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凝胶迁移实验系列一-基本知识问题与回答

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动物组织细胞基因组DNA提取

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SSR简单序列重复标记是由一类由几个核苷酸为重复单位组成的长达几十个核苷酸的重复序列,广泛分布在染色体上。由于重复单位的次数的不同或重复程度的不完全相同,造成了SSR长度的高度变异性,由此而产生SSR标记或SSLP标记。

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系列一介绍的DNA斑点杂交的实验方法,本文举例介绍DNA斑点杂交技术在具体实验的运用方法。

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DNA斑点杂交系列(一)-实验方法

斑点杂交(Dot blot)是将被检标本点到膜上,烘烤固定。一张膜上可同时检测多个样品,市售有多种多管吸印仪,样品加到孔中,在负压下就会流到膜上呈斑点状或狭缝状。反复冲洗进样孔,取出膜烤干或紫外线照射以固定标本,这时的膜就可以进行杂交。

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分子杂交的概念和基本原理

分子杂交(molecular hybridization)指具有一定同源序列的两条核酸单链(DNA或RNA),在一定条件下按碱基互补配对原则经过退火处理,形成异质双链的过程。利用这一原理,就可以使用已知序列的单链核酸片段作为探针,去查找各种不同来源的基因组DNA分子中的同源基因或同源序列。

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利用两条不同来源的多核苷酸链之间的互补性而使它们形成杂交体双链叫核酸杂交。与核酸杂交技术相对应的另一项技术被称为探针技术。将探针技术与分子杂交技术相结合,从而使分子杂交技术得以广泛推广应用。

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