稳定表达ECFP、EGFP、EYFP和（或）DsRed蛋白的细胞系的建立

稳定表达 ECFP、EGFP、EYFP 和（或）DsRed 蛋白的细胞系的建立是用流式细胞仪同时检测四色荧光蛋白要求这些细胞要表达每一种蛋白，同时，能够表达多个荧光蛋白的细胞可以用来确认分群的正确性。

稳定表达 ECFP、EGFP、EYFP 和（或）DsRed 蛋白的细胞系的建立基本过程可分为以下几步：

A. 采用逆转录病毒载体将荧光蛋白基因导入 Sp2/0-Ag14 细胞。

B. 来自 GP＋E-86 细胞的上清被收集并且过 0.45 μm 的滤膜，以从病毒颗粒县液中滤过任何混入的细胞。

C. 培养 Sp2/0-Ag14 细胞，将含有 ECFP，EGFP，EYFP，或 DsRed 蛋白逆转录病毒载体的上清加入，并加 2 μg/ml 聚凝胺，37 ℃ 培养 4 h。

D. 加新鲜病毒上清重复上面步骤，2 天后，加 G418（750 μg/ml）来筛选表达每种荧光蛋白的细胞。另外，利用上述同样的操作步骤，可获得表达四色蛋白的细胞，只不过是同时加 4 种荧光蛋白的逆转录病毒载体。