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        牙髓牙本质试验

        相关实验:口腔材料生物学评价动物实验

        别名:pulp and dentine usage test

        最新修订时间:

        简介

        临床上因龋齿导致牙釉质及牙本质受损,有可能深及牙髓,为了修复龋齿,必须对受损的牙本质用牙科材料进行修复,以防止龋齿的进一步发展。口腔材料牙髓牙本质应用试验就是在模拟修复龋齿的过程中用于评价牙科材料与牙本质及牙髓的生物相容性情况。

        原理

        牙髓牙本质试验的基本原理是模拟临床上因龋齿而形成的窝洞而人为地在实验动物牙齿上制造出 V 类窝洞,在窝洞内填充试验材料后,观察试验材料对牙髓及牙本质的生物学反应,以评价牙科材料的生物相容性情况。

        材料与仪器

        器材:

        高速窝轮钻机、牙科钻、载玻片、牙科调拌刀、酒精棉球、组织处理试剂及设备。

        试剂:

        ① H2O2
        ② 戊巴比妥钠
        ③ 生理盐水

        步骤

        牙髓牙本质试验的基本过程可分为如下几步:

        A 采用腹腔注射 3% 戊巴比妥钠溶液对试验犬施行麻醉术,剂量为 30 mg/kg。

        B 将实验动物在手术台上固定,用碘伏、75% 乙醇溶液清洗、消毒动物口周等方法进行备牙操作。清除牙面的牙石恒钙斑。用 3%H2O2 清洗牙冠、牙龈和软组织。再用 0.1% 洗必泰消毒牙面和手术区。

        C 备洞操作。在牙齿颊面或唇面牙颈部下方牙釉质部位,用涡轮机在水喷雾条件下用倒锥钻低速制备 V 类洞,洞底剩余牙本质厚度小于 1 mm,不暴露牙髓。用灭菌生理盐水冲洗窝洞,无菌棉球擦干洞壁。

        D 按随机原则放置试样,每一试验周期试验材料 7 个窝洞,对照材料 4 个窝洞。在消毒调和板上调和受试材料和对照材料,用调拌刀挑取适量的试验材料分别放置于试验窝洞内。再用调拌刀挑取适量的氧化锌丁香酚水门汀充填对照窝洞。注意需完全充填窝洞,勿留气体空腔。75% 乙醇棉球修饰表面。

        E 如有必要,每一试验周期还应有 4 个阳性对照窝洞。对于以前有阳性对照数据库的实验室,不必再做阳性对照试验,除非有时需验证阳性反应。在阴性对照氧化锌丁香酚水门汀上,可用粘接技术充填复合树脂或充填玻璃离子水门汀(尤其是长期组)。

        F 定期观察动物的一般状态,体重变化,进食情况,口腔组织红、肿、流涎或化脓等改变。

        于手术后 7 天、28 天和 70 天,分别无痛处死实验动物取样。取样时切取其上、下颌骨和牙齿,置 20% 中性甲醛缓冲液内固定 1 周。切取所需要的牙齿及部分颌骨(包括牙根尖组织),将试验牙与对照牙分别置于有机酸和无机酸脱钙液内脱钙。以梯度酒精脱水,石蜡包埋,沿牙纵轴并通过露髓孔作组织切片,厚度 5~10 μm,HE 染色。

        注意事项

        可从猴、犬或小型猪中任选一种。每一试验周期至少用 1 只动物。动物应有完整的恒牙(除 M3 外的所有恒牙均已萌出)且牙根尖完全形成。实际应用时,常选用健康成年家犬 6 只,体重 15~24 kg,每一试验时期 2 只,以保证每个试验周期中至少有 7 颗牙齿含试验材料,4 颗牙齿含阴性对照材料。如有必要,每一试验周期应有 4 个阳性对照窝洞。试验前检查实验动物是否已有完整恒牙,根尖是否已完全形成。试验前使动物适应环境 7 天。牙髓牙本质试验周期为(7 ± 2)天,(28 ± 3)天及(70 ± 5)天 3 个观察周期。

        来源:丁香实验

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