DNA实验技术

相关专题 成功走出第一步：DNA提取 λ噬菌体是最早使用的克隆载体，λ噬菌体的基因组是一长度约为50kb的双链DNA分子，它在宿主细胞有两种生活途径，其一是裂解生长，环状DNA分子在细胞内多次复制，合成大量噬菌体基因产物，装配成噬菌体颗粒，裂解宿主菌再进行下一次感染;其二是溶源性生长，即感染细胞内λ噬 ...

相关专题 在microRNA的研究中，生物信息学发挥越来越重要的作用，以下是microRNA相关的数据库与预测、功能分析软件，绝对值得收藏。 1.miRBase: http://www.mirbase.org miRBase序列数据库是一个提供包括已发表的miRNA序列数据、注释、预测基因靶标等信息的全方位数据库，是存储miRNA信息最主 ...

相关专题 基因敲除可以说是基因组学、细胞分离培养以及转基因技术的组合。那么基因敲除的原理是什么呢？基因敲除的方法有哪些呢？在此，做个小结，以供大家学习。 一.概述： 基因敲除是自80年代末以来发展起来的一种新型分子生物学技术，是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术。通常意义上的基因敲除主要是应用DNA 同源重组原理，用设计的同源片 ...

相关专题 北京百泰克—国内自主研发核酸提取与PCR相关试剂盒商家PCR实验室产品选择指南 为检验BioTeke公司实时荧光定量试剂(SYBR GreenⅠ)质量，本次实验分别采用国际知名的ABI公司(ABI Power SYBR Green PCR Master Mix)、TOYOBO公司(Realtime SYBR GreenⅠPCR Ma ...

相关专题 PCR实验室产品选择指南 记得当初写本科论文，感到不知道讨论什么问题好。愣是写了一大段的PCR条件摸索的讨论。后来PCR成为实验最基本的一步了，但是发现在PCR中还是有许多需要注意的地方。PCR的第一步就是引物设计了。引物设计需要注意的地方很多，在大多数情况下，我们都是在知道已知模板序列时进行PCR扩增的。在某些情况比如构建文库的时 ...

相关专题 PCR实验室产品选择指南 NEB公司研发的VentR和Deep VentR DNA聚合酶都是克隆于海底高温喷泉的微生物，其耐热性能和保真性能远高于Taq DNA聚合酶。VentR的半衰期在100°C时是1.8小时，是Taq DNA聚合酶的18倍，而Deep VentR则对高温的耐受性更强，半衰期是8小时。两者的保真性能是Taq DN ...

相关专题 本文介绍了新型纳米孔测序法这项新技术的优胜之处以及加州大学和哈佛大学研究人员对其猜想验证和实验的过程。 四种纳米孔测序技术示意图 新型纳米孔测序法(nanopore sequencing)是采用电泳技术，借助电泳驱动单个分子逐一通过纳米孔来实现测序的。由于纳米孔的直径非常细小，仅允许单个核酸聚合物通过，因而可以在此基础上使用多种 ...

相关专题 质粒提取经常因操作不当引起提取的质粒不纯，或遇到各种问题，本文归纳了几个质粒提取过程中常见的问题及参考见解供大家参考。 质粒提取过程中常见的问题及参考见解 1、涂布棒在酒精蘸一下，然后烧一下，能不能保证把所用的菌烧死? 参考见解：涂布棒可以在酒精中保藏，但是酒精不能即时杀菌。蘸了酒精后再烧一小会，烧的是酒精而不是涂布棒。建议涂布棒 ...

相关专题 本文讲述了用CTAB-PVP法提取RNA的几点方法的改进，可提高提取得到更完整和纯度更高的RNA产物。 RNA CTAB是一种强变性剂，变性效果优于SDS，能够有效除去蛋白(含复合蛋白)等杂质。此外，与常规的CTAB法比较，本方法还有如下改进： 1) 在提取液中加入较高质量浓度的PVP。这不仅能有效地去除棉花组织中的酚类物质和多 ...

相关专题 本文给大家详细讲述了核酸分离与纯化过程中材料与方法的选择与其原则，不同的方法可以达到不同的要求，方法的选择会对核酸的产量及完整性等有不同的影响。 核酸分离纯化的材料与方法的选择 细胞内的核酸包括DNA与RNA两种分子，均与蛋白质结合成核蛋白(nucleoprotein)。DNA与蛋白质结合成脱氧核糖核蛋白(deoxyribonu ...

相关专题 本文介绍了从组织或细胞中分离纯化RNA的简单实验步骤，并列举了一些提取RNA过程中常见失败的原因供大家参考。 实验步骤： 1. 取50~100mg的组织加入1 ml Trizol试剂，用匀浆器打匀(Trizol 先放于冰上)。 2. 将匀浆室温放置5 min。 3. 加入200 μl 氯仿剧烈震荡混匀30s，冰上静置3mi ...

β-氨基酸，又称作3-氨基烷基羧酸，是指氨基连在羧酸的β位的氨基酸，除没有β位的甘氨酸外，其余19种α-氨基酸都有对应的β-氨基酸。根据侧链在β-氨基酸上的位置，β-氨基酸可分为β3-，β2-以及β23-氨基酸，几种β-氨基酸的化学结构如Fig.1所示。与α-氨基酸相比，其 ...

最近有一些战友对荧光原位杂交技术比较感兴趣，我整理了相关资料和自己的心得，和大家交流一下。不妥之处，请大家指出，共同讨论学习。 内容发布在丁香园和螺旋网上，有兴趣的战友也可以去那里看一下。 内容分三部分： 一、概述 1、克隆性染色体异常是肿瘤的特征 2、染色体异常常见的类型 3、染色体异常的检测方法 二、荧光原位杂交及其探针 1、荧光原位杂交的原理 2、荧光原位杂交的探针 三、荧光原位杂交探针的 ...

EMSA是一个比较复杂的试验技术由于工作原因接触这个试验技术到现在也有三年多的时间了做了大概也有几百次吧 那倒理想的试验结果的同时也碰到了很多莫名的问题和结果到现在为止还有没有解决的找不到原因的一个问题呵呵! 现和smalldonkey商量一下将我对这个实验技术的总结和一个心得写出来给大家分享批评指正。EMSA实验技术作为一个经典的DNA/proteinRNA/protein的检测技术不是很多简 ...

DNA片段的克隆需要合适的载体，载体或是质粒，或是噬菌体，或是病毒，通常大多经过人工改造，载体上常有筛选标记，如对抗菌素的抗性，某些基因产物的显色反应等。 一、质粒 常用的有pBR322，pUC系列质粒等。 （ ...

做了好多DNA提取保存，吃了很多亏给大家点建议吧：（有疑问可以回帖，有时间我会回答如果我知道）。 血液保存：EDTA抗凝最好，肝素也可以不过经常会影响后续试验，一般可以保存在-20和-80保存3-5年没有问题——保存时间越长似乎dna提取越少，再长时间我也没有试过，注意解冻一次大概损失20%左右（提取感觉估计得到的可能不准），放的时间长也会降解一些。4°做好不要太 ...

做动物实验，最先要做的事情就是要养好动物。掌握好动物饲料、饮水及其生活环境，这对于动物实验的成功是最基本的保证。这是看似一个平常，但却有着不少细节的问题。为了本版广大站友能在整体上提高对实验动物饲养的认识，做好动物实验的第一步，特此开设本贴讨论动物饲养的问题。希望大家能踊跃参与，以更多的实例来充实、丰富本贴。 拟分以下几个方面来讨论： 第一，实验动物的选择概述 第二，实验动物如何辨雌雄 第三，实 ...

1、核酸抽提原理 简单地讲，核酸抽提包含样品的裂解和纯化两大步骤。裂解是使样品中的核酸游离在裂解体系中的过程，纯化则是使核酸与裂解体系中的其它成分，如蛋白质、盐及其它杂质彻底分离的过程。 经典的裂解液几乎都含有去污剂 (如 SDS、Triton X-100、NP-40、Tween 20 等) 和盐 (如Tris、EDTA、NaCl 等)。盐的作用，除了提供一个合适的裂解环境 (如 Tris)，还 ...

以蛋白质和结构与功能为基础，从分子水平上认识生命现象，已经成为现代生物学发展的主要方向，研究蛋白质，首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。蛋白质的制备工作涉及物理、化学和生物等各方面知识，但基本原理不外乎两方面。一是得用混合物中几个组分分配率的差别，把它们分配到可用机械方法分离的两个或几个物相中，如盐析，有机溶剂提取，层析和结晶等；二是将混合物置于单一物相中，通过物理力场的作用使各组分分配 ...

网络 第五节　产前诊断 　　产前诊断（prenatal or antenatal diagnosis）又称宫内诊断（intrauterine diagnosis）是对胚胎或胎儿在出生前是否患有某种遗传病或先天畸形作了准确的诊断。产前诊断的适应症的选择原则，一是有高风险而危害较大的遗传病；二是目前已有对该病进行产前诊断的手段。几种主要产前诊断方法如下： ...