简介
丙氨酸转氨酶（alanine aminotransferase，ALT）能够催化将氨基从丙氨酸转移到 aα－KG 上的转氨基反应，这个可逆转氨基反应的产物为丙酮酸和谷氨酸，在氨基酸代谢中具有重要作用。哺乳动物肝细胞中 ALT 酶活性很高，当肝细胞坏死，ALT 被释放到血液，血清 ALT 活性显著增高。因此，ALT 被世界卫生组织推荐为肝功能损害最敏感的检测指标。
原理
丙氨酸转氨酶活性分析的基本原理是：ALT 催化丙氨酸和α－KG 的转氨基反应，生成丙酮酸和谷氨酸；加入 2,4－二硝基苯肼溶液，不仅终止上述反应，而且与酮酸中的羰基加成，生成丙酮酸苯腙；苯腙在碱性条件下呈红棕色，可以在 505 nm 读取吸光度值并计算酶活性。
材料与仪器
① 样品
② 2,4－二硝基苯肼溶液
步骤
丙氨酸转氨酶霍星分析的实验基本步骤如下所示：
A、加入 2,4－二硝基苯肼溶液，终止 ALT 催化丙氨酸和α－KG 的转氨基反应，并且与酮酸中的羰基加成，生成丙酮酸苯腙；
B、苯腙在碱性条件下呈红棕色，在 505 nm 读取吸光度值并计算酶活性。
来源：丁香实验
