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        表玻皿器官培养法

        相关实验:器官培养实验

        最新修订时间:

        简介

        表玻皿器官培养法是由 Fell 和 Robinson 于 1929 年建立的一种器官培养的经典技术。是器官培养方法中在对一些来源有限、数量较少的组织进行原代培养时最常用的原代细胞培养方法。

        原理

        表玻皿器官培养法的基本原理是将表玻璃内加上鸡胚提取液和鸡血浆,凝固后将所培养的器官移植至表玻璃上,后置入培养皿内,送入培养箱内进行培养。

        材料与仪器

        器材:

        ① 2~3 只鸡胚

        ② 塑料培养皿(直径 3.5 cm)

        ③ 表玻皿(2 cm)

        ④ 消毒棉花

        ⑤ CO2 孵箱或普通温箱

        ⑥ 组织学切片染色设备

        试剂:

        ① 小鸡血浆

        ② 鸡胚提取液

        ③ 灭菌盐水

        步骤

        表玻皿器官培养法的基本过程可分为以下几步:(以鸡胚器官培养为例)

        A. 将小鸡血浆与鸡胚提取液混合(体积比为 1:1)置入经灭菌的表玻皿内,使成凝块。

        B. 将欲培养的鸡胚器官原基(如肢芽)置于凝块上。

        C. 表玻皿置于塑料培养皿内。

        D. 培养皿内放入湿润棉花(有人常在湿棉花上滴有 200 μg/mL 链霉素及 200 U/mL 青霉)

        注意事项

        1. 培养的器官原基不宜过大,以 1~2 mm3 为好,否则组织中央会因营养不足及缺氧而死亡。

        2. 操作要小心,须在无菌条件下进行,不然极易污染。

        来源:丁香实验

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