各时期卵泡数量统计实验

各时期卵泡数量统计实验的目的是检测卵巢的形态是否正常；检测卵巢中各时期卵泡的数量和形态是否正常。

各时期卵泡数量统计实验的基本过程可分为如下几步：

A 使用未经 PMSG 诱导的小鼠，实验组和对照组各 5 只，小鼠的年龄根据实验需求选取，通常先分析小鼠生育力开始消失或降低的时间点。同时也需要使用 24 日龄经过 PMSG 诱导后 48 小时的实验组和对照组各 5 只小鼠。

B 立体显微镜下取出小鼠巢，首先观察卵巢的形状、大小、表面光滑程度等，卵巢置于 4％ 多聚甲醛固定 12 小时。

C 将固定后的组织进行系列乙醇脱水，二甲苯透明，石蜡包埋，连续切片，切片厚度约为 8 μm，烤片及 HE 染色等，显微镜下观察并每隔 5 个切片计算出各级卵泡数量（包括原始卵泡，初级卵泡，次级卵泡，成熟卵泡，黄体等；含有能够观察到细胞核的卵母细胞的卵泡才计入数），计算总数做为整个卵巢中卵泡的数量。

D 用 SPSS13.0 软件分析实验结果。

E 取不同年龄的小鼠，找到卵巢开始发生变化的时间点，并追踪实验小鼠卵巢的变化过程，确定卵巢即将发生变化的时间点。对各个时间点的小鼠重复（1）-（4）的实验过程。统计小鼠卵巢功能的变化过程。

1 解剖卵巢时注意不要损伤到卵巢的表面，为保证实验的准确性，切片均为连续切片。