相关专题 DNA连接与转化 DNA胶回收电泳时通常选择跑大孔的琼脂糖凝胶。对于大孔的琼脂糖凝胶,电泳之后的待回收DNA条带通常分布面积较大,弥散且不够清晰,给后续的切胶和回收带来不便。尝试用小孔加样方式对待回收DNA样品进行琼脂糖凝胶电泳,取得了不错的效果。 选择两种不同长度的待回收DNA样品(约800 bp和1700 bp),分别用小孔和大 ...
相关专题 生物芯片技术从诞生以来就受到相关科研人员的广泛关注与认同,是未来10年最具发展潜力的技术。本文从生物芯片的特点、分类、制备步骤、发展动向、相关仪器、各种芯片之间的差别等方面对这一技术进行全面介绍。 一、生物芯片的定义 生物芯片(Biochip或Bioarray)是指包被在固相载体上的高密度DNA、抗原、抗体、细胞或组织的微点阵(m ...
相关专题 仅仅不到三十年的时间,聚合酶链式反应PCR席卷了生命科学研究,成为了许多生物实验室必备的实验技术。虽然其基本前提——扩增目的DNA样品——不变,但近年来出现了不少创新,将这一技术发展到了许多应用领域,比如利用定量PCR分析特异性RNA转录的拷贝数,来确定基因表达水平。另外基因组研究的发展也促使研究人员增多了PCR的应用,比如缩小重 ...
相关专题 近年来,尽管测序技术在快速发展,但DNA提取方法却鲜有改进。对于宏基因组研究,这是必需的一步。然而,许多微生物无法在实验室中培养,这成为分析大量微生物样品的一个主要瓶颈。参与美国NIH的人类微生物组计划(Human Microbiome Project)以及地球微生物组计划(Earth Microbiome Project)的科学 ...
相关专题 ABI作为PCR仪中最值得信赖的品牌,引领了PCR仪一系列创新性设计革命。Veriti系出名门,秉承了一贯的可靠性,并是真正意义上的梯度多重控温(六合一)梯度PCR仪。 温度梯度PCR仪进展 温度梯度PCR仪最先由eppendorf公司在1998年研发成功推向市场(Mastercycler Gradient),此后Biometra ...
相关专题 明年是聚合酶链式反应PCR技术诞生的三十周年,这项技术为生物学,医学研究领域带来了革新性的变化,被广泛的用于传染病诊断,基因复制,遗传疾病鉴定等等方面。 经过多年的发展,PCR技术越来越完备,虽然其基本程序:变性,退火,延伸并没有发生太大的改变,但是科学家们和技术人员改进了这一方法,也研发出了许多新品种PCR方法,解答了许多此前难 ...
相关专题 在不少生命科学重点实验中,我们都需用到寡核苷酸,因此,掌握寡核苷酸的技术对于整个实验非常重要。本文集合了各个论坛里的兄弟姐妹对寡核苷酸相关实验和概念的经典问题和回答,希望对大家的实验有所启发。 Q1、大家好,最近看文献,发现了反义寡核苷酸、义寡核苷酸、错义寡核苷酸(无意义寡核苷酸),我知道反义寡核苷酸技术,但是什么叫义寡核苷酸、错 ...
相关专题 2012年底,罗氏诊断新推出一款实时荧光定量PCR仪--LightCycler® 96,这款系统的出现丰富并完善了罗氏生命科学领域的LightCycler®实时定量PCR家族产品线。该系统集多重优秀性能为一体,现今已同步在中国上市,并且将在罗氏诊断应用科学部2013年的3-4月的全国巡回技术研讨会上隆重亮相,届时罗氏相关的产品专家 ...
相关专题 Northern Blotting技术专题 I. Electrophoresis clean gel box with NaOH and/or SDS 2 hours to overnight rinse with water prepare Agarose gel solution 1 x MOPS H2O to 95 % of ...
相关专题 Northern Blotting技术专题 1.制胶:(1%) 琼脂糖 2.5g 10×Mops缓冲液 25.0ml H2O 192.0ml 2.在微波炉中加热煮沸使胶完全溶于水并灭菌。 3.取出胶冷却到60℃,于通风柜中加45ml甲醛,混匀。 4.加20μl溴化乙锭,混匀。 5.令胶液再冷却10分钟。 6.将其倒入四面封好的 ...
相关专题 Northern Blotting技术专题 一、 RNA提取 方法一、改良异硫氰酸胍提取法 试剂及其配制 异硫氰酸胍变性液: 贮存液-在含484ml 水(经DEPC处理) 17.6ml 0.75mol/L柠檬酸钠(pH7.0)和26.4ml10%Sarkosyl的溶液中加入250g异硫氰酸胍,加热至60~65℃并持续搅拌使之充分溶解 ...
相关专题 Northern Blotting技术专题 Abstract: This is the standard and complete Northern blotting protocol including preparation of RNA gel RNA sample and probe hybridization detec ...
相关专题 Northern Blotting技术专题 Prepare glass plates for gel: Rinse plates with cold water then clean with dishwashing liquid and warm water. Do not scratch plates. Rinse with ...
相关专题 Northern Blotting技术专题 (original protocol by R. M. Fourney S. Miyakoshi R. S. Day III and M. C. Peterson (Focus 10:1) modifications of this protocol were carried out by ...
相关专题 Northern Blotting技术专题 by Michael Koelle and Tory Herman adapted from Sambrook et al. "Molecular Cloning" We found that both formaldehyde and glyoxal gels work very wel ...
相关专题 Northern Blotting技术专题 1)硝酸纤维素膜或尼龙膜上的组织印迹1.在塑料板上放置两层Whatman 1号滤纸,在滤纸上方放上一张普通纸,然后铺上一层尼龙膜。2.用双面刀片从植物组织如大豆的茎上切取一块切片(厚度约为1mm)。如果组织表面是湿的,则在Kimwipes纸上轻轻吸干或先用蒸馏水洗涤几秒钟然后再用Kimwip ...
相关专题 DNA连接与转化那些实验室常用的克隆载体 蛋白标签(proteintag)是指利用DNA体外重组技术,与目的蛋白一起融合表达的一种多肽或者蛋白,以便于目的蛋白的表达、检测、示踪和纯化等。随着技术的不断发展,研究人员相继开发出了具有各种不同功能的蛋白标签。目前,这些蛋白标签已在基础研究和商业化产品生产等方面得到了广泛的应用。 美国Ge ...
相关专题 基因组DNA文库有十分广泛的用途,如用于分析、分离特定的基因片段,用以基因表达调控、人类及动植物基因组工程的研究。通常情况下,基因组文库构建的基本流程可以归为4大步骤:分离基因组DNA、对基因组DNA作相关的处理、将基因组DNA片段连接入载体、将重组载体转入宿主细胞。 一、分离基因组DNA(gDNA) 毫无疑问,优质的基因组DNA ...
相关专题 最近需要做几个菌的16srDNA PCR,也用了变性梯度凝胶电泳(DGGE),由于新手初来乍到,请教了几个师兄,现将有关16srDNA的提取以及DGGE检测实验操作步骤总结下。 一 样品总DNA的提取 1 实验器材:玻璃器材,铝盖,1.5mL离心管,螺口管,锆珠,搅拌器,4℃离心机。 2 实验试剂:PBS(0.05M,pH=7), ...
相关专题 原理 针对核酸序列的分析就是在核酸序列中寻找基因,找出基因的位置和功能位点的位置,以及标记已知的序列模式等过程。在此过程中,确认一段DNA序列是一个基因需要有多个证据的支持。一般而言,在重复片段频繁出现的区域里,基因编码区和调控区不太可能出现;如果某段DNA片段的假想产物与某个已知的蛋白质或其它基因的产物具有较高序列相似性的话,那 ...