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        D-木糖异构酶微板分析

        相关实验:异构酶的测定实验

        最新修订时间:

        材料与仪器

        步骤

        实验所需「试剂」具体见「其他」


        D-木糖异构酶微板分析


        20 ul 的实验混合物和 20 ul 酶溶液(各自用 20 ul TES 缓冲液作对照)用 96 孔微板 50℃ 放置 15 min,15 min 后加入 0.15 ml 事先按 1:1 混合好的溶液 A 和溶液 B,然后将板在 80℃ 放置 40 min,用微孔板读数仪测 630 nm 处测吸光值。


        常见问题

        试剂:


        0.2 mol/L TES/NaOH,pH 8.0[N-tris(羟甲基)-甲基-2-氨甲基酸,Mr=229.3;9.2 g 溶于 100 ml 水中,用 1 mol/L NaOH 调节至 pH 8.0,用水加至 200 ml]


        0.4 mol/L D-木糖(Mr=150.1;1.2 g 溶于 20 ml 水中)


        0.03 mol/L MnSO4(单水化合物,Mr=169.0;57 mg 溶于 10 ml 水中)


        溶液 A:0.05% 间苯二酚(Mr=110.1;50 mg 溶于 100 ml 乙醇)


        溶液 B:FeNH4(SO42·12H2O(Mr=482.2)216 mg 溶于 1 L 浓 HCl

        来源:丁香实验

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