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        微生物学检验染色标本检查

        细菌标本经染色后,由于细菌与周围环境间在颜色上形成鲜明对比,故在普通光学显微镜下可清楚地观察到细菌的形态特征(如细菌的大小、形状、排列等)和某些特殊结构(如荚膜、鞭毛、芽孢等),并可根据染色反应性对细菌加以分类鉴定。(一)细菌染色的一般程序  细菌染色的一般程序是:涂片(干燥)—固定—染色(媒染)—(脱色)—(复染)。1.涂片制备  血液、分泌物、排泄物、穿刺液和液体培养物,直接在载玻片上作薄膜涂片;尸检或感染动物组织,病变局部涂抹采样的棉拭 ...

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        微生物检验培养与分离方法

        大多数细菌均可以通过人工方法培养,而衣原体和病毒的分离培养往往需要活组织、鸡胚、特殊细胞株及动物接种。只有将微生物培养出来才能对它进行研究、鉴定和应用。一、接种与分离方法  根据待检标本的性质、培养目的和所用培养基的种类,采用不同的接种方法。1.平板划线分离培养法  对混有多种细菌的临床标本,采用划线分离和培养,使原来混杂在一起的细菌沿划线在琼脂平板表面分离,得到分散的单个菌落,以获得纯种。临床送检的标本如痰、咽试子、泌尿生殖 ...

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        微生物检验-细菌的生物化学试验

        各种细菌具有各自独特的酶系统,因而对底物的分解能力不同,其代谢产物也不同。用生物化学方法测定这些代谢产物,可用来区别和鉴定细菌的种类。利用生物化学方法来鉴别不同细菌,称为细菌的生物化学试验或称生化反应。生物化学试验的方法很多,主要有以下几类。一、碳水化合物的代谢试验1.糖(醇、苷)类发酵试验(1)原理:不同种类细菌含有发酵不同糖(醇、苷)类的酶,因而对各种糖(醇、苷)类的代谢能力也有所不同,即使能分解某种糖(醇、苷)类,其代 ...

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        微生物检验-血清学试验

        血清学试验是根据抗原与相应的抗体在适宜的条件下,能在体外发生特异性结合的原理,用已知抗体或抗原来检测未知抗原或抗体。因抗体主要存在于血清中,抗原或抗体检测时一般都要采用血清,故体外的抗原抗体反应亦称为血清学试验或血清学反应。血清学试验包括血清学鉴定和血清学诊断。血清学鉴定即用含已知特异性抗体的免疫血清(诊断血清)去检测患者标本中或培养物中的未知细菌或细菌抗原,以确定病原菌的种或型。血清学诊断是指用已知抗原检 ...

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        分子生物学技术在微生物检验中的应用

        分子生物学技术的迅速发展,拓展了微生物学检验方面的应用空间。该技术具有敏感、特异、安全和快速等特点,在微生物检验中发挥着日益重要的作用。本节简要介绍分子生物学技术在微生物检验中的应用,具体检测方法参见有关专著或试剂盒说明书。一、分子生物学技术在细菌分类中的应用细菌的传统分类法和数值分类法以表型特征相似性为基础,而单纯表型相似性还不能准确地确定系统发育关系。随着分子生物学及遗传学的发展,细菌分类学中发展了一系列 ...

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        自动化技术在微生物检验中的应用

        微生物鉴定的自动化技术近十几年得到了快速发展。数码分类技术集数学、计算机、信息及自动化分析为一体,采用商品化和标准化的配套鉴定和抗菌药物敏感试验卡或条板,可快速准确地对临床数百种常见分离菌进行自动分析鉴定和药敏试验。目前自动化微生物鉴定和药敏分析系统已在世界范围内临床实验室中广泛应用。 一、微生物数码鉴定法  早在七十年代中期,一些国外公司就研究出借助生物信息编码鉴定细菌的新方法。这些技术的应用,为医学微生物检验工作 ...

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        全自动微生物鉴定系统在临床微生物检验中的应用

        作者:庄华君杨旭金映川 作者单位:130021吉林省前卫医院 传统的微生物分离、鉴定方法操作繁杂,周期长,准确性差,灵敏度低,对实验室技术人员的专业技术、操作技能、工作经验要求极高,快速和准确获得细菌的鉴定及药敏结果是非常必要的。近年来随着计算机的发展及广泛应用,微生物鉴定的自动化技术近十几年得到了快速发展。先后出现了许多全自动细菌鉴定与药敏系统,比如VITEK 系统、MicroScan WaikAway系统、MicroScan A ...

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        耐药性质粒的分类及其特征

        耐药性质粒分为二类:即接合性耐药质粒、非接合性耐药质粒。 接合性耐药质粒可以通过细菌间的接合进行传递;非接合性耐药质粒不能通过细菌接合而通过噬菌体传递。 接合性耐药质粒又称R质粒,由两部分组成即耐药传递因子和耐药决定因子(r因子)。前者编码宿主菌产生接合和自主复制的蛋白,具有传递基因功能,后者决定对药物的耐受性。通过耐药质粒的转移,耐药菌可将耐药基因转移至敏感菌,使后者成为耐药菌。

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        细菌糖代谢测定试验

        糖发酵试验细菌对各种糖的分解能力及代谢产物不同,可借以鉴别细菌。一般非致病菌能发酵多种单糖,如大肠杆菌能分解葡萄糖有乳糖,产生甲酸等产物,并有甲酸解氢酶,可将其分解为co2和h2,故生化反应结果为产酸产气,以“⊕”表示。伤寒杆菌分解葡萄糖产酸,但无解氢酶。故生化结果为产酸不产气,以“+”表示。伤寒杆菌及一般致病菌大都不能分解乳糖,以“-”表示。 vp试验 大肠杆菌与产气杆菌均分解葡萄糖⊕,为区分两菌可采用vp试验及甲基红试验。产气 ...

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        厌氧菌的接种培养方法

        厌氧菌在有氧的情况下不能生长。要培养厌氧菌,必须创造一个无氧的环境。通常用培养基中加入还原剂,或用物理、化学方法去除环境中的游离氧,以降低氧化还原电势。如疱肉培养基、硫基乙酸钠培养基,牛心脑浸液培养基等。 常用的厌氧培养方法有许多,可根据实际情况选用。 厌氧缸法 接种好标本的平板或液体培养基试管,可放入厌氧缸内培养,厌氧缸是普通的干燥缸,用物理化学的方法使缸内造成厌氧环境,从而将厌氧菌培养出来。 厌氧袋(bio-bag) 即在塑料袋内造 ...

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        关于痰培养的若干问题

        自从1940年发现青霉素以来,人类就在不断地开发新的药物以治疗细菌感染。尤其近20年来,头孢菌素和新的氟喹诺酮类及大环内酯药物的出现,为临床医师应用抗生素提供了许多选择,大大地提高了感染患者的治愈率,同时也选择出许多的耐药菌株。正是因为抗生素的多样化和临床选择抗生素的随机性,人们对于抗生素存在着滥用的情况,尤其在急诊科存在流水作业,不同的医生对同一个病人会选择不同的抗生素,这同时也选择了细菌,导致了细菌耐药率 ...

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        革兰染色两步法在阴道分泌物涂片的临床应用

        摘要:目的 比较革兰染色两步法与传统四步法对阴道分泌物涂片标本染色的临床意义。 方法 收集了100例主诉外阴瘙痒和阴道病患者的阴道分泌物的标本,对其涂片分别采用二步革兰染色两步法和革兰染色四步法进行染色,并对结果比较。结果 两种染色方法的比较无显著性差异 结论 新两步法可以替代四步法,值得推广应用。 阴道炎是妇科门诊常见的病症之一。确诊主要是依据实验室对阴道分泌物的病原学检查。阴道分泌物涂片染色法是常用的方法之一。但传统的革兰四步染色 ...

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        痰培养标本采集须知

        痰培养的目的事检查痰液中的致病菌。可根据需要进行需氧菌培养、厌氧菌培养、结核杆菌培养、或真菌培养,用于呼吸道感染的病因诊断。痰培养的理论依据是致病菌应高于污染菌,据此,对痰液进行定量培养和半定量培养。常与药物敏感试验一起进行。 标本采集须知: 1、自然咳痰法:患者早上起床后用清水漱口,不要刷牙,立即从下呼吸道咳出第一口痰,吐在塑料痰盒中。痰量少或无痰的患者可采取雾化吸入加温至45℃的10%NaCl水溶液,使痰液易于排出。对于 ...

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        痰液细菌学检验的标准化操作程序

        1 前言众所周知,传统习惯程序的痰标本细菌学检验其临床符合率并不高,其原因是多方面的。除了痰标本采集不规范导致的不合格标本带来的培养结果与病人感染不相符外,还因为微生物和人体的相关性本身就具有复杂性:源自细菌的致病与条件致病的辨证性,如致病菌可能为正常携带,而细菌在肺通气功能异常病人的下呼吸道的可以发生单纯定植或感染,要证明培养结果与感染的相关性是医学微生物学所面临的难题,这也使得一直以来在对于痰培养的标准化 ...

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        血培养,诊断血流感染好帮手

        血流感染(BSI)是指病原微生物侵入血流,随血行播散的感染,可以表现为菌血症、真菌血症、病毒血症和脓毒症。血流感染是一种全身性感染疾病,严重者可引起休克、弥散性血管内凝血和多脏器功能衰竭。 导管相关性血流感染(CRBSI)是指带有血管内导管或者拔除血管内导管48小时内,患者出现菌血症或真菌血症,并伴有发热(38℃)、寒战或低血压等感染表现,除导管外没有其他明确的感染源。对怀疑有BSI或CRBSI的患者,血培养是进行病原学 ...

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        细菌可能也有凋亡机制

        细胞的程序性死亡是由基因控制的生物学事件,它在生物发育和维持机体内环境稳定的过程中有重要意义。最常见的程序性死亡是细胞凋亡,凋亡的过程会伴随着一系列细胞形态改变和生化标志。 以往对凋亡的研究都是针对真核细胞的,而本文的研究者发现,在抗生素压力下,大肠杆菌也会显示出凋亡的特殊标记。包括细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸外翻、染色质凝集和DNA断裂等。通过蛋白质组学和基因组学分析,研究人员发现多能性因子RecA是诱导这些凋亡 ...

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        医院细菌培养及药敏试验中常见问题调研及改进对策探讨

        医院微生物室的细菌培养及药敏试验是防治感染性疾病和监测耐药菌株、防范医院感染的重要手段和方法,对临床工作应该具有准确指导作用。然而,其实存在的问题较多,根据笔者的调研和体会,当前医院细菌培养及药敏技术虽本身已普及到县级医院,但是与此相关的若干不良现状却导致了药敏试验结果难以准确指导临床合理选用抗生素的局面。本文试就对这些问题的调研结果进行剖析后提出改进对策和建议。 1 与细菌培养和药敏试验相关的问题现状简析 问题1:感 ...

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        沙保罗培养基制作中要注意的一个问题

        我科沙保罗培养基自己用买回来的沙保罗琼脂粉溶解高压灭菌后倾倒,可在使用中过一段时间就会出现制作的培养基特别的软嫩,几乎无法接种,有一小年轻连续制作了几次均是这样,于是分析原因,都说是培养基糊了,可那是自动控温控压的消毒锅啊,不可能!那是为什么呢?于是采用双人对比制作,问题出来了,一人是先秤好琼脂粉倒入三角烧瓶中,然后再加水至定量,一个是先量好水,然后再秤好琼脂粉倒入,其实这也不是关键,关键在于琼脂和水混合后,溶解 ...

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        沙门氏菌血清凝集试验的一点小心得

        前两天遇到一SS平板上可疑沙门氏菌,挑取到沙门氏显色平板上,为紫红色菌落,符合。挑双糖管K/A-及综合发酵管(葡萄糖+甘露醇+蔗糖-动力+产气+H2S+IND-尿素酶—),生化反应完全符合沙门氏。血清凝集A-F多价不凝集(或者说是极其微弱的凝集),常见的O1,O4,O9,O7(均为国产血清)均不凝集。想起疾控老师的经验:凝集不好的放室温(不要放冰箱)1到2天后可能凝集的要好些,综合发酵管1比双糖管的菌凝集更好,再不好传代后再凝集。 ...

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        2012年CLSI M100-S22抗菌药物敏感性试验指南主要更新

        一、推荐用于检测和报告的药物表格中主要改变铜绿假单胞菌:B组报告药物中增加了多利培南 厌氧菌属:B组报告药物中增加了多利培南 二、折点相关表格的主要改变 1. 肠杆菌科细菌 1) 注解:氨苄西林的药敏结果可用以预测阿莫西林的药敏情况。 2) 折点相关改变,见表1。 表1. CLSI M100-S22(2012)与 M100-S21(2011)肠杆菌菌科细菌折点及相关内容更新 注:改变部分使用斜体加粗字体表示

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