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        肠道通透性检测实验

        相关实验:肠道通透性检测实验

        最新修订时间:

        简介

        在对肠道炎症引起肠道功能异常的分析方面,通常可以通过检测荧光标记的大分子化合物的肠吸收进入血液情况来评价肠道整体的通透性。通透性非正常增加提示肠上皮细胞胞间连接异常,或有炎症病灶存在。

        原理

        肠道通透性检测实验的基本原理是通过检测荧光标记的大分子化合物的肠吸收进入血液情况来评价肠道整体的通透性。

        材料与仪器

        器材:

        荧光酶标仪、荧光酶标板(黑色不透光)。

        试剂:

        ① Fluorescein isothiocyanate-dextra(FD-4)(Sigma)

        ② 生理盐水

        步骤

        肠道通透性检测实验的基本过程可分为如下几步:

        A 小鼠准备需要用于测定肠道通透性的小鼠需禁食过夜,以保证肠道内没有多余食物影响肠壁对大分子荧光物质的吸收。

        B 将 FD-4 溶解于灭菌的生理盐水中(50 mg/ml),注意避光,称量小鼠体重,按 10 μl/g 相对体重进行灌胃。

        C 3 小时后,眼眶取血 200 μl,分离血清。

        D 以 1:2 及 1:5 两个比例将分离的血清用生理盐水稀释。

        E 以起始浓度为 0.1 mg/ml 开始用生理盐水稀释用于灌胃的剩余 FD-4,4 倍向下稀释 6 个点。

        F 与标准曲线同时进行 490 nm 激发光下 520 nm 处的吸收值,对标准曲线作图并还原成原始浓度取平均值。结果示例如图 8-3-8。肠道通透性检测实验

        来源:丁香实验

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