简介
显性致死试验是检测受试物诱发哺乳动物性细胞染色体畸变所致胚胎或胎儿死亡的遗传毒性试验方法。显性致死是染色体结构异常或染色体数目增加或减少的结果，但也不能排除基因突变和毒性作用。一般以受试物处理雄性啮齿动物，然后与雌性动物交配，经适当时间后，处死雌性动物后检查子宫内容物，以确定活胎或死胚胎数。如与对照组比较，试验组平均活胎数有统计学意义的减少或增加，并有剂量-反应关系，则可认为该受试物为哺乳动物性细胞的致突变物。
原理
显性致死试验的基本原理是致突变物可引起哺乳动物生殖细胞染色体畸变，以致不能与异性生殖细胞结合或导致受精卵在着床前死亡，或导致胚胎早期死亡。
材料与仪器
步骤
显性致死试验的基本过程可分为如下几步：
A 在接触试验材料前应进行生育试验，以便选择具有生育能力的雄鼠进行显性致死评价。可用 20 只雄鼠，从中获得 15 只具有生育能力的雄鼠。随机分配到各试验组中进行试验。用 1 只雄鼠与 2 只未交配过的雌鼠合笼 7 天，交配大多数发生在合笼后 2～3 天。在胚胎发育的第 13 天，即雄、雌合笼后的第 15～16 天，处死雌鼠，检查子宫内活胎数和早、晚期死胎数，以此作为显性致死率的评价基础。经生殖能力预试，能使受孕率在 70% 以上的雄鼠为合格雄鼠。
B 试验材料接触已选出的雄鼠。可采用一次给药或多次（5 次）给予受试材料，即每日 1 次，连续 5 天。经口、腹腔注射或者静脉注射。
C 于最后一次给予受试材料后的 1～2 天开始交配，第一周用 1 只经给予受试材料的雄鼠与 2 只未交配过的雌鼠合笼 5 天，休息 2 天。以后每周更换一批新雌鼠，让雄鼠与 2 只未交配过的新雌鼠交配，连续 6～8 周，重复这一步骤。以便评价精子生成前，减数分裂前、后阶段的遗传毒性。在合笼期每日检查雌鼠阴道内有无阴栓或阴道涂片检查精子。查出阴栓或精子的当天为妊娠 0 天，未查出的以合笼的第 4 天定为妊娠 0 天。
D 于妊娠的第 13 天，或以雌雄鼠同笼日算起第 15～17 天，采用颈椎脱臼法处死雌鼠后，立即剖腹取出妊娠子宫，放置在铺有白纸的解剖板上，仔细检查、计数，分别记录每一雌鼠的活胎数、早期死亡胚胎数与晚期死亡胚胎数。
E 胚胎鉴别。活胎，完整成形，色鲜红，有自然运动，机械刺激后有运动反应；早期死亡胚胎，胚胎形体较小，外形不完整，胎盘较小或不明显，最早期死亡胚胎会在子宫内膜上隆起如一小瘤，如已完全被吸收，仅在子宫内膜上留一隆起暗褐色点状物；晚期死亡胚胎，成形，色泽暗淡，无自然运动，机械刺激后无运动反应。
注意事项
选用健康动物，符合试验规格，且有合格证号。经生殖能力预试，受孕率应在 70% 以上者。雄性成年小鼠（性成熟，体重 30 g 以上）或大鼠（性成熟，体重 200 g 以上），预先接触受试物，再进行交配。交配用的成年雌鼠，不接触受试物。雌性鼠为雄性鼠的 5～6 倍量。每组雄鼠一般不少于 15 只，雄鼠与雌鼠交配，使每组产生至少 30 只受孕雌鼠。试验使用性成熟的小鼠。雌鼠为 8～10 周龄，雄鼠为 10～12 周龄。使用未接受过任何试验的动物，雌鼠未交配过。雄鼠在给予试验材料后直接使用。
来源：丁香实验
