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        朊粒病的毛细管电泳技术

        相关实验:朊粒病的实验室检测

        最新修订时间:

        简介

        目前传统方法难以用于血清中 Pr 的检测, 而毛细管电泳作为一种高效分离检测技术, 已在血清中 Pr 的检测表现出可行性。

        原理

        毛细管电泳技术的基本原理是将抗原抗体竞争试验与毛细管电泳结合起来。对 PrP 同源的合成多肽进行荧光标记, 加入与 50% 荧光标记多肽结合的兔抗体, 共同孵育后, 向该混合物中加入待检血清, 使血清中的 PrP 与合成多肽竞争结合抗体。

        材料与仪器

        器材:毛细管电泳仪器

        步骤

        朊粒病的毛细管电泳技术的实验步骤如下:

        经毛细管电泳分离, 游离多肽与结合多肽可被激光诱导的荧光区分开。通过结合多肽与游离多肽的峰高之比来间接检测血清中的 Pr。当血清中无 PrP 时, 结合多肽与游离多肽的峰高比例基本不变; 当血清中存在 PP 时, 结合多肽减少, 游离多肽增多, 导致结合多肽与游离多肽的峰高比例降低。该方法的关键在于:①样品的复杂前处理,②合成多肽、抗体试验。

        目前毛细管电泳技术在 TSEs 生前诊断的应用研究尚处于起步阶段。该方法已能检测出羊和麋鹿血清中的 PP, 但尚未实现标准化, 且结果判定依靠结合多肽与游离多肽的信号比, 而不是实际的 PrPSc 含量。

        来源:丁香实验

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