DNA实验技术

1．目的学会用限制性内切酶切割质粒DNA。2．原理II型限制性内切酶能识别双链DNA内部的特殊序列并在识别位点处将双链切断，形成粘性末端或齐平末端，通过电泳酶切后的DNA混合物能够确认和分离酶切片段。3．器材旋涡混合器，微量移液取样器，移液器吸头，1.5ml微量离心管，双面微量离心管架，水漂，恒温水浴。4．试剂Pinpoint™xa-3质粒，EcoR V，BamH I，内切酶缓冲液（10×），10×电泳加样缓冲液，荧光染料。5．实验 ...

Dear ×××（某外国机构名称）,Thanks you for your kind assistance to our research project.I am an associate professor in ×××××××××（国内研究所或大学机构名称，最好不要用公司，以免被怀疑商业目的） and also member of the State Key Laboratory. And one of my projects focuses on ××××××（简单一句介绍实验目的）. Isolating cells seems to be a problem hard to g ...

丙烯酰胺凝胶电泳　　聚丙烯酰胺凝胶电泳是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的电泳方法。在这种支持介质上可根据被分离物质分子大小和分子电荷多少来分离。聚丙烯酰胺凝胶有以下优点：①聚丙烯酰胺凝胶是由丙烯酰胺和N，N'甲叉双丙烯酰胺聚合而成的大分子。凝胶有 格子是带有酰胺侧链的碳-碳聚合物，没有或很少带有离子的侧基，因而电渗作用比较小，不易和样品相互作用。②由于聚丙烯酰胺凝胶是一种人工合成的物质，在聚合前可调节单体的浓度比，形成 不同程 ...

2，3－DPG：2，3－diphosphatidylglyceric acid，2，3－二磷酸甘油酸2－CdA：2-chlorodeoxyadenosin,cladribine，2－氯去氧腺苷3H－TdR：tritiated thymide，氚标记胸腺嘧啶核苷5－Aza：5-azacytidine，5－氮（杂）胞苷a2-PI：a2-antiplasmin, a2－纤溶酶原抑制物AA：aplastic anemia，再生障碍性贫血AAV：aden ...

做了好事——下载了，要留名啊！http://g.zhubajie.com/urllink.php?id=2594627fbvwb0br3hfv59kfPrefaceGene therapy and vaccination with nucleic acids is one of the most striking innovations in medical and veterinary sciences. The treatment of a disease on the level of genes rather than on t ...

目录在苹果机（Macintosh）上的安装与升级 05通过因特网升级 06软件安装 07网络安装 08疑难解答 12在PC机（Windows）上安装与升级 17通过因特网升级 18软件安装 19从 EditSeq 开始 21从 GeneQuest 开始 31从 MapDraw 开始 44从 MegAlign 开始 54从 PrimerSelect开始 65从 Protean 开始 78从 SeqMan II 开始 89L A S E R G E N Ef o rWi n d o w s & M a c i n t o s hDNASTA R I n c . ( 6 0 8 ) 2 5 8 - 7 4 2 0 f a x : ( 6 0 8 ) 2 5 8 - 7 4 3 9e m a i l : s u p p o r t @ d n a s t a r. c o m在苹果机（Macintosh）上的安装与升级通过因特网升级必备条件 6下载升级程序 ...

外源DNA和质粒载体的连接反应外源ＤＮＡ片段和线状质粒载体的连接，也就是在双链ＤＮＡ５'磷酸和相邻的3'羟基之间 形成的新的共价链。如质粒载体的两条链都带5'磷酸，可生成４个新的磷酸二酯链。但如果质粒ＤＮＡ已去磷酸化，则吸能形成２个新的磷酸二酯链。在这种情况下产生的两个杂交体分子带有２个单链切口，当杂本导入感受态细胞后可被修复。相邻的５'磷酸和３'羟基间磷酸二酯键的形成可在体外由两种不同的ＤＮＡ连接酶催化，这两种酶 ...

号召大家参加2004年“中国BBS社区100强”评选,支持丁香园! 请点击http://it.icxo.com/100bbs投票作为医药生命科学的唯一代表，丁香园已经被设定为此次活动的投票选项，真诚希望大家支持我们，投上您庄严的一票！2004年“中国BBS社区100强”评选全球互联网第二次发展热潮已经降临，国内外风险投资家都在大规模搜寻投资对象，据世界权威的IT评测机构--世界IT实验室2004年10月研究报告显示：互联 ...

关于菌株的基因型符号http://www.takara.com.cn/product/2004/n/n-16fh11001.html野生的大肠杆菌（E.coli）的基因组DNA中有470万个碱基对（bp)，内含4288个基因。E.coli基因组中还包含有许多插入序列，如λ-噬菌体片段和一些其他特殊组份的片段，这些插入的片段都是由基因的水平转移和基因重组而形成的，由此表明了基因组具有它的可塑造性。利用大肠杆菌基因组的这种特 ...

From:http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=75&id=5304778&sty=1&tpg=1&age=01.国立生物技术信息中心(NCBI)图谱浏览器(Map Viewer)可以通过NCBI主页进入NCBI的人类图谱浏览器，网址为http://www.ncbi.nlm.nih.gov/。点击右栏标有“Human map viewer”的超级链接即可进入图谱浏览器的主页。页面上端的符号标明此为Build 29，或 ...

1．目的学会CaCl2法制备大肠杆菌感受态细胞。2．原理细菌在0℃ CaCl2低渗溶液中胀成球形，丢失部分膜蛋白，成为容易吸收外源DNA的状态。3．器材旋涡混合器，微量移液取样器，移液器吸头，50ml 微量离心管，1.5ml 微量离心管，双面微量离心管架，台式冷冻离心机，制冰机，恒温摇床，分光光度计，超净工作台，恒温培养箱，摇菌试管，三角烧瓶，接种环。4．试剂E. coli XL1-Blue，LB培养基，0.1 mol/L CaCl2溶液，无菌ddH2O5 ...

The race to the US$1,000 genome heated up today as Life Technologies, based in Carlsbad, California, announced that it will debut a new sequencing machine this year that will eventually be capable of decoding entire human genomes in a day for less than $1,000. The machine, called the Ion Proton, will be the s ...

摘要： 随着人们对疾病治疗观念的转变，治疗的重点已经由直接杀伤外源性病原体转向调整生物机体自身功能，从而免疫增强剂在医学的应用引起广泛的关注，免疫增强剂的研究已成为应用医学最活跃的研究领域之一。虽然免疫增强剂的种类繁多，不下十几类上百种，但是理想的免疫增强剂并不多见。本文介绍了4种常用免疫增强剂-矿物质硒，中草药黄芪，微生物制剂卡介苗，抗寄生虫药物左旋咪唑的研究新动态，同时还介绍了4种热门免疫增强剂-胸腺肽、核酸制剂 ...

丁香园医学网站创立近三年，其间积累了大量的文献资料和信息资源，但大部分都分散在各个专业版块，难以给人以整体化、综合化的认识。为了更方便大家总结、利用这些资料信息，我们很早就着手准备《丁香园医学电子期刊》（暂定名）的筹备工作。《丁香园医学电子期刊》（暂定名）从逃、hashimoto等主任的初建，到yangster主任从多个角度的完善，这其中得到了许多热情的战友、主任们的大力支持并提出许多有建设性的建议，特别是版主yan ...

Modified Yeast TransformationInoculate cells from an overnight culture into 50 ml YEPD and incubate at 30°C with shaking. Typically, add 0.1 to 0.2 ml saturated culture in the evening to get an of OD600 = 1 to 2 the next morning.Transfer enough of this culture to 300 ml YEPD to produce an OD6oo=0.2 (ca. 20 mls.). Inc ...

寄主蛋白指导农杆菌介导植物转化农杆菌在植物转化中已被广泛应用。因为起自然的转移外源DNA到寄主基因组的能力。它同时也是一个重要的植物病原物，这个病原体在几个农杆菌重要的物种中导致crown gall disease ，包括葡萄树、石榴、坚果树。在侵染寄主植物后，细菌从他肿瘤诱导的质粒中转移几种VIR蛋白和T-DNA到寄主细胞。在VIR蛋白的协助下，TDNA转移到寄主细胞的核中并且整合进寄主基因组中，当致癌基因在TDNA ...

美国科学促进会将基因芯片技术列为 1998 年度自然科学领域十大进展之一，足见其在科学史上的意义。现在，基因芯片这一时代的宠儿已被应用到生物科学众多的领域之中。它以其可同时、快速、准确地分析数以千计基因组信息的本领而显示出了巨大的威力。目前在文献上可查到的生物芯片的应用有基因表达谱、HLA分型、SNP分析、丙型肝炎分型、物种鉴定、DNA测序、连锁不平衡作图、HIV-1诊断、BRCA1突变分析、炎症分析、线粒体基因组分析、囊 ...

引言：基因表达谱常被称为是某一生理/病理现象的“分子图像”。这类复杂的“分子图像”，可用于同时检测成千上万个基因的表达水平，再经专门的计算机软件解读出来。研究人员通过比较源于不同病理条件下的“分子图像”的结果，可以识别出引发癌症等复杂疾病的标志物(Marker)。目前，这些标志基因(Marker genes)还有待于大量工作对其作进一步验证。许多科研人员已把注意力投向密度相对较低的功能分类基因芯片(focused DNA mic ...

calcium phosphate transfection protocl：1.Split 293FT cells about 30% confluence, overnight.2.Thaw undefinedHBS room temperature (not in 37 C).3.For 10cm dish:1.5ml tube, 4ug packaging plasmid A, 4ug packaging plasmid B, 4ug expression plasmid, 61ul of 2M CaCl2,Mix properly, and then add distil ...

Some DNA Replication animations:http://www2.kenyon.edu/Depts/Biology/courses/biol14/slides/slides-2.htmlhttp://www.irn.pdx.edu/~newmanl/DNArepl1.movhttp://www.mhhe.com/biosci/genbio/animation_quizzes/graphics/lem6s2b.ramFrom t ...