,血液样本中的珠蛋白 mRNA 可占所有 mRNA 分子的 30 – 80%。如果不除去这些占比很大的globin mRNA,我们测序 ...
非编码RNA(Non-coding RNA)是指不编码蛋白质的RNA,包括miRNA、lncRNA、circRNA、piRNA等。非编码RNA发挥功能的方式很多,可以与蛋白、DNA和RNA相互作用,参与多种细胞活动,主要包括基因的激活和沉默,RNA的剪接、修饰和编辑,蛋白质的翻译等。1. miRNA:miRNA是一类由内源基因编码的长度约为22个核苷酸的非编码单链RNA分子,它们在动植物中参与转录后基因表达调控。每个miRN ...
实测植物总RNA提取液套装提取土豆、桑叶中的RNA一直以来,搞植物研究的同学们对Trizol试剂提取植物RNA诟病不断,在这样的背景和需求下,我们特别研发了植物总RNA提取液套装,套装中除了植物总RNA提取液外,还包括了BufferEX(氯仿替代品),RNA沉淀液(异丙醇替代品)以及β-巯基乙醇。真可谓一个套装在手,提取植物RNA无烦恼!现在我们特别选择了土豆块茎(Trizol试剂提取失败)和桑叶(Trizol试剂 ...
上一期,我们为大家介绍了—Visium 空间基因表达解决方案-样本冰冻包埋指南,本期我们将为大家介绍冰冻切片制备指南!满满的干货,记得收藏哦!首先,为大家推荐一款用于Visium空间基因表达解决方案的冰冻切片机——Leica CM1950! 其电动切片、步进马达确保冷冻切片的厚度、质量及切片间一致性;精细的定位控制可以满足对细微组织的精密切割;强大的制冷系统为切片温度提供了有力保障!在基于配备了CM1950冰冻切片机的条件下 ...
正所谓“九层之台,起于垒土”,同样,要想拿到优秀的空间转录组实验结果,样本制备也是至关重要的!目前10x Genomics推出的Visium空间基因表达解决方案,支持新鲜/冷冻切片,优化升级后还可以支持FFPE样本,甚至结合免疫荧光染色。今天小编着重为大家介绍一下Visium 空间基因表达解决方案样本冰冻包埋的那些事儿!Visium 空间基因表达解决方案支持的样本类型目前,10x Genomics官网已经测试过的组织类型包括: ...
原位杂交实验流程常规脱蜡至水洗。制作湿盒:用5×SSC(35ml)+甲酰胺(35ml)置于湿盒内。30%H2O21份+9份纯甲醇混合液室温处理10min。DEPC水洗3次,每次1min;切片置于湿盒内,用0.2mol/L盐酸滴于组织上,常温15min,用DEPC水洗2次,每次1min(盐酸可中和带电荷的碱性蛋白,降低背景)蛋白酶K覆盖组织,分子杂交仪中37℃20min。蛋白酶K可以消化和暴露被遮蔽的靶核酸,增加探针的结合效率 ...
第 1 步:从包装中取出粪便收集器,并从两侧剥离粘合贴第 2 步:将粪便收集器放在马桶座圈上,用力按压粘合贴以固定。第 3 步:将样品存放到粪便收集器上第 4 步:拧开收集管盖,并用勺子收集一勺样品注意:不要倒掉液体保护剂第 5 步:拧紧瓶盖。反复颠倒摇晃 10 次以上以确保护剂和样品完全混合。样品已采集处理好,准备运输吧!ZymoBIOMICS 工作流程受到微生物群落的影响可能是一场噩梦,收集和分析会给您的个人资料分析带来混乱和不实陈述,但是 ZymoBIOMICS 可 ...
第 1 步:打开包含唾液收集管和 Shield 试剂的包装第 2 步:请将唾液充满至 2 ml 左右的标准线第 3 步:打开 DNA / RNA Shield 管,然后把保护剂倒入刚刚承载样品的收集管中。第 4 步:然后拧掉 V 字漏斗,拧上新盖第 5 步:倒置 5 - 10 次样品已稳定,可以运输,可以用于核酸存储或纯化!ZymoBIOMICS 工作流程受到微生物群落的影响可能是一场噩梦,收集和分析会给您的个人资料分析带来混乱和不实陈述,但是 ZymoBIOMICS 可以消除工作流程中的不变,您可以准确地分析微生物群落,验 ...
第 1 步:打开包含棉签和收集管的包装。第 2 步:剥开棉签包装并取出棉签第 3 步:擦拭口腔上下牙龈来回 3 次。第 4 步:打开收集管,然后将棉签插入保护剂并折断,拧好盖子。样品已稳定,可以运输,可以用于核酸存储或纯化!ZymoBIOMICS 工作流程受到微生物群落的影响可能是一场噩梦,收集和分析会给您的个人资料分析带来混乱和不实陈述,但是 ZymoBIOMICS 可以消除工作流程中的不变,您可以准确地分析微生物群落,验证工作流程的准确性及质量,比较您的结果,以 ...
自 1998 年 Fire 和 Mello 首次提出 RNAi(RNA interference,RNA 干扰) 概念以来,越来越多的人开始重视小 RNA 的研究,之后 RNAi 在基因功能的研究中也得到广泛应用。RNAi 是一种存在于真核生物中的转录后基因沉默现象,在生物进化过程中能够抵御病毒感染及防止基因组中由于逆转座子元件扩增引起的不稳定。在 miRNA(microRNA)、siRNA(small interfering RNA) 等小 RNA 的介导下,RNAi 能够特异性地调控 mRNA 基因在 ...
实验准备:1. 动物组织样本2. 研磨器或液氮,研钵3. 无水乙醇,氯仿4. 移液器及配套RNase-Free无菌枪头(200 μl ,1ml); 1.5 ml,2.0ml 离心管(RNase-free)5. 涡旋振荡器,台式低温离心机实验准备-试剂盒准备:第一次使用前应在去蛋白液RD、漂洗液RW中加入无水乙醇,加入量请参见瓶上标签。在加入无水乙醇后在瓶身做好标记。
实验准备:1. 植物样品(10-20 mg),研钵,液氮2. 无水乙醇,β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器(DNase I 配置),移液器及配套RNase-Free无菌枪头(200 μl ,1ml) 1.5 ml,2.0ml 离心管(RNase-free)4. 通风橱 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机
实验准备:1. 石蜡组织块2. 无水乙醇,β-巯基乙醇,二甲苯3. 移液器,配套无菌枪头(200 μl ,1ml), 一次性无菌注射器(Dnase I配置)4. 通风橱 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机
实验准备:1. 新鲜血液样品( 200 μl )2. 无水乙醇,β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器(DNase I配置),移液器及配套RNase-Free无菌枪头(200 μl ,1ml) 1.5 ml,2.0ml 离心管(RNase-free)4. 通风橱 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机
以下操作按照天根产品 DP432 植物总 RNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 植物样品(10-20 mg),研钵,液氮2. 无水乙醇,β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器(DNase I配置),移液器及配套RNase-Free无菌枪头(200 μl ,1ml) 1.5 ml,2.0ml 离心管(RNase-free)4. 通风橱 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机本文版权归天根生 ...
实验准备:1. 动物组织(50-100 mg)2. 无水乙醇 ,β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器(DNase I 配置),移液器及配套RNase-Free无菌枪头(200 μl ,1ml);1.5 ml,2.0ml 离心管(RNase-free)4. 通风橱 研磨器 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机
实验准备:1. 细菌培养液,溶菌酶(RT401,客户自备,提取细菌总RNA时需配备。)2. 无水乙醇 ,β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器(DNase I配置),移液器及配套RNase-Free无菌枪头(200 μl ,1ml)1.5 ml,2.0ml 离心管(RNase-free)4. 通风橱 涡旋振荡器 台式低温离心机