DNA实验技术

电泳前半小时进行以下工作： 1．检查冷凝系统，确认管道连接密闭，不漏气。 2．在电泳槽内加入约2.2升合适的电泳液。 3．接通主机和冷凝泵电源，开启主机开关，主机自检结束后，开启冷凝系统开关按“set temp”键调节需要的电泳温度，按“actual temp”显示实际温度。调节泵的速度为“100”左右。 半小时后： 4 ...

高效液相色谱作为一种高效、快速的分离分析技术，具有灵敏度高、选择性好的特点，能解决医药分析领域中的诸多复杂问题。如何正确使用及排除故障，将直接影响整个高效液相色谱仪的质量和分析结果的可靠性。 本公司使用的LC-10AD岛津高效液相色谱仪，其主要由LC-10AD泵、SPD-10A紫外检测器、N2000色谱工作站组成。而故障常发生于泵和紫外检测器。 一、泵的故障及排除方法 1、泵压力变化较大或没有流动 ...

毛细管电泳(capillary electrophoresis CE)又叫高效毛细管电泳(HPCE) 是近年来发展最快的分析方法之一。1981年Jorgenson和Lukacs首先提出在75μm内径毛细管柱内用高电压进行分离 创立了现代毛细管电泳。1984年Terabe等建立了胶束毛细管电动力学色谱。1987年Hjerten 建立了毛细管等电聚焦 Cohen和Karger提出了毛细管凝胶电泳 ...

一、原位杂交( In Situ HybridizationISH) 是用标记的核酸探针，使用非放射检测系统或放射自显影系统，在组织切片、细胞涂片及染色体制片上等对核酸进行定性、定位和相对定量研究的一种分子生物学方法，具有灵敏、特异、直观等优点。已逐渐成为分子生物学和分子病理学的常见技术之一，广泛应用于肿瘤生物学、血液病理学、遗传、微生物学、细胞和分子生物学、神经内分泌学、免疫学等领域及治疗评估和 ...

材料方法 1.材料： 1.1材料来源：取自健康成人行骨髓内固定术扩髓前收集骨髓腔内骨髓。 1.2主要试剂： DMEM培养基 胎牛血清（FBS） β-甘油磷酸钠（β-GP） 维生素C 青链霉素 胰蛋白酶（1:250）-EDTA 1.3主要仪器设备 双人超净台 Farma Scientific美国 单人超净台 Farma Scientific美国 二氧化碳孵箱 Far ...

1、实验目的： 学习与掌握DNA电泳的技术方法，利用琼脂糖凝胶电泳检测DNA纯度、含量以及分子量，及分离不同大小DNA片段。 2、实验原理： 电泳概念及种类~2• 电泳： 是指带电粒子在电场中向与其自身带相反电荷的电极移动的现象 电泳基本原理 迁移率（或泳动度）是指带电颗粒在单位电场强度下泳动的速度，可用下列公式计算： Ｕ =υ/E =(d/t)/(V/l) =dl/V ...

一、目的： 学习醋酸纤维薄膜电泳的操作，了解电泳技术的一般原理。 二、原理： 带电质点在电场中移动的现象称为电泳。电泳现象早在19世纪初期就被人们发现了，并用于胶体化学中，但是电泳技术的广泛应用则在20世纪40年代左右。近年来各种类型的电泳技术发展十分迅速。例如，纸电泳、醋酸纤维薄膜电泳、纤维素或淀粉粉末电泳、淀粉凝胶电泳、琼脂糖凝胶电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳等。在电泳形式上更是丰富多样，有在 ...

A. Process gel 1. Electrophorese sample in agarose gel 0.5 to 1 cm thick 0.5-1.2%. 2. Expose gel to UV light for 1 min on 265 nM light box (or depurinate in 2 vol of 0.25M HCl for 2X15' and rinse in d ...

Pulsed Field Gel Electrophoresis Preparation of Chromosome-sized Yeast DNA Molecules in Solid Agarose (Modified from Schwartz and Cantor CELL 37:67 1984 ) 1.Grow 5 ml yeast culture in YPD Broth to &qu ...

Preparation of gel for Posi blot transfer 1、Cut gel to size of preexisting mask or cut new mask. 2、For depurination: put gel in pyrex dish add 500ml .25N HCl (10mL conc. HCl+450ml H2O) and shake 15min ...

毛细管电泳技术（Capillary Electrophoresis CE）又称高效毛细管电泳（HPCE）或毛细管分离法（CESM），毛细管电泳方法虽新工艺，但历史悠久，它是在电泳技术的基础上发展的一种分离技术。电泳作为一种技术出现，已有近百年的历史，但真正被视为一种在生物化学中有重要意义的技术，是由1937年A. Tiselius 首先提出。传统电泳最大的局限是难以克服由高电压引起的焦耳热，196 ...

要跑琼脂糖凝胶电泳， 5ng 就能很清楚的跑出来是这样吗？能够照相的清楚的条带，至少需要多少量呢？ 参考见解：5ng 已经可以了，但是或许20ng50ng-200ng效果好，在此范围内呈线性。 把210bp的pcr产物进行酶切得到190+20bp的两个片段请问能用琼脂糖凝胶电泳检测酶切结果吗?用多大浓度的胶和多大的电压呢? 参考见解：可以用琼脂糖凝胶电泳分开电压不变可用1.5%到2%的胶20bp得 ...

影响电泳分离的主要因素： 1. 待分离生物大分子的性质：待分离生物大分子所带的电荷、分子大小和性质都会对电泳有明显影响。一般来说，子带的电荷量越大、直径越小、形状越接近球形，则其电泳迁移速度越快。 2. 缓冲液的性质：缓冲液的pH值会影响待分离生物大分子的解离程度，从而对其带电性质产生影响，溶液pH值距离其等电点愈远，其所带净电荷量就越大，电泳的速度也就越大，尤其对于蛋白质等两性分子，缓冲液pH还 ...

What is Electrophoresis? Electrophoresis is a technique used in the laboratory that results in the separation of charged molecules. DNA is a negatively charged molecule and is moved by electric curre ...

What is Electrophoresis? Electrophoresis is a technique used in the laboratory that results in the separation of charged molecules. In this CyberLab we are separating molecules of DNA that we got from ...

胶回收 1. 提高胶回收量的办法： 1) 增加电泳时的上样量。 2) 电泳缓冲液用新鲜配制的。 3) 切胶时尽量只切有条带的胶，减小切胶体积：含目的片断很少的胶就不要要了，不然影响回收率。 4) 把切的两块或多块胶融化后，无论多大的体积都用一个管子，转移到同一个柱子上。 5) 溶胶时所加的溶液可多一点，这样更有利于DNA与膜的结合，不过一般不要多余750μl。 6) 胶回收的关键是通过柱子的 ...

一些注意事项 1.电泳的buffer和gel都是新制的，切胶的台子清理干净，刀片最好洗净灭菌，总之一句话就是保证切下的带没有外源dna污染。 2.切胶是要把整个目的片断所在位置的胶全部回收。为了减少胶的体积，可以用相对比较薄的胶来做，只要够点样即可，也可采用薄而宽的梳子来跑胶。 3.关于防护，在一般有机玻璃后就足够了，戴上防护面具以保护眼睛，如果你戴树脂眼镜就可以了。要是非常害怕紫外照射，或者对于 ...

摘要： 蛋白多肽类药物的药代动力学与传统药物不同，目标蛋白多肽给药量小，而各种内源性蛋白含量很高，这种干扰使准确测量目标分子非常困难。此类研究必须以建立灵敏、专一、准确的测定方法为前提。本文综述了近年来研究蛋白多肽类药物的药代动力学各种分析方法，包括生物检定法、同位素标记示踪法、免疫分析法、液相色谱、气相色谱、毛细管电泳、质谱、核磁共振、液相色谱2质谱（LC2MS） 和毛细管电泳2质谱（CE2MS ...

摘要多肽抗生素是生物界中广泛存在的一类生物活性小肽，一般具有抗细菌或真菌的作用，有些还具有抗原虫、病毒或癌细胞的功能。按照化学结构的不同，多肽抗生素可分为5 类： ①具有螺旋结构的线性多肽； ②富含某种氨基酸的线性多肽； ③含有一个二硫键的多肽； ④含有两个或两个以上二硫键的多肽； ⑤羊毛硫抗生素。根据作用机理的不同，多肽抗生素又可分为裂解细胞膜的裂解肽和非裂解肽。多肽抗生素已经开始用于医药、食品 ...

摘要综述了近几年来多肽类物质的提取分离与分析方法， 主要包括高效液相色谱法、电泳、质谱及核磁共振等方法在肽类物质研究中的最新应用进展。