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PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性，但令人头痛的问题是易污染，极其微量的污染即可造成假阳性的产生.污染原因　　(一)标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染，或标本放置时，由于密封不严溢于容器外，或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中，由于吸样枪污染导致标本间污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散，导致彼此间的污染.　　(二)PCR试剂的污染:主要是由 ...

这里提到了些没在园子里见到的（转自http://www.jingmei.com/site/site/exp_file/exp34.doc）PCR污染与对策PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性，但令人头痛的问题是易污染，极其微量的污染即可造成假阳性的产生.污染原因　　(一)标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染，或标本放置时，由于密封不严溢于容器外，或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板 ...

PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性，但令人头痛的问题是易污 染，极其微量的污染即可造成假阳性的产生.一、污染原因　　(一)标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染，或标本放置时，由于 密封不严溢于容器外，或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提 取过程中，由于吸样枪污染导致标本间污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶 或形成气溶胶而扩散，导致彼此间的污染.　　(二)PCR试剂的污染:主要是由于在P ...

56邮箱免费共享资源整理：croninszl@56.com 生物学mrelite@56.com 化学物理学方面lfang_79@56.com 化学方面wustliang◎56.com 物理相关penicilinum 生命科学-医学方向hwzgj-bio@56.com 生物学wmgkgx@56.com 材料化学wmgkgx1@56.com 特典系列cell01@56.combioskgher@56.com cell杂志文献yanguoliuhen@56.co ...

本书主要介绍生物质谱技术与方法。全书共分14章和附录。第1章对生物质谱的发展予以扼要介绍。第2-4章侧重于生物质谱技术，包括生物质谱仪器、电离与接口技术、分离与鉴定联用技术。第5-14章侧重于生物质谱方法，分别为基本分析、氨基酸序列的解析、肤蛋白质分析、蛋白质组学分析、临床医学分析、核酸分析、分子间相互作用分析、药物分析、生物体液分析、样品分析前处理。附录包括数据库检索的一些知识和操作。前言第1章 生物质谱的发展参考文献 ...

①《Cell》更强劲的DNA修复=长寿；②免疫系统增强可以预防肺癌；③中外学者最新Nature发现癌症代谢成瘾新机制；④约翰霍普金斯大学Nature发文发现催产素的新作用

验室有毒物质介绍和防护注意事项申请加分乙酸(浓)必须非常小心地操作。可能由于吸入或皮肤吸收而受到伤害。要戴合适的手套和护目镜。在化学通风橱\生物安全柜里使用。·乙腈是非常易挥发和特别易燃的，它是一种刺激物和化学窒息剂，可因吸入、咽下或皮肤吸收而发挥其效应。严重中毒的病人可按氰化物中毒方式处理。操作时要戴合适的手套和安全眼镜。只能在通风橱\生物安全柜里使用，远离热、火花和明火。·丙烯酰胺(未聚合的)是一种强的神经毒剂并 ...

最近，摸索了一下PEG沉淀PCR产物的方法，贴出来，与大家共享。摸索这个方法的目的主要是，探索一种方法，能将PCR产物大批量地、廉价地、纯度比较高地纯化出来，并且最好能去掉200bp以下的小片段DNA，用于DNA测序。有文献和方法说，不同浓度的PEG能沉淀不同长度的DNA，所以，先做了一下不同PEG浓度对DNA沉淀的作用，见下图，标本是用的50bp DNA Marker，上一行Marker溶解在纯水里面的，下一行Marke ...

本期明星技术：核糖体展示 (ribosome display)ribosome display技术的核心是利用体外核糖体表达载体构建 sc Fv抗体库 ,并于体外转录为 m RNA,体外翻译表达 ,随后以固相化的抗原分子亲和筛选出核糖体 -m RNA-sc Fv复合物中的高亲和力 sc Fv。这种技术在实验中不用任何细胞 ,是第一个完全在体外筛选有功能蛋白的方法。该技术克服了其他一些蛋白质筛选技术 (如噬菌体展示 )需转化细菌或真核细胞 ,因效率不高而降低库容 ,减少抗体多样性 ...

一、miRNA的定义　　miRNA(microRNA)是一组由基因组编码的长度约20～23个核苷酸的非编码RNA，通过和靶基因mRNA碱基配对引导沉默复合体(RISC)降解mRNA或阻碍其翻译。　　miRNA(microRNA)在物种进化中相当保守，在植物、动物和真菌中发现的miRNA(microRNA)大部分在特定的组织和发育阶段表达。miRNA(microRNA)的组织特异性和时序性，决定组织和细胞的功能特异性，表明miR ...

如何查找SNP的rs号??2011-07-19 11:57:58|??分类： 默认分类 |字号?订阅原文地址：如何查找SNP的rs号作者：拥抱马来西亚ncbi里对所有提交的snp进行分类考证之后，都会给出一个rs号，也可称作参考snp，并给出snp的具体信息，包括前后序列，位置信息，分布频率等。如何查找rs号，可参考此贴：http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=67&id=9611445&sty=1&ticket= ...

我以前做过比较多的载体构建，从来没遇到困难，因此想当然的认为这是太简单的事情，最近克隆一个基因就遇到了很多问题，花了1个月时间才成功，所以把我的经验和大家分享一下：我的目的基因是5kb左右的，因此刚开始用的是Takara的普通的premix exTaq，后来看说明说这个酶可以扩增3.7kb的产物，但Takara的网站上又说可以扩增10kb长度的产物，刚开始一直未成功，从PCR阶段就出问题了，没有目的片段，只有2kb ...

RNA一度被认为仅仅是DNA和蛋白质之间的“过渡”，但越来越多的证据清楚的表明，RNA在生命的进程中扮演的角色远比我们早前设想的更为重要。RNA干扰（RNA interference）的发现使得人们对RNA调控基因表达的功能有了全新的认识，更因为可以简化/替代基因敲除而成为研究基因功能的有力工具，因此格外引人注意，在2002年度Science评选的10大科学成就中RNAi名列榜首。随着对小分子RNA研究的不断深入 ...

各种微生物转化方法汇总！将不断更新不同微生物的转化方法！目前有下列微生物的转化方法：大肠杆菌http://www.dxy.cn/bbs/actions/archive/post/28094_1.htmlhttp://www.dxy.cn/bbs/thread/2285320http://www.dxy.cn/bbs/thread/1829449双歧杆菌http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=154&id=2 ...

间接免疫荧光法（IIFT）作为自身抗体检测中最经典的方法，被广泛应用的同时，却因自动化程度低下，给广大医务工作者增加了繁重的工作负担。记得曾经听到一家大型三甲医院检验科老师一句玩笑式的抱怨：“我感觉我眼睛都要被每天那么多荧光片给看绿了。”虽然这只是一句玩笑话，可作为在自免领域行业内诸如欧蒙医学诊断这样的有识之士们，却在为解决这个问题不懈努力。如今在业内逐渐兴起的荧光判读自动化趋势中，最具代表性的EUROPatt ...

接上一回【秩和检验】，这回师兄就来讲讲【秩和检验】是怎么实际操作的一、概述Mann-Whitney U 检验是用得最广泛的两独立样本秩和检验方法。简单的说，该检验是与独立样本 t 检验相对应的方法，当正态分布、方差齐性等不能达到 t 检验的要求时，可以使用该检验。其假设基础是：若两个样本有差异，则他们的中心位置将不同。二、问题为了研究某项犯罪的季节性差异，警察记录了 10 年来春季和夏季的犯罪数量，请问该项犯罪在春季和夏季有无差异。下面使用 Mann- ...

秩和检验的背景秩和检验方法最早是由维尔克松提出，叫维尔克松两样本检验法。后来曼—惠特尼将其应用到两样本容量不等（n1 ≠ n2）的情况，因而又称为曼—惠特尼U检验。这种方法主要用于比较两个独立样本的差异。提出问题在实践中我们常常遇到以下一些资料，如需比较患者和正常人的血铁蛋白、血铅值、不同药物的溶解时间、实验鼠发癌后的生存日数、护理效果评分等，这类资料有如下特点：（1）资料的总体分布类型未知；（2）资料分布类型已知，但不符合正 ...

Logistic 回归：实际上属于判别分析，因拥有很差的判别效率而不常用。1． 应用范围：① 适用于流行病学资料的危险因素分析② 实验室中药物的剂量-反应关系③ 临床试验评价④ 疾病的预后因素分析 2． Logistic 回归的分类：① 按因变量的资料类型分： 二分类 多分类其中二分较为常用② 按研究方法分： 条件 Logistic 回归 非条件 Logistic 回归两者针对的资料类型不一样，后者针对成组研究，前者针对配对或配伍研究。 3．Logistic 回归的应用条件是：① 独立性。各观测对象间是相 ...

居中 {text-align: center;}居中 {text-align: center;}什么是正态分布？正态分布是在统计分析最广泛应用的一类分布，自然界、社会、科研、生活、生产中的很多现象都被发现近似地服从正态分布，它无处不在，让你在纷繁芜杂的数据背后看到隐隐的秩序。主要指变量的频数或频率呈中间最多，两端逐渐对称地减少，表现为钟形的一种概率分布，具体的数学公式就不再提了。为什么要进行正态分布检验？假设检验可分为正态分布检验、正 ...

到底什么是卡方检验？卡方检验就是卡方分布为基础的一种检验方法，主要用于分类变量，根据样本数据推断总体的分布与期望分布是否有显著差异，或推断两个分类变量是否相关或相互独立。其原假设为：观察频数与期望频数没有差别。凡是可以应用比率进行检验的资料，都可以用卡方检验。要注意的是，卡方检验受样本量的影响很大，同样两个变量，不同的样本量，可能得出不同的结论。解决这个问题的办法是对卡方值进行修正，最常用的是列联系数。对较大样本 ...