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(1)直接镜检：①直接涂片染色：将标本涂片，固定后用1∶10稀释石炭酸复红染色和革兰氏染色，镜检有无典型弧菌。典型霍乱弧菌互相连接平行排列，有如“鱼群”。②悬滴标本：将标本制成悬滴，镜检细菌动力，最好用暗视野显微镜。霍乱弧菌运动活泼，呈小鱼穿梭状。(2)分离培养：将吐泻物直接或先经碱性胨水增菌后，接种于庆大霉素琼脂等培养基，容易检出霍乱弧菌。应用荧光抗体检测粪便中霍乱弧菌，可于1～2小时内获得结果。(3)血清学检查：可作血清凝 ...

（1）临床检验中血常规、血小板、出、凝血时间要常规检查，对重型病例，增 加检查红血球容积，并根据病情需要，酌加其他化验检查。（2）病毒分离：目前采用C6／36细胞或1～3日龄乳鼠分离方法，乳鼠接种最好 在病人床边进行，可提高阳性率；巨蚊幼虫接种分离病毒，简便安全，检出率高，也可试用。（3）血清学试验：补体结合试验、血凝抑制试验、中和试验的双相血清滴度呈 四倍增长者可判为阳性，单相血清补体结合试验滴度1：32及以上，血抑试验滴度1 ：1280 ...

几种常用特殊PCR技术（一）逆转录PCR（Reverse transcription－PCR,RT-PCR）RNA经逆转录后可作为PCR的模板.逆转录PCR（RT－PCR）常用于基因表达研究（定量PCR）和逆病毒检测．设计RT－PCR引物时，应使引物分别位于不同的外显子中，以便区别cDNA和gDNA扩增产物。（二）多重PCR（Multiple PCR）在同一PCR反应体系中用多对引物（覆盖不同长度的靶序列）同时扩增。例如用多重P ...

血液分析仪目前普及率高，其分析血细胞的质量控制，对于保证检测结果的准确性非常重要。仪器的质量控制做得好，只是血液细胞分析仪全面质量控制的一个方面，并不能完全保证每一份标本检测结果的真实可靠。因此，血液分析仪的质量控制必需贯穿于样本分析的全过程。目前，对血细胞分析仪监控都非常重视，而细胞分析前、后的质量控制也不可忽视。本文对血细胞分析仪分析全程的质量控制进行探讨。 1 材料与方法 1.1 材料 进口全血质控物(日本光电株式会社提供); ...

都柏林念珠菌是1995年命名的新菌种。艾滋病病人易发生口咽部真菌感染，病原菌以白色念珠菌为主。Sullivan等在做病原菌分析中，发现部分白色念珠菌是非典型的。经过分子生物学研究，认为是一种新的念珠菌，定名都柏林念珠菌。由此可知，都柏林念珠菌与白色念珠菌极为相似，以往的方法不能将两者分开。Salkin等分析了10株都柏林念珠菌的生化特征，发现与白色念珠菌不同的是，都柏林念珠菌不能同化α-甲基-D-葡萄糖苷和木糖， ...

现代医学告诉我们，要治愈胃溃疡、十二指肠溃疡和胃炎，关键要查出有无幽门螺杆菌感染。一旦查出这一深藏于胃内的罪魁祸首，便可采取正确的治疗方案，集中“火力” 打歼灭战 ——根除治疗。 　　要检测病人胃内存在的幽门螺杆菌，一般常采用抽血采样、胃镜采样和呼气采样三种检测方法。 　　1、 抽血采样检测：即采用抽血的方法检测血清中幽门螺杆菌的抗体水平。因为受到幽门螺杆菌感染后，可在人体内产生相应的抗体，使检测结果呈现阳性，但是一般需要数月半载才呈阳性，因而 ...

一、基本原理 　　微生物具有容易变异的特性，因此，在保藏过程中，必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态，才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。 　　低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素，所以，菌种保藏方法虽多，但都是根据这三个因素而设计的。 　　二、保藏方法大致可分为以下几种： 　　1．传代培养保藏法 　　又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等（后者作保藏厌氧细菌用），培养后于4—6℃冰箱内保存。 　　2．液体石蜡覆盖保藏法 　　是传代 ...

一、标本的采集尽量采集下呼吸道标本，如下呼吸道吸取物和肺穿刺标本等。采集标本的溶液使用新开封的DMEM或者Hanks（PH7.0，过酸或过碱都会导致病毒的灭活，不利于病毒分离）液，标本采集之后要密封好。送往国家流感中心进行复核的病例标本采集之后直接送检，如要分装，在洁净的BSL-2 生物安全柜内操作。二、核酸的提取疑似禽流感/不明原因肺炎核酸检测各个实验区域应尽量分开，如反应液配制区域、核酸提取区域和检测区域最好分别位 ...

作者：丁丽莎，王翠琴，张萍，柳杨 作者单位： 261041 山东潍坊，潍坊市红十字中心血站 ELISA法具有灵敏度高、特异性强、重复性好的特点，并具有操作简便、无放射性危害的优点，因而多年来广泛应用于血站和医院的实验室中，但在测定中常会出现一些误差和问题。我们通过几年的实验观察，认为影响结果的因素有如下方面。 1 试剂盒 （1）抗原、抗体活性对效价的影响：主要是试剂中抗体（或抗原）的效价降低或失活，结果不易判断。再有ELISA法灵敏度高，对杂质的 ...

作者：陈景芬，张元梅 作者单位： 163461 黑龙江大庆,大庆市第二医院检验科 随着现代临床免疫学不断发展，ELISA法比较灵敏,不需特殊设备,可以定性分析,所以应用发展迅速。ELISA手工法已成为医学检验领域的现实。但在实际工作中，可能会因操作不当而出现一些异常指标。近几年来笔者在免疫室工作中获得一些经验和体会,现介绍如下［1,2］。 （1）待检血清应新鲜或冰冻保存,不能污染,否则可出现非特异性反应；较严重溶血,标本易出现假阳性。 （2）在 ...

一、准备工作对开展细胞培养异常重要，推备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒，培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌，无菌室或超净台的清洁与消毒，培养箱及其他仪器的检查与调试等。1.清洁、消毒、液体直接接触细胞的用品要超净处理——无非必须分子直接接触细胞的用品要彻底消除微生物超净和消毒过的样品要绝对密闭保存，标记消毒时间实验室保持洁净，随时消毒尽量采用商品化一次性用品 ...

开展 PCR 应具有一定的条件。需要一个正规的 pCR 实验室，采集标本、核酸提取、扩增及产物分析应在不同的房间进行；需有严密的防污染措施、假阳性和假阴性结果的质控等。实验者应具有一定的分子生物学理论知识及实验技能，能够及时发现和纠正实验中的问题。目前，我国在 PCR 应用中尤其是在临床诊断中存在问题较多，主要表现为： PCR 试剂的考核、审查工作薄弱，许多单位实验条件不符合要求，部分操作人员的理论和实验知识水平较低。 PCR 的应用范围过宽等，因此造成 ...

ELISA试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在临床上得到了广泛的应用，但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大，如不注意，有可能导致显色不全、花板等结果。我将操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下，以期给同行带来一些启发，提高试验质量。下面分析Elisa试验操作中可能影响结果的原因，并给出相应的解决办法 1 选择试剂 选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。2 加样 ...

在所有RNA实验中，最关键的因素是分离得到全长的RNA。而实验失败的主要原因是核糖核酸酶（RNA酶）的污染。由于RNA酶广泛存在而稳定，一般反应不需要辅助因子。因而RNA制剂中只要存在少量的RNA酶就会引起RNA在制备与分析过程中的降解，而所制备的 RNA的纯度和完整性又可直接影响RNA分析的结果，所以RNA的制备与分析操作难度极大。 在实验中，一方面要严格控制外源性RNA酶的污染；另一方面要最大限度地抑制内源性的R ...

殷 丽(解放军第252医院，河北保定071000) 血小板；聚集功能；检测 R446.11 B 1008-8849(2006)03-0351-02 血小板聚集是血小板的主要功能之一。血小板在执行生理性止血作用的同时，在病理性血栓形成过程中起着先导而关键的作用，因此，检测血小板聚集功能对早期发现是否有血栓形成的危险存在以及阐明相关疾病的机制等有重要意义。1 原 理一般认为血小板的聚集始于各种诱导剂与血小板膜受体之间的相互作用。这种相互作用通过膜的 ...

作者：风清扬精液常规检验为临床检验室常规检测项目，是检查男性不育症原因及疗效观察的主要手段之一，也可以用于男性绝育手术后效果观察和辅助诊断一些男性生殖系统疾病。在近十几年的实际工作中，笔者经常遇到一些问题，例如:应如何正确采集标本;精子活动率是液化后涂片还是新鲜涂片;精子活动力应分几级;液化时间是20～30min还是60min;一次排精是多少为正常等。为使精液常规检验更加标准化系统化，笔者通过参考各类文献及实践 ...

一种新的针对引发宫颈癌病毒的DNA测试，其效果大大优于目前所使用的方法。一些妇科医生希望，这种方法最终能够取代目前使用的宫颈涂片检查和在贫穷国家使用的更为原始的检测方法。　　科学家说，这种针对人乳头状瘤病毒的新测试不仅能挽救生命，而且30岁以上的女性还能不再进行宫颈涂片检查，取而代之每3到5年，甚至10年，进行一次这种DNA检查即可。　　他们的乐观建立在一项历时八年针对13万名妇女的跟踪调查上。这项研究在印度进行，由比尔 ...

（一）培养基培养基是供细菌生长用的，由人工方法将多种营养物质根据各种细菌的需要而组合成的混合营养基质。培养基的基本成分有营养物质、凝固物质、抑制剂和指示剂。常用的营养物质有：蛋白胨、肉浸液、牛肉膏、各种糖类、血液、无机盐、鸡蛋和动物血清、生长因子等。最常用凝固物质为琼脂100ml培养基中加入2~2.5g琼脂可制成固体培养基；100ml培养基中加入0.3~0.5g琼脂可制成半固体培养基。有时也使用明胶、卵白蛋白、血清等作为 ...

1.氧化酶试验 氧化酶或称细胞色素氧化酶，是细胞色素呼吸酶系统的终末呼吸酶。作氧化酶试验时，此酶首先使细胞色素C氧化，然后氧化型细胞色素C再使对苯二胺氧化，产生颜色反应。本试验肠杆菌科阴性，弧菌科、非发酵菌阳性（除个别菌种外）、奈瑟菌属均阳性。 2.过氧化氢酶试验 黄酶系统的呼吸酶最后把氢交给分子氧而形成过氧化氢，过氧化氢对活细胞有毒，过氧化氢酶的作用是使过氧化氢分解为分子态氧。于半分钟内大量气泡产生者为阳性，不产生气泡者为阴 ...

（1）骨髓穿刺部位、方法及注意事项1）骨髓穿刺部位骨髓标本大部分采用穿刺法吸取。常用骨髓穿刺部位一般为：①髂骨后上棘，为临床上首选的穿刺部位；②髂骨前上棘；③胸骨穿刺；④其他部位三岁以下的小儿还可选择胫骨头内侧。⑤局部有症状者，可直接穿刺有症状的部位（即定位穿刺），骨髓穿刺部位的不同，细胞的数量和组成可能有一定的差异，尤其是病变呈局灶性分布的疾病，差异可能会更明显，因此必要时应多部位取材，以便全面了解骨髓的造血情况。2）穿 ...