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        脊髓横断模型

        相关实验:脊髓损伤动物模型

        最新修订时间:

        简介

        脊髓横断模型使用锐利尖刀片,选择性地横断或半横断动物脊髓,选择性切除部分传导束,切除一段脊髓或负压吸除部分脊髓,造成脊髓横断性损伤或缺损,失去解剖连续性及生理上的联系。

        用途

        可以为神经轴突的再生提供有价值的资料,能够准确判定损伤所涉及的轴突为何种类型的神经,同时也可以观察神经递质、神经营养因子、神经组织、细胞移植对这一过程的影响及作用、评价神经再生。

        材料与仪器

        器材:


        ① 常用手术器材;


        ② 小号持针器;


        ③ 血管夹;


        ④ 手术显微镜;


        ⑤ 显微手术器械;


        ⑥ 小乳突牵开器;


        ⑦ 立体定向仪;


        ⑧ 吸引器。


        试剂:

        ① 麻醉品。

        步骤

        (一)脊髓半横断模型制作方法


        A. 大鼠麻醉后俯卧位妥善固定大鼠。务必使大鼠棘突处于正中位置。

        B. 切开皮肤,分离双侧棘突旁肌肉,暴露棘突和椎板,血管钳固定椎板,小号持针器切除右侧椎板至右侧关节突内侧面,再切除棘突,至暴露出少许左侧脊髓为止。

        C. 此后的操作在放大 10 倍的手术显微镜下进行。

        D. 用显微刀、剪沿后正中线纵向打开硬膜(此时可见清亮的脑脊液流出),并向右侧剪开到关节突内侧。

        E. 定位中线,轻柔地分离出后正中沟。此步骤应避免损伤粗大的脊髓后正中静脉。

        F. 脊髓横旋切,虹膜刀刀背位于后正中沟,刀锋向右向脊髓内垂直刺入,随即与脊髓垂直方向向右侧横行切断脊髓。

        G. 横切到外侧时顺杆椎管外侧的弧度作旋转式切断。如仍有部分脊髓在轻柔横旋切的情况下难以切断,可用显微剪紧抵前(外)方硬膜剪断之。

        H. 确认半切,再用角膜刀自中线向外侧作一次横旋切,以确认半切完全。

        I. 如有少量出血、用明胶海绵轻轻压迫止血。

        J. 最后在暴露的脊髓表面覆以小块明胶海绵,分层缝合肌肉和皮肤。

        (二)脊髓全横断模型制作方法


        A. 大鼠麻醉,俯卧位,切开皮肤紧贴棘突骨而纵形分离椎旁肌,直达椎板表面,用小乳突牵开器向两侧牵开椎旁肌,显露椎板和棘突。

        B. 然后将大鼠固定在可用于脊髓的立体定向仪上,咬骨钳咬除棘突,在显微镜下用高速牙科钻沿上下椎间关节内侧纵向磨开椎板,用显微镊小心移除椎板,避免撕破血管。

        C. 在显露的脊髓中间位置横向剪开硬脊膜和蛛网膜,将刮胡刀片掰成极窄的锐角三角形状,用其锐利的尖端在显露出的脊髓背静脉和两侧脊髓背动脉之间分别横向切开软膜和脊髓实质,并于软膜下尽可能横断脊髓,切口处以外的软膜要保持完整。

        D. 然后将吸引器仲入切口内,于软膜下吸断未横断的脊髓组织,保留脊髓背静脉、两侧的脊骼背动脉和脊骼腹动脉。

        E. 显微缝合线缝合硬脊膜和蛛网膜,缝合肌肉和皮肤。

        注意事项

        1. 横切时前方刀尖应紧抵住前方硬膜。横切应缓慢轻柔进行、避免造成对左侧脊髓的牵拉损伤。

        来源:丁香实验

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