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        简单拍打传代培养

        相关实验:细胞的传代培养实验

        别名:

        最新修订时间:

        简介

        简单拍打传代培养是适用于悬浮细胞的传代培养方法。

        原理

        简单拍打传代培养的基本原理是通过直接吹打或离心后,即可加以传代。

        材料与仪器

        器材:

        ① 原代培养的外周血淋巴细胞

        ② 25 mL 培养瓶

        ③ 吸管

        ④ 胶帽

        ⑤ 离心管

        ⑥ 酒精棉球

        ⑦ 酒精灯

        ⑧ 离心机

        ⑨ 倒置显微镜

        ⑩ 超净工作台

        ⑪ CO2 培养箱。

        试剂:

        ① D-Hanks 液

        ② DMEM 培养基(含 10% 小牛血清)

        步骤

        简单拍打传代培养基本过程可分为以下几步:

        A. 将原代培养的外周血淋巴细胞连同培养液一并转移到离心管中。

        B. 800~1000 r/min 离心 5 min,去除上清液。

        C. 加新的培养液到离心管中,吸管吹打、制悬。根据细胞的数量多少,将细胞悬液按 1:2 或 13 的比例分别接种于新的培养瓶中。

        注意事项

        1. 在对细胞进行吹打时,不能用力过猛,尽量不出现气泡,以免损伤细胞。

        2. 传代培养的过程通常较长,细胞被污染的可能增加,因此,必须严格进行无菌操作。

        来源:丁香实验

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