DNA实验技术

Saghai-Maroof MA Soliman KM Jorgensen RA & Allard RW (1984) PNAS 81:8014-8018 DNA successfully isolated from fungal species of Cochliobolus Aternaria and Fusarium. The key elements in this ...

Map-Based Cloning of KAM2 Map-based cloning of the KAM2 gene was performed essentially as described previously (Tamura et al. 2005). We used codominant cleaved amplified polymorphic sequence markers ( ...

Michael Koelle's LabDepartment of Molecular Biophysics and Biochemistry Yale University http://info.med.yale.edu/mbb/koelle/protocols/protocol_subcloning.html ...

Hi there Is anyone know how short of the CpG island can be? let say if the CG sequence of about 30bp is that possible the short CpG sequence be methylated? Thanks you! Pine -pine- ------------------- ...

同步双酶切是一种省时省力的常用方法。选择能让两种酶同时作用的最佳缓冲液是非常重要的一步。NEB每一种酶都随酶提供相应的最佳NEBuffer，以保证100%的酶活性。NEBuffer的组成及内切酶在不同缓冲液中的活性见《内切酶在不同缓冲液里的活性表》及每支酶的说明书。能在最大程度上保证两种酶活性的缓冲液即可用于双酶切。由于内切酶在非最佳缓冲液条件下的切割速率会减缓，因此使用时可根据每种酶在非最优缓冲 ...

MassPREP自动酶切仪操作步骤 一 开机前检查： 1 检查仪器台面（DECK）上所有的实验材料（Labware）。 2 检查SystemWater 水桶的水位。 3 检查恒温循环水浴（Chiller）水箱的水位，并定期更换或填充Chiller 中的循环水。 4 倒掉废液桶中的废液。 二 开机步骤： 打开Chiller、Heater、仪器及计算机电源，进入WinPREP程序 ： 1 仪器初 ...

CTAB TECHNIQUE / Method / Schedule / Protocol (JPB) FOR DNA ISOLATION / DNA EXTRACTION FROM PLANT LEAF / LEAVES SAMPLES (see also if both DNA and RNA are needed) Reagents needed CTAB buffer 2% CTAB&nb ...

载体：携带外源DNA 进入宿主细胞的工具。 一、载体的功能 1.运送外源基因高效转入受体细胞。 2.为外源基因提供复制能力或整合能力。 3.为外源基因的扩增或表达提供条件。 二、载体应具备的条件 1.具有对受体细胞的可转移性。 2.具有与特定受体细胞相适应的复制位点或整合位点。 3.长度尽可能小，以提高其载装能力。 4.具有多种单一的酶切位点。 5.具有合适的选择性标记。 附图： ...

This protocol originated in Murray and Thompson (1980) and then was modified by Richard Jorgensen and finally published in Wagner et. al 1987. 1.Start with about 10 grams fresh needles. 2.Chop into s ...

下面的简单方案是Clhen等（1972）所用方法的变通方案，常用于成批制备感受态细菌，这些细菌可使每微克螺旋质粒DNA产生5x106-2x107个转化菌落，这样的转化效率足以满足所有在质粒中进行的常规克隆的需要。该方法完全适用于大多数大肠杆菌菌株，并且比方案I快速，重复性更好。该法制备的感受态细胞可贮存于-70℃，但保存时间过长会使转化效率在一定程度上受到影响。 1）从于37℃培养16-20小时 ...

NOTE: THIS IS FINE FOR SOUTHERNS BUT NOT FOR SCREENING BY PCR. (from Ruixia 7/99 from protocol by Stef Oehen 7/94). 1. Put 1 cm tail in 1.5 ml microcentrifuge tube. 2. Add 500µl Tail Buffer an ...

Day 1 1. Digest DNA for 6 hours (or overnight) BSA 10 mg/ml 0.5 22.65 μl of 10 μg Genomic DNA RnaseA 10mg/ml 0.1 in TE mixed to 7.35 μl cocktail Spermidine 100nM 0.75 per sample 10X enzyme b ...

本方法有多种用途，主要包括： 从琼脂糖凝胶中分离纯化DNA片段； 从DNA反应物中纯化目的DNA片段，如回收纯化PCR产物、酶切连接反应中的DNA片段； 从探针制备反应物中去除未标记上的核苷酸以及小的DNA片段（比如引物）； DNA浓缩、去盐及去除杂质。 本试剂盒的主要成分“基因纯”试剂是无毒、无味、无腐蚀作用的白色颗粒，能专一性结合0.2kb到50kb大小的DN ...

1.Inoculate a couple of 20 ml LB broth in a 125 ml flasks with 0.5 ml of an overnight culture of the recipient strain. 2.Shake at 37℃ until O.D. 600=0.13 - 0.15 (1 - 2 hours). Measure by taking ...

一、实验目的 ： 1、 掌握质粒DNA 分离，纯化的原理 2、 学习煮沸法快速提取质粒DNA 的方法 3、 学习DNA的限制性酶切的基本技术 4 、 学习利用琼脂糖电泳测定DNA片段的长度 二、实验原理 在基因工程中，DNA 分子的切割是由限制性内切酶来完成的。限制性内切酶能识别特定的DNA 序列，在一定的条件下切断双链DNA 。限制性内切酶的作用效率是受多方面因素影响的，如反应温度，缓 ...

Buffer TfbI pH5.8 500ml1.47g KOAC ...

20世纪50年代Watson和Crick提出了DNA双螺旋结构模型，标志着分子生物学作为一门独立学科的诞生，70年代以来，分子生物学已成为生命科学领域最具有活力的学科前沿。由于分子生物学理论和技术方法不断地被应用于临床，在疾病和预防、预测、诊断、疗效地评价等多方面发挥着愈来愈重要的作用。分子生物学与临床医学的广泛交叉和渗透，产生了一个崭新的学科方向—分子医学；70年代末，美国科学院院士 ...

DNA Isolation by a Cleared Lysate Method Followed by Double Acetate Precipitation Version 3b - updated September 26 1999 The Most Recent Roe Lab Implementation (by Feng Chen Hau-Qin Pan and Fu Ying) A ...

Two protocols are given here. The first one is used for BAC library screening on filters although is also suitable for Transfer hybridizations. PREPARATION OF HYBRIDIZATION SOLUTION Prehybridizati ...

Localization of particular sequences within genomic DNA is usually accomplished by the transfer techniques described by Southern (1975). Genomic DNA is digested with one or more restriction enzymes an ...