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        麻风动物模型-免疫正常小鼠感染模型

        相关实验:诱发性皮肤疾病动物模型

        最新修订时间:

        简介

        由于麻风杆菌适宜生长温度低于 37 ℃,静脉注射时在内脏是不易繁殖的,提示低体温部位是分枝杆菌的适宜接种部位,因而麻风杆菌接种到小鼠足垫能够存活。一般室温在 15~25 ℃,小鼠足垫温度为 30 ℃,利于麻风杆菌繁殖。

        原理

        通过控制接种部位的温度或动物的免疫状态,或选择对麻风杆菌的易感性高的动物,进行麻风杆菌的接种,获得感染模型。

        用途

        免疫正常小鼠感染模型由于动物来源方便,饲养简单,实验结果重复性好,成功率高,因而广泛用于麻风病的研究,其应用主要包括以下几方面。

        1. 麻风杆菌的鉴定和活力测定。

        2. 麻风杆菌耐药菌株的鉴定。

        3. 筛选新的抗麻风药物及鉴定实验化疗效果。

        4. 麻风杆菌菌苗实验研究。

        材料与仪器

        对象:


        ① 免疫正常小鼠。


        试剂:


        ① 无菌缓冲盐水。

        步骤

        麻风动物模型-免疫正常小鼠感染模型的基本过程可分为如下几步:

        A. 鼠足垫接种麻风杆菌:菌株取自瘤型或界线类偏瘤型麻风患者的皮肤活体组织或裸鼠传代菌株。

        B. 皮肤组织用无菌缓冲盐水反复冲洗后剪碎,研磨成菌悬液,低速离心 (1000~-1500 r/min)5~10 分钟,取上清计数菌量。

        C. 每足垫接种菌量为 5×103~1×104/0.03 mL,选免疫正常小鼠进行足垫接种,也可接种在耳、鼻皮下,或是静脉注射接种。

        D. 定期收获细菌,计数,同时进行病理检查,一般 1 年收获 6~7 次。

        注意事项

        ① 足垫接种麻风杆菌后肉眼检查无明显变化;

        ② 麻风杆菌的繁殖是缓慢而有限的,麻风杆菌有其特定的繁殖生长曲线,增殖到一定数量后不再增加,这与小鼠在感染后期出现了麻风杆菌的细胞免疫有关;

        ③ 成功率高;

        ④ 高度可重复性;

        ⑤ 可以传代,传代菌生物学特性不改变;

        ⑥ 足垫麻风杆菌繁殖与接种菌性状、数量直接相关,形态指数愈高,成功率愈高,如治疗后形态指数降低,则接种成功率降低;但未经治疗的病例形态指数为零时亦可出现繁殖,接种菌量超过 106 则不繁殖。

        缺点是麻风杆菌生长缓慢而且是有限繁殖,缺乏像人那样严重侵犯神经的损害,缺乏瘤型病变,不是真正的疾病模型;另外小鼠生命周期短,一般小鼠只存活 2 年,难以进行耐药性等方面的研究。

        来源:丁香实验

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