简介
气性坏疽抗毒素效价测定法（小鼠试验法）是用不同剂量气性坏疽抗毒素处理小鼠，后续观察小鼠生病或死亡情况，从而推断供试品效价的实验方法。
材料与仪器
试剂：
① 气性坏疽 (威氏、水肿、脓毒、溶组织) 抗毒素标准品；
② 硼酸盐缓冲盐水。
实验动物：
① 体重 17~19 g 清洁级小鼠。
步骤
气性坏疽抗毒素效价测定法（小鼠试验法）的基本过程可分为如下几步：
A. 气性坏疽抗毒素标准品溶液制备。
(1) 气性坏疽（威氏、水肿、脓毒、溶组织）抗毒素标准品由中国食品药品检定研究院提供，于 2~8 °C 处避光保存。
(2) 使用时，将气性坏疽抗毒素标准品用稀释液稀释至每 1 mL 含测定参数表所示效价。气性坏疽抗毒素标准品原倍液的一次吸取量应不低于 0.5 mL。
B. 气性坏疽毒素溶液制备。
(1) 气性坏疽毒素由中国食品药品检定研究院提供，亦可自备。
(2) 试验用的气性坏疽毒素须以中国食品药品检定研究院提供的气性坏疽抗毒素标准品准确标定其试验量（表 10-4-2），每 3 个复检 1 次。
(2) 使用前将气性坏疽毒素用稀释液稀释至每 1 mL 含 5 个 (水肿型为 20 个) 毒素试验量。
C. 稀释液。
(1) 硼酸盐缓冲盐水配制，称取氯化钠 8.5 g，硼酸 4.5 g，四硼酸钠（10 分子结晶水）0.5 g。
(2) 加注射用水溶解并稀释至 1000 mL，过滤，灭菌后 pH 应为 7.0~7.2。
D. 溶液混合。
(1) 精密量取已稀释后的气性坏疽抗毒素标准品溶液 0.8 mL、1.0 mL、 1.2 mL 分别加入小试管中。
(2) 依次分别补加稀释液 0.7 mL、0.5 mL、0.3 mL。
(3) 精密量取不同稀释度的供试品溶液各 1.0 mL 分别加入小试管中，每管补加稀释液 0.5 mL (可在抗毒素之前加入)。
(4) 以上各管分别加入稀释后的气性坏疽毒素溶液 1.0 ml (水肿型为 0.5 ml)， 混合均匀;
(5) 加塞，20~25 °C 结合 1 小时，按测定参数表 (表 10-4-2) 所示剂量与途径，立即注射。
E. 动物选择。取一定数量的体重 17~19 g 清洁级小鼠。
F. 动物处置。按测定取参数表所示剂量与途径，每个稀释度注射小白鼠 4 只。
G. 观察每天上、下午各观察实验动物 1 次，并记录发病及死亡情况，连续 3 天。
注意事项
A. 标准品组动物在 3 天之内，注射气性坏疽抗毒素量最少（即 0.8 mL）的 4 只中应有 2 只以上死亡。对比标准品组与供试品组动物死亡情况，推算供试品的效价。
B. 有下列情况之一者应予重试：
(1) 标准品组动物在 3 天之内全部死亡或者全无死亡，或者注射气性坏疽抗毒素量最少的 4 只动物死亡不足半数，注射气性坏疽抗毒素量最多的 4 只动物死亡超过半数。
(2) 待检组动物在 3 天内全部死亡或者全无死亡。
(3) 动物死亡数极不规则，以致无法进行判定。
(4) 每个稀释度注射的动物中有 2 只以上属非特异死亡。
来源：丁香实验
