🔥 等温滴定量热法(ITC)

等温滴定量热法（Isothermal Titration Calorimetry，ITC）是一种常用的生物物理学实验技术，其通过测量生物分子之间热交换的过程来研究它们之间的相互作用。它可以测量生物大分子（如蛋白质、核酸、多糖等）之间相互作用的热力学参数，如热力学平衡常数、焓变和熵变等。

ITC 技术是利用热量计测量生物分子之间热交换的过程。在 ITC 实验中，一个称为样品细胞的容器中装有一个生物分子，另一个称为注射器的容器中装有另一个生物分子。当两种生物分子结合时，会产生一定的热效应，即焓变。ITC 技术可以测量这种热效应，并通过计算来确定热力学参数，如热力学平衡常数、焓变和熵变等。

ITC 技术可以用于研究生物分子之间的相互作用，如蛋白质与配体相互作用、蛋白质与蛋白质相互作用、酶促反应等。ITC 技术可以提供关于生物分子相互作用的定量信息，从而帮助研究人员更好地了解生物分子的功能和调控机制。

1、微量热计中有两个池，其中一个含有水，作为参比池，另一个含有样品。微量热计必须使这两个池保持完全相同的温度。热敏装置检测发生结合时两个池之间的温差，并反馈给加热器，由加热器来补偿该温差并使两个池恢复到相同的温度。

2、准备样品细胞和注射器，将缓冲液加入样品细胞中，并将参考物质和待测物质加入注射器中。

3、将样品细胞和注射器放入 ITC 仪器中，并将温度控制在恒定的温度下。

4、在样品细胞中注入参考物质，记录下热效应信号的基线值。

5、在样品细胞中加入待测物质，记录下热效应信号的变化值。

6、重复步骤 3-4，直到测量结束。

7、根据测量结果计算热力学参数，如热力学平衡常数、焓变和熵变等。

(1) 操作过程中应注意个人防护，避免接触有毒化学品。

(2) 操作时应注意样品的浓度和稀释倍数，以获得准确的测量结果。

(3) 在温度控制时，应避免出现温度波动，以保证测量的准确性。

(4) 在操作前应对 ITC 仪器进行充分的预热和校准，以保证实验的可靠性。

(5) 在进行测量前应确保样品细胞和注射器的清洁，避免杂质的干扰。

(6) 在进行测量时应注意实验的时间和速度，避免过度测量或过快的测量速度导致数据不准确。

(7) 在进行数据处理时应注意对测量结果进行统计分析，以获得可靠的热力学参数。