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        天疱疮动物模型

        相关实验:诱发性皮肤疾病动物模型

        最新修订时间:

        简介

        天疱疮(pemphigus)是一组累及皮肤和黏膜的自身免疫性表皮内大疱病,共同特征是疱壁薄,松弛易破的大疱。由于患者血清中存在大量的抗表皮细胞间物质的自身抗体,导致表皮棘层松解、大疱形成。

        原理

        天疱疮是表皮细胞间抗体介导的自身免疫性大疱性皮肤病,天疱疮抗体与天疱疮抗原结合后,通过细胞信号传导途径激活一系列蛋白水解酶,导致细胞间连接结构水解,从而引起表皮棘层细胞互相分离、棘层松解及表皮内水疱形成。通过纯化患者血清中的自身抗体 IgG,注射给小鼠后可产生天疱疮临床和组织病理改变。

        用途

        本模型对研究天疱疮的病理、发病机制以及药物治疗和药物筛选等方面具有较高价值。

        材料与仪器

        对象:


        ① BALB/c 小鼠。


        器材:


        ① Sephadex G200 柱。


        试剂:

        ① 饱和硫酸铵;

        ② 聚乙二醇;

        ③ Tris 缓冲液。

        步骤

        天疱疮动物模型的基本过程可分为如下几步:

        A. 纯化患者自身抗体 IgG,采用饱和硫酸铵沉淀其外周血清中的免疫球蛋白,经透析后采用聚乙二醇浓缩至蛋白浓度为 50 mg/mL。

        B. 过 Sephadex G200 柱,Tris 缓冲液洗脱,收集第 2 峰(即 IgG 峰)并测定蛋白浓度。

        C. 新生的 BALB/c 小鼠 24 小时内按每日 5 mg/g lgG 予以腹腔内注射,早晚各 1 次,共 3 天。

        注意事项

        注射患者血清的 IgG 抗体后,18~72 小时出现皮肤水疱,病理检查有棘层细胞松解,表皮内水疱,免疫荧光染色可见细胞间已结合有自身抗体。

        来源:丁香实验

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