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目录 • 地方病-病症分类 • 地方病基本特征 • 地方病流行特点 • 地方病-预防控制 • 碘缺乏病 • 地方性氟中毒 ...

职业危害因素的来源。常见的职业有关疾病。职业病定义、范围、特点、诊断及处理原则和预防。 目录 • 职业有害因素 • 职业有关疾病 • 职业性有害因素的防制 • ...

心身疾病的定义，特点和发病趋势；有关的危险因素：社会的、心理的、生理的、情感障碍、人格类型；心身疾病的防制。 目录 • 心身疾病的特点和发病趋势 • 与心身疾病有关的危险因素 • 心身疾病的防制 ...

医源性疾病（iatrogenic disease）系指由于医护人员的诊断、治疗或预防措施不当而引起的不利于身心健康的疾病，包括医院获得性感染，药物所致的药源性疾病，长期或大量使用某些药物所致的营养缺乏症等。病人由社会角度转变为病人，当医患关系处理不当时易造成医源性损害。另一方面，医护人员在医疗服务中本身受到各种职业因素影响，例如，在职业接触中本身受到感染，常见的乙型肝炎、肺结核等；接触有害的化学物 ...

一般oligo DNA 分子量计算公式如下：MW=（A碱基数×312）+（C碱基数×288）+（G碱基数×328）+（T碱基数×303）-61 OligoDNA的分子量也可以用以下近似方法计算: OligoDNA中的每个脱氧核苷酸碱基的平均分子量近似为324.5则一条 OligoDNA的分子量=碱基数×324.5。例:您得到一管标为 5OD260nm 的20mer OligoDNA分子量=20×3 ...

一、 建立一个标准的酶切反应目前大多数研究者遵循一条规则，即10个单位的内切酶可以切割1μg不同来源和纯度的DNA。通常，一个50μl的反应体系中，1μl的酶在1X NEBuffer终浓度及相应温度条件下反应1小时即可降解1μg已纯化好的DNA。如果加入更多的酶，则可相应缩短反应时间；如果减少酶的用量，对许多酶来说，相应延长反应时间（不超过16小时）也可完全反应。二、 选择 ...

中华预防医学杂志 2000年第2期第34卷 方法学介绍作者：黎黎　方积乾　伍新尧单位：黎黎(510089 广州市 中山医科大学卫生统计教研室)；方积乾(510089 广州市 中山医科大学卫生统计教研室)；伍新尧(法医学系)　　DNA指纹实验得到的原始数据是各DNA片段在凝胶上的迁移距离，而我们通常感兴趣的则是各DNA片段的长度，因此需要通过迁移距离来计算其片段长度。由于DNA片段越长，在凝胶上的迁 ...

一.九种表达载体Pllp-OmpApllp-STIIpMBP-PpMBP-C pET-GSTpET-TrxpET-HispET-CKSpET-DsbA二.克隆载体pTZ19RDNApUC57DNAPMD18TPQE30pUC18pUC19pTrcHisA pTrxFus pRSET-A pRSET-B pVAX1PBR322pbv220pBluescriptIIKS( )L4440 pCAMBIA ...

概 述一. DNA 的限制性内切酶酶切分析限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA 序列之内或其附近的特异位点上并切割双链DNA。它可分为三类:Ⅰ类和Ⅲ类酶在同一蛋白质分子中兼有切割和修饰(甲基化)作用且依赖于ATP 的存在。Ⅰ类酶结合于识别位点并随机的切割识别位点不远处的DNA，而Ⅲ类酶在识别位点上切割DNA 分子然后从底物上解离。Ⅱ类由两种酶组成: 一种为限制性内切核酸酶( ...

碱裂解法提取质粒是根据共价闭合环状质粒DNA与线性染色体DNA在拓扑学上的差异来分离它们.在pH值介于12.0~12.5这个狭窄的范围内线性的DNA双螺旋结构解开而被变性尽管在这样的条件下共价闭合环状质粒DNA的氢键会被断裂但两条互补链彼此相互盘绕仍会紧密地结合在一起.当加入pH4.8的乙酸钾高盐缓冲液恢复pH至中性时共价闭合环状的质粒DNA的两条互补链仍保持在一起因此复性迅速而准确而线性的染色体 ...

一、目的及要求1． 掌握提取基因组DNA的原理和方法、步骤。2． 了解相对分子质量较大的DNA的琼脂糖凝胶电泳技术。二、实验原理制备基因组DNA是进行基因结构和功能研究的重要步骤，通常要求得到的片段的长度不小于100-200kb。在DNA提取过程中应尽量避免使DNA断裂和降解的各种因素，以保证DNA的完整性，为后续的实验打下基础。一般真核细胞基因组DNA有107-9bp，可以从新鲜组织、培养细胞或 ...

（一）碱变性法提取质粒dna　　质粒(plasmid)是细菌染色体外能自身独立复制的双股环状dna。带有遗传信息，可赋予细菌某些新的表型。将质粒指纹图谱分析方法、质粒dna探针技术及检测质粒的pcr技术用于临床感染性疾病的诊断和流行病学调查已成为现实。质粒作为载体在基因工程中起着重要的作用。　　分离和纯化质粒dna的方法很多但这些方法基本包括三个步骤：即细菌的培养和质粒dna的扩增，细菌菌体的裂解 ...

1.醋酸纤维素薄膜电泳：醋酸纤维素是指纤维素的羟基乙酰化形成的纤维素醋酸酯，由该物质制成的薄膜称为醋酸纤维素薄膜。这种薄膜对蛋白质吸附小，能消除电泳中出现的“托尾”现象。具有分离速度快、样品用量小的特点。适合于病理情况下微量异常蛋白的检测。　　2.凝胶电泳：以淀粉胶、琼脂或琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等作为支持介质的区带电泳法称为凝胶电泳。聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）普遍用于分离蛋白质及较小分子核 ...

洗脱产物的 DNA量很少或没有常见问题 可能原因 建议解决方案所提样品材料老化或反复冻融导致基因组DNA含量下降应选择新鲜的样品材料，如新鲜血液、新鲜菌液、刚离体的动物组织或幼嫩的植物组织等，不能及时处理的样品应立即放入液氮或-70℃低温保存，以免DNA降解。样品破壁或裂解不完全导致基因组DNA未充分释放动、植物材料应在液氮中充分研磨匀浆，G+细菌、酵母等破壁较困难的样品应用溶菌酶、酵母破壁酶或机 ...

植物组织提取基因组DNA 一、材料 幼嫩叶子。 二、设备 移液器，冷冻高速离心机，台式高速离心机，水浴锅，陶瓷研钵，50ml离心管（有盖）及5ml和1.5ml离心管，弯成钩状的小玻棒。 三、试剂 1、提取缓冲液Ⅰ：100mmol/L Tris·Cl pH8.0 20mmol/L EDTA 500mmol/L NaCl 1.5% SDS。 2、提取缓冲液Ⅱ：18.6g葡萄糖，6.9g二乙基二硫代碳酸 ...

Southern 杂交是分子生物学的经典实验方法。该项技术广泛被应用在遗传病检测、DNA指纹分析和PCR产物判断等研究中。该方法的基本原理是将待检测的DNA样品固定在固相载体上，与标记的核酸探针进行杂交，在与探针有同源序列的固相DNA的位置上显示出杂交信号。1.基因组DNA(10-30μg)经限制酶切在1.5ml离心管中依次加入DNA（1μg /μl） 20 μg10×酶切 ...

【原理】 Southern杂交是分子生物学的经典实验方法。其基本原理是将待检测的DNA样品固定在固相载体上与标记的核酸探针进行杂交在与探针有同源序列的固相DNA的位置上显示出杂交信号。通过Southern杂交可以判断被检测的DNA样品中是否有与探针同源的片段以及该片段的长度。 一．基因组DNA的限制酶切 【操作】 DNA (1μg/ml)20μg、10×酶切buffer5.0μl ...

概述Southern杂交可用来检测经限制性内切酶切割后的DNA片段中是否存在与探针同源的序列它包括下列步骤: (1) 酶切gDNA 凝胶电泳分离各酶切片段然后使DNA原位变性。 (2) 将DNA片段转移到固体支持物(正电荷尼龙膜)上。 (3) 预杂交。 (4) 加入探针进行杂交然后漂洗除去非特异性结合的探针。 (5) 显色/X-光片曝光检测杂交信号，即为目的DNA片段。 Southern杂交的成功 ...

原理：CTAB(hexadecyltrimethylammonium bromide十六烷基三甲基溴化铵)，是一种阳离子去污剂具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特性。在高离子强度的溶液中(0.7mol/L NaCl)CTAB与蛋白质和多聚糖形成复合物，只是不能沉淀核酸.通过有机溶剂抽提，去除蛋白、多糖、酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸分离出来。注：CTAB溶液在低于15℃ 时会形成沉淀 ...

RNA提取原理： 通过变性剂破碎细胞或者组织，然后经过氯仿等有机溶剂抽提RNA，再经过沉淀，洗涤，晾干，最后溶解。但是由于RNA酶无处不在，随时可能将RNA降解，所以实验中有很多地方需要注意，稍有疏忽就会前功尽弃。RNA提取的一般步骤所有RNA的提取过程中都有五个关键点，即：样品细胞或组织的有效破碎；有效地使核蛋白复合体变性；对内源RNA酶的有效抑制；有效地将RNA从DNA 和蛋白混合物中 ...