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        琼脂凝胶器官培养法

        相关实验:器官培养实验

        别名:Wolff 器官培养法

        最新修订时间:

        简介

        琼脂凝胶器官培养法是利用琼脂作为细胞培养液基质进行器官培养的方法。


        Wolff 等人利用改良后的琼脂基质成功进行了胚胎器官的发育及形态发生的研究,后来又利用琼脂凝胶培养基成功进行了肿瘤组织的培养,因此该法又成为 Wolff 器官培养法。

        原理

        琼脂凝胶器官培养法的基本原理是利用琼脂不液化的性质,进而达到抑制细胞迁移的目的,使得器官能在体外进行生长。

        材料与仪器

        器材:

        ① Wolff 培养皿

        ② CO2 孵箱或普通温箱

        ③ Wolff 培养皿

        ④ 组织学切片

        ⑤ 染色设备

        ⑥ 欲培养的肿瘤组

        ⑦ 鸡胚 5 只(8~10 d 鸡胚为佳)

        ⑧ 鸡蛋 5 只

        ⑨ 封蜡

        试剂:

        ① Wolff 培养基

        步骤

        琼脂凝胶器官培养法的基本过程可分为以下几步:

        A. 将 Wolff 培养基加温 50 ℃ 融化,加入 Wolff 培养皿内,待冷却凝固,铺上卵黄膜。

        B. 欲培养的肿瘤组织(1 立方米左右)与鸡胚中肾组织(1 立方米左右)相间置于卵黄膜上。

        C. 反折卵黄膜,将培养组织盖上。

        D. 用蜡封盖盖片,置普通温箱培养。

        E. 培养 7~10 d 后可取材、固定、切片、染色观察。

        注意事项

        1. 该法也可将肿瘤组织与中肾组织以卵黄膜隔开,但一般将中肾组织置于下方,肿瘤组织位于上方。

        2. 如不加密封,可放 CO2 孵箱培养。

        来源:丁香实验

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