• 我要登录|
  • 免费注册
    |
  • 我的丁香通
    • 企业机构:
    • 成为企业机构
    • 个人用户:
    • 个人中心
  • 移动端
    移动端
丁香通 logo丁香实验_LOGO
搜实验

    大家都在搜

      大家都在搜

        0 人通过求购买到了急需的产品
        免费发布求购
        发布求购
        点赞
        收藏
        wx-share
        分享

        基于 5'- 酸酶等位基因鉴别法分析 SNP 分型

        相关实验:SNP分型分析实验

        最新修订时间:

        简介

        5'- 酸酶等位基因鉴别法或称 TaqMan 法是一种 PCR 为基础的 SNP 基因分型手段。TaqMan 技术依赖 Taq 酶的 5'→ 3' 外切核酸酶活性,在 PCR 延伸过程中降解与互补靶序列杂交结合的双重标记探针,该探针降解的过程中,荧光基团释放并与淬灭基团分离,最终释放出荧光信号,进而检测标记信号。


        原理


        基于 5'- 酸酶等位基因鉴别法分析 SNP 分型的基本原理是基于特异性的 Taqman 探针,该探针由共价结合在 5'- 端寡聚核酸探针的荧光基团和 3'- 端的淬灭基团组成,淬灭基团与荧光基因离得较近时,即可淬灭所有荧光基团发射的荧光;而探针降解的过程中,荧光基团释放并与淬灭基团分离,最终释放出荧光信号,被检测出来。同时检测过程中,引物会扩增包含 SNP 位点在内的 DNA 序列,SNP 位点处的靶序列完全互补配对的探针在退火时稳定杂交,而与等位基因特异性探针并不完全互补的探针则由于其融解温度较低,不能有效杂交,这样可以对 SNP 分型位点进行有效区分。


        材料与仪器

        样本的基因组 DNA


        步骤

        1)样本基因组 DNA 的提取与制备


        2)Taqman 探针的 PCR 产物检测


        3)SNP 位点的分型分析


        来源:丁香实验

        ad image
        提问
        扫一扫
        丁香实验小程序二维码
        实验小助手
        丁香实验公众号二维码
        扫码领资料
        反馈
        TOP
        打开小程序