DNA实验技术

Discovery频道推出：探索遗传学的奇异世界以及双胞胎独有的特质

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质粒、噬菌体等经酶切，电泳；PCR产物经电泳后，常常需要对一些DNA电泳片段进行回收和纯化，用于亚克隆、探针标记等。DNA回收和纯化常用方法有压碎法、低融点琼脂糖法、冻融法等，也有现成的试剂盒供应。

定点诱变(DpnI法)：每条引物都要携带有所需的突变位点，引物一般长25~45bp,设计的突变位点需位于引物中部。

链霉菌质粒DNA的小量提取：1、将适量的菌体悬浮于500μl溶菌酶溶液（2%）中，37℃温育1hr 左右至完全溶菌，2、加入500μl碱性SDS溶液（0.3mol/L NaOH 2%SDS），立即振荡混合完全，

silica回收DNA片段：在长波紫外灯下切下含有目标DNA的琼脂糖凝胶， 用纸巾吸干凝胶表面的液体并切小。计算凝胶的重量。

片段凝胶回收之试剂盒回收(离心法)：在长波紫外灯下切下含有目标DNA的琼脂糖凝胶，用纸巾吸干凝胶表面的液体并切小。计算凝胶的重量，该重量作为一个凝胶体积。

氯化锂抽提质粒法：前四部同苯酚/氯仿溶液抽提法（用Solution I II III处理），加等体积的异丙醇，混匀，沉淀DNA，12000rpm离心7min.去上清，尽量去干净。

关于我们生命的秘密：遗传物质的复制、转录和表达，即中心法则。

本视频主要介绍什么是DNA，基因之谜，染色体、DNA的功能，人类的基因、变异和进化。

本视频主要介绍什么是DNA，基因之谜，染色体、DNA的功能，人类的基因、变异和进化。

Period基因（第三部分）

Period基因

VHCDR3基因文库和VL基因的扩增：设计并合成含有CDR3随机化序列的VHFOR引物。 配制2个50ul PCR反应混合液，1个用于VH基因的扩增。

PCR剪接VHCDR3基因文库和VL基因构建scFv基因文库：用于连接scFv和pHENl DNA以及将scFv文库电转化到大肠杆菌TGl株的试剂和设备FDSEQ引物。

构建人VH基因节段文库：配制3个各自独立的50ul PCR反应混合液，包含……在有加热盖的热循环仪内加热反应物到94℃，5分钟……在1.5%琼脂糖胶上胶纯化VH基因文库并用Genecleall试剂盒提取DNA.

再扩增VH基因文库添加3‘限制性位点并克隆创建VH基因节段文库：用于连接scFv和pHENl DNA以及将scFv文库电转化到大肠杆菌的试剂和设备。