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        网状纤维与胶原纤维染色

        相关实验:结缔组织染色实验

        最新修订时间:

        原理

        网状纤维是网状结缔组织中的一种纤维,由交错排列的纤细的纤维组成。由于网状纤维由含有糖蛋白的胶原蛋白组成,这种组织蛋白质易与氨性银结合,再选用酸性染料染色液,能够显示网状纤维与胶原纤维的二种组织结构成分。常用 Gomori 银与丽春红-苦味酸复合染色法。

        材料与仪器

        步骤

        氨性银溶液

        甲液:硝酸银 10.2 g,蒸馏水 100 ml。

        乙液:氢氧化钠 3.1 g,蒸馏水 100 ml。

        取甲液 5 ml,滴加氨水至溶解清亮为止。再加入 5 ml 乙液,此时溶液突然变为黑色,再滴加氨水至清亮为止。补加 4 滴氨水,用蒸馏水补足 50 ml。


        高锰酸钾氧化液:高锰酸钾 0.5 g,蒸馏水 95 ml,3% 硫酸 5 ml。


        草酸漂白液:草酸 2 g,蒸馏水 98 ml。

        硫酸铁铵液:硫酸铁铵 2 g,蒸馏水 98 ml。


        1. 石蜡组织切片,常规脱蜡至水。


        2. 高锰酸钾氧化液处理 5 min,自来水洗 1 min。


        3. 草酸漂白液浸泡 2 min,自来水 1 min。


        4. 硫酸铁铵液处理 2 min,自来水洗 2 次。


        5. 蒸馏水洗 2 次,氨性银溶液处理 1 min。


        6. 蒸馏水洗 2 次,20% 甲醛液还原 3 min。


        7. 蒸馏水洗 2 次,0.2% 氯化金处理 1 min。


        8. 蒸馏水洗 2 次,丽春红-苦味酸染色液处理 3 min。


        9. 无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。

        注意事项

        1. 配制氨性银溶液必须使用干净器皿,放在冰箱内保存,可用较长时间。


        2. 高锰酸钾氧化液存放时间不能过长,以免失去氧化效果。


        3. 氨性银染色后,不能将银液倾去,要将蒸馏水直接倒在组织切片上轻洗。

        常见问题

        结果:网状纤维呈黑色,胶原纤维呈红色,背景呈黄色。

        来源:丁香实验

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