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    PCR反应体系的循环参数

    最新修订时间：

    材料与仪器

    步骤

    3、延伸温度和时间：

    引物延伸温度一般为72℃，延伸的时间决定于扩增模板的长度，小于1kb的片段一般1～2min，而10kb的片段可能需要15min或更长时间。不合适的延伸温度不仅会影响扩增产物的特异性,亦会影响其产量。

    4、循环数：

    在25～30个循环内，扩增DNA增加明显，需要进一步增加产量时，可将第一次PCR产物稀释后再扩增，而不要盲目增加循环数，以免增加非特异扩增。


    来源：丁香实验

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