DNA实验技术

此方法是我在国外的一个实验室工作时所用的。简单、批量、转化效率高。Simple and Efficient Method (SEM) to Make Competent CellsPreparation of Frozen Competent of DH5α1) 250 ml TB solution10mM Pipes or 10 mM Hepes, 0.65g15 mM CaCl2, 0.55g250 mM KCl, 4.66undefined55 mM MnCl2, 2.47gAll the components except for MnCl2 were mixed and the ...

资料太多，时间有限，只整理了这些，才知道分子生物学何其博大精深。第一次整理，经验不足。申请加分。;)分子生物学理论和书http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=1205089&sty=3&keywords=%B7%D6%D7%D3%C9%FA%CE%EF%D1%A7http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=105&id=552642&sty=3&keywords=%B7%D6%D ...

认领翻译的战友请跟帖注明“认领本文翻译，48小时内未完成，请其他战友认领！”欢迎大家认领校对，校对质量优秀者享受加分，投票，并奖励 5 个丁当请根据自己专业背景选择认领，如使用翻译软件翻译，被发现者扣分1-2分经常认领而不能及时提供优质稿件者将被列入黑名单，取消认领资格，请大家注意！新近参与本次活动的会员请查看：http://news.dxy.cn/bbs/topic/21537141寻找最近的翻译贴请查看：http://sear ...

这里是2010年1月份回复为0的帖子，由于各种原因沉淀了下去。为了发挥DXY的资源优势和互助传统，特此整理，请各位战友积极应助，加分从优！如果您是发帖者，并且有了很好的解决办法，也最好能发帖上来，这样，便于后来者再遇到类似问题的时候能够向您学习！thanks！1.请站友们推荐一个可免疫筛选cDNA表达文库方案。http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=64&id=16306123&sty=1&t ...

FISH操作前为石蜡包埋组织切片推荐的预处理程序试剂：2% 3-氨基丙基三乙氧基硅烷(3-aminopropyltriethoxysilane， Sigma)、丙酮、二甲苯、酸性亚硫酸钠（sodium bisulfite ）、蛋白酶K、2XSSC、0.1M HCl、70%乙醇、85％乙醇、100％乙醇预处理程序：1.将载玻片浸入2% 3-氨基丙基三乙氧基硅烷(3-aminopropyltriethoxysilane， Sigma Chemical Co., St. Lo ...

转基因动物基本概念转基因老鼠的命名1转基因老鼠的命名2外源基因导入方式及检测flox/cre recombination system 转基因动物基因打靶与核移植结合生产乳腺反应器转基因动物BALB/C小鼠质粒转基因EGFP转基因小鼠的检测转基因检测失败的原因细胞转基因丁酸钠增强基因表达bFGF的问题1bFGF的问题2AAV转基因植物转基因植物基因组DNA Southern Blot农杆菌介导的水稻转基因程序载体马铃薯 ...

DNA芯片技术基因芯片（又称DNA芯片、寡核苷酸芯片等）最早由E． Southern在1989年提出。其突出特点在于高度并行性、多样性、微型化和自动化。高度的并行性 可大大提高实验的进程，有利于DNA芯片技术所展示图谱的快速对照和阅读。多样性 在单个芯片中可以进行样品的多方面分析，提高了分析的精确性，避免因不同实验条件产生的误差。微型化 可以减少试剂用量和减小反应液体积，从而提高样品浓度和反应速率。高度自动化 可以降低制造芯片的成 ...

最近想从cDNA文库中钓一个基因出来，但是在PUBMED上搜索，出现很多的序列。以前我也遇见过这样的情况，但是没怎么注意，只是找到自己想要得，但是今天一个同学和我说，他找的序列结果发现没注意仔细鉴别，可能是别的基因。那么就是说，用PUBMED搜索的结果里有的不是这个基因了。不知道应该怎么确定哪个基因序列是你要的??(?)另外，打开一个序列，里面除了序列以外有很多别的东西，有的能明白，有的不知道是什么，比如：（1）STS 95 ...

pEGFP-N1质粒图谱及信息多克隆位点区Restriction Map and Multiple Cloning Site of pEGFP-N1. (Unique restriction sites are in color or bold.) The Not I site follows the EGFP stop codon. The Xba I site ~undefined) is methylated in the DNA provided by CLONTECH. If you wish to digest the vector with this enzyme, you will need to transf ...

基因工程的诞生基因工程是分子水平对生物遗传作人为干预，要认识它，我们先从生物工程谈起：生物工程又称生物技术，是一门应用现代生命科学原理和信息及化工等技术，利用活细胞或其产生的酶来对廉价原材料进行不同程度的加工，提供大量有用产品的综合性工程技术。生物工程的基础是现代生命科学、技术科学和信息科学。生物工程的主要产品是为社会提供大量优质发酵产品，例如生化药物、化工原料、能源、生物防治剂以及食品和饮料，还可以为人类提供 ...

碱裂解法从大肠杆菌制备质粒，是从事分子生物学研究的实验室每天都要用的常规技术。每个曾经用碱法抽提过质粒朋友，希望你看本文后能有所收获。 为了方便理解，这里罗列一下碱法质粒抽提用到三种溶液：溶液I，50 mM葡萄糖 / 25 mM Tris-Cl / 10 mM EDTA，pH 8.0；溶液II，0.2 N NaOH / 1% SDS；溶液III，3 M 醋酸钾 / 2 M 醋酸。让我们先来看看溶液I的作用。任何生物化学反应，首先要控制好溶液的pH，因此用适当浓度的和适当pH值的Tris-Cl溶液，是再自然 ...

【交流】做了很多不一定清楚的知识----质粒提取的原理碱裂解法从大肠杆菌制备质粒，是从事分子生物学研究的实验室每天都要用的常规技术。可是我收研究生十几年了，几乎毫无例外的是我那些给人感觉什么都知道的优秀学生却对碱法质粒抽提的原理知之甚少。追其原因，我想大概是因为《分子克隆》里面只讲实验操作步骤，而没有对原理进行详细的论述。这是导致我的学生误入歧途的主要原因。后来我发现其实是整个中国的相关领域的研究生水平都差不多， ...

1.启动子基础知识http://www.dxy.cn/bbs/thread/1930452http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/58370_0.html2.怎样找到启动子http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/176817_0.htmlhttp://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/176860_0.htmlht ...

基因组学相关软件列表1、基因组组装分析：phred, phd2fasta, phrap, consed, arachne, RePS　　2、功能注释：glimmer, genewise, genscan, fgenesh, BGF, tRNAscan-SE, MicroRNA, sim4, InterproScan, GO, WEGO, Promoter 2.0, Disembl　　3、重复序列：Repeatmasker, ReAS　　4、比较基因组：cross_match, blastall, blastz, blat, Fasta, CA ...

http://61.167.57.67/dwhx/dwhx_26/教育网内都可在线看第八节 分子生物学技术 (1:21)一、 DNA重组技术 (0:48)DNA重组技术定义 (1:37)DNA重组技术别称 (0:11)（一）DNA重组技术的基础 (1:37)1.核酸的制备 (0:52)2.限制性内切酶 (0:36)限制／修饰系统 (0:32)限制性内切酶 (0:16)I型限制性内切酶 (0:31)Ⅱ型限制性内切酶 (1:08)EcoRI的识别序列 (0:47)限制性内切酶切割DNA的方式 (0:2 ...

Transheep小编发现GraphPad Prism不仅简单易学而且可以搞定大部分医学研究所需的统计与作图，所以今天总结了几种常用统计图的做法，教您轻松快速地做出漂亮的统计图，您只需花很少的时间看完这个教程就可以彻底摆脱excel笨拙的作图功能了。废话不多说让我们正式开始。 1. 折线图折线图最为统计图中很常见的一类图，它的特点是可以显示随时间而变化的连续数据，因此每个数据点都有一个相应的X轴值和Y轴值，所以我们在 ...

主要试剂及溶液的配制细菌培养基:1)LB液体培养基:胰蛋白胨10克酵母提取物5克氯化钠10克以950ml去离子水溶解，用5M的NaOH 调pH值至7.0(约0.2ml)，最后以去离子水定容至1L。高压灭菌15磅 20分钟，4℃保存。2)LB固体选择性培养基:LB液体培养基 1L琼脂 15g高压灭菌后，室温放置，待液体温度约50℃时， 加入50mg/ml的氨苄青霉素1ml，使氨苄青霉素的终浓度为50ug/ml。将培养基混匀后在超净台内分别倒 ...

Nucleic Acids Research是做生物信息学和分子生物学必读的文章，许多文章本身就是经典的protocol，这里收集2003年最热门的文章，希望大家能喜欢，这里包括最热门的文章，最热门的数据库，最热门的方法学文章，以及Nucleic Acids Research上自从创立以来阅读最多的文章。TOP STANDARD CATEGORY PAPERS, 2003Short hairpin type of dsRNAs that are controlled ...

前一段时间一直在做酶切连接,特别难连,做了两个月,终于被我揪出来了,现就我所遇到的问题和我自己的摸索,经验,教训,一一列出来,希望对大家有所帮肋.我做的是酵母双杂交,需构建的是目的片段B接入载体PM中,以及目的片段A接入载体PVP中.其中B 1130bp,A 3760bp.1.多扩几管,得大量的高保真PCR产物.(多扩几管,因为后面的实验中你会发现每切一次产物越来越少)2.PCR后进行切胶纯化(这步必须切胶纯化,因为决不可在产 ...

大肠杆菌的基因型甲基化相关的基因型dam (DNA adenine methylase)Map position: 74 min功能：dam基因表达DNA腺嘌呤甲基化酶，它能催化特异序列GATC中A的甲基化，保证DNA免受限制性核酸内切酶Mbo I的切断，同时在DNA复制时也起一定的辅助作用。dam基因的变异导致腺嘌呤（A）甲基化酶活性的缺失，使腺嘌呤 (A) 不被甲基化，易于获得非甲基化质粒。dcm (DNA cytosine methylase)Map po ...